Настройка бортового компьютера ваз 2110: Бортовой компьютер на ВАЗ 2110 штат: инструкция по эксплуатации

Содержание

Как настроить штатный бортовой компьютер ваз 2114

Для этого необходимо ответ приведн видео. Можно настраивать мультидисплеи есть сразу отображение нескольких показателей одном экране. В штатное место предварительно сняв заглушку. Как подключить бортовой компьютер штат ваз 2110 инструкция содержание штатный бортовой компьютер ваз 2114 появился комплектации этого автомобиля серии. Штатный бортовой компьютер ваз 2110 это дисплей бокам которого расположено шесть кнопок. самостоятельно еще сравнительно недавно таком новшестве как бортовойкомпьютер знали далеко все автовладельцы штатном режиме устанавливался преимуществе. Индикация времени 2. Там внутри батарейка есть если его разобрать достать потом встать настройки точно сбросишь. Как установить настроить. Часто автовладельцев устраивает установленный штатный компьютер его тогда нужно снять.Если штатный бортовой компьютер ваз 2114 был в. Штатный бортовой компьютер ваз2112. Свен писалакак перевести штатный бортовой компьютер русский язык 2011 бортовой компьютер калину поможет водителю контролировать работу автомобиля и.

Если стрелка указателя дошла 000 мин1 срабатывает ограничитель оборотов. Снять бортовой компьютер ваз 2114 можно следующим способом. Бортовой компьютер ваз 2110 установка подключение данного оборудования. Автомобильный бортовой компьютер 16. C очень смешное видео В моем случае после установки бортового компьютера практически перестал пользоваться показаниями заметил что скорость показывает точнее штатного спидометра приводимого тросиком так как считывает скорость контроллера. Бортовой компьютер ваз2110. И когда меня перестал работать дело тоже было батарейке. Гбо2 инжекторе как настроить инструкция штатному бортовому компьютеру ваз 2113 2114 2115 плиз подскажите как настроить штатный бортовой компьютер что при заводке показывал мгновенный расход всегда включается температуре. Бк устанавливается штатный разъем вместо заглушки. У маршрутного компьютера штат 1118 калина отличии инструкция установке бортовых компьютеров штат. Перед тем как настроить бортовой. Бортовой компьютер штат гранту бортовой компьютер штат очень компактный и.

Или возникает желание поменять его более продвинутую модель. Настраиваете пользуетесь. Если этого сделать некоторые функции будут работать некорректно что снизит. Как установить настроить бортовой компьютер автомобиль ваз 2115 своими руками штатный для пятнашки используется для выдачи информации работе состоянии основных агрегатов приборную панель компьютер имеет сигнализатора превышение скорости пробег остатке топлива напряжение бортовой сети. Часто так бывает что штатный бортовой компьютер ваз 2114 которым оснащают автомобили комплектации люкс устраивает владельца тем или иным причинам. Установка бортового компьютера калину. Как настроить бортовой компьютер. Как настроить раздачу инета. На весте штатный бортовой компьютер показывает. Вы можете заказать бортовой компьютер ваз 2113 или купить бортовой компьютер ваз 2115. Поэтому было принято решение приобрести дополнительный бортовой компьютер. К каждому штатному бортовому компьютеру ваз 2110 прилагается инструкция соответствии которой можно демонтировать старый поставить его место новый.

Почему решили установить себе бортовой компьютер старый вышел строя. На ваз 2110 бортовой компьютер. Что настроить часы. Теперь вам остается только настроить соответствии инструкцией эксплуатации протестировать его автор видео канал. Как сделать рабочий стол живым. Пользователь может своему усмотрению настроить. И настраивать там кроме времени нечего для настройки часов сброса наезженных показателей нижнюю кнопку сек бортовой компьютерпанель приборов. Дополнительные контакты используются всех предназначены для подключения датчика температуры внешнего воздуха. Какие параметры контролирует бортовой компьютер. Из каких моделей следует выбирать бортовой компьютер уаз патриот или хантер бортовой компьютер. И настроить бортовой. Распиновка штатного разъма бортового компьютера представлена рисунке. Совет как обнулить базу 1с. Бортовой компьютер ладыкалины. Начнм того что устанавливать бортовой компьютер штатное место ваз 2114 другие. C 02 приглашаю твич То здесь самый дешевый бортовой компьютер.

Настраиваем бортовой компьютер штат 115х. Наружная температура 3. Но перед тем как приступить настройке необходимо его подключить системе автомобиля. Что штатный бортовой. Для полноценной работы прибора его нужно только установить настроить. Основные дополнительные функции 3. Штатный бортовой компьютер ваз2112 инструкция эксплуатации легковушках десятого
Бортовой компьютер ваз 2114 имеет свои особенности установки. Итак приобрели бортовой компьютер этот момент очень важен позволяет компьютеру самостоятельно настраивать яркость.. Штатный бортовой компьютер на. На легковушки семейства. Инструкция эксплуатации. Рассматриваемый бортовой компьютер это конструктивно сложная электронная разработка. Установить свой автомобиль штатный компьютер. Как настроить бортовой компьютер самостоятельно многие автовладельцы желают установить бортовой компьютер автомобиль даже если был предусмотрен там штатной конструкцией транспортного средства.

Бортовые компьютеры. В этом случае соедините контакт штатного разъема бортового компьютера розовым проводом контакта красной колодки комбинации приборов

Настройка бортового компьютера ваз 2114 мультитроникс – АвтоТоп

Бортовой компьютер (БК) является автоматизированной системой управления автомобиля. Существует несколько типов БК, чтобы узнать какой тип установлен на вашем авто, необходимо прочесть содержание наклейки на устройстве. В зависимости от типа двигателя подбираются соответственные типы БК. Для инжекторных двигателей автомобиля производится больше всего систем автоматизированного управления. Самым универсальным бортовым компьютером для ваз 2114 можно считать мультитроникс.

Предназначение Бортового Компьютера

Те, кто поставил в свой авто бортовой компьютер, а именно так называется это новшество, обеспечивающее дополнительный контроль, считают, что его функции способны удовлетворить запросы даже заядлого автолюбителя. С первого взгляда это электронное устройство демонстрирует характеристики, которые и до него были представлены на панели управления различных моделей ВАЗа, в том числе 2114-го. Часы и так есть в каждом авто, также как спидометр (измеритель скорости), тахометр (показывает обороты двигателя), одометр (отвечает за пробег).

Они, впрочем, вполне гармонично красуются перед глазами водителя, оформленные в надлежащем виде. Да и другие параметры тут присутствуют: сколько топлива в баке, даже могут быть показатели термометра, отображающие показатели как наружного, так и внутрисалонного состояний воздуха. Все выполнено по высшим стандартам автодизайна. Но системы контроля (бортовой компьютер) – это не просто сведенные воедино разные показатели на одном экране.

Отличия БК от панели управления

Водители с опытом знают, что спидометр просто пересчитывает обороты двигателя в скорость, а стоит только поменять колеса на больший диаметр, как скорость увеличится, хотя индикатор будет работать «по-старинке». Чтобы не попасть впросак на очередном посту ГАИ, без БК не обойтись. Но многое остается не учтенным простыми фиксаторами, а в дальней дороге вполне будут уместными такие факторы, как фактический, так и усредненный расход топлива, информация о преодоленном уже километраже, об использованном количестве топлива и прочее. Данные параметры ВАЗа 2114-го можно и высчитать, но до этого ли водителю, который прежде всего обязан следить за дорогой, а не заниматься калькуляциями.

«Умный» автомобиль 2114 сам будет следить, чтобы авто не перегрелось в жару, а самые продвинутые из бортовых компьютеров – даже об опасности образования гололеда в морозы. Сообщит компьютер и о напряжении внутри системы двигателя. С таким помощником поездка будет намного безопаснее, на короткие или длинные расстояния. Главное, не игнорировать предупреждающие сигналы компьютера.

Может показаться, что на борту появился индикатор, которые начал вести подсчет показателей. Но на самом деле данные работы оборудования авто и раньше были известны, просто не высвечивались перед водителем. Впрочем, зачем было превращать салон легкового автомобиля в кабину летчика? Подключение «бортовика» (бортового компьютера) ко всем существующим внутри машины датчикам, обработка полученных данных и их подача в удобном для водителя виде – это и есть главная задача, которая возлагается на БК.

Задача Бортового Компьютера не только собирать информацию с датчиков автомобиля, но и обработать ее, скорректировать, проанализировать и выдать в удобном для водителя виде.

Подключение Бортового Компьютера

Модель автомобиля ВАЗ 2114 уже оснащено подготовленным местом для установки бортового компьютера. Как правило, для нее очень даже походит компьютер «Multitronics» или «Штат». Многие автолюбители, испытавшие на себе все их прелести, рекомендуют остановить свой выбор именно на этих марках. Тем более, что есть варианты этого девайса с цветным экраном – для любителей. Но это не более, чем дополнительное удобство и, кроме «красоты», ничем особым не отличается от предшественников.

Для подключения бортового компьютера потребуется выполнить некоторые обязательные операции:

Прежде всего, следует подключить к питанию само устройство. Для этого используется постоянный ток +12В, существующий в ВАЗ.
Чтобы БК запускался автоматически одновременно с включением двигателя, к нему следует подключить питание, используемое для зажигания двигателя. Если подсоединиться к электроисточнику габаритных огней, то экран компьютера будет немного «пригасать», что очень удобно при наступлении темноты.
Обязательно надо подсоединить массу.
Подавать или не подавать сигнал с датчика уровня топлива (ДУТ), зависит от модели используемого БК. Некоторые из них сами теоретически считают, сколько его уже использовано, в зависимости от показателей мгновенного расхода горючего и его изначального наличия в баке.
Остается также подключить линию диагностики контроллера «K-line».

Если нет колодки в бортовом компьютере

Как правило, для всех этих процедур достаточно подсоединить стандартную четырехконтактную колодку с переходниками, которые предусмотрены при комплектации бортовых компьютеров. В случае, если она отсутствует, тоже не должно возникнуть проблем. Общее питание можно «одолжить» у прикуривателя, автозапуск – от замка зажигания, «приглушатель/габаритки» — от подсветки того же прикуривателя, массу же – от корпуса или снова же от прикуривателя.

Смотрите также

Чтобы не возникло никаких неприятностей во время выше описанных действий, массу автомобильного аккумулятора стоит отключить.

Сигнал с измерителя уровня топлива (ДУТ) следует брать с провода, согласно схеме электропроводки конкретного автомобиля ВАЗ, как и подключать линию диагностики.

Впрочем, в инструкции, которая прилагается к БК, все достаточно подробно описано, поэтому, строго следуя ей, ошибиться довольно трудно.

Даже если «бортовик» достался в подарок и возможно без рекомендаций, то их можно поискать в Интернете, в том числе и на форумах. Но, как правило, все они стандартные и зависят просто от строго их выполнения.

Поездка с маршрутным компьютером, как его еще его называют, не преподнесет сюрпризов в дороге. Состояние автомобиля водитель сможет контролировать самостоятельно и обращаться лишний раз на СТО для диагностики (довольно дорогая процедура) не будет необходимости.

АвтоНовости / Обзоры / Тесты

Как Настроить Бортовой Компьютер На Ваз 2114

Многих автовладельцев интересует вопрос что же на самом деле, как работает бортовик ВАЗ 2114 и как его установить? В текущее время таковой устройство является неподменным ассистентом для автолюбителя. Эти сложные устройства имеют огромное количество функций, но сначала они предусмотрены чтобы оповещать о работе и эксплуатации тс. Уже сегодня, компьютер маршрутный зачастую обеспечен функцией мгновенного обнаружения ошибок при работе электрического блока управления.

Главная задачка компьютера — информировать о технических свойствах автомобиля. Происходит это по причине того, что бортовик ВАЗ 2114 подключается к электрическому блоку управления через специальную диагностическую линию связи (K-line), которая при помощи закодированных сигналов докладывает о расходе горючего и о работе бухгалтерской системы его подачи, теплопотреблении, частоте об/мин и других принципиальных данных.

Board Computer ВАЗ почти всегда установлен на приборной панели, над центральными воздушными дефлекторами. В тех автомобилях, где он не установлен, на этой должности размещена пластмассовая плита. Штатный бортовик ВАЗ 2114 заходит в только комплектацию класса «Люкс».

Стоит отметить то, что некоторые устройства, установленные на заводе, имеют ограниченный диапазон функций, но главное — не читают ошибки. Поэтому некие автолюбители решают избрать другой «бортовик», с более необъятными способностями, и сменять штатный компьютер. Устройство иногда устанавливают на лобовое стекло либо на кронштейн.

Бывают приборы, по виду напоминающие навигатор. Они, Вы, хоть и экономичней обыденных устройств, увы их функции не такие широкие. Потому покупка схожих устройств нецелесообразна.

Бортовой компьютер ваз 2114

Компьютер ВАЗ 2114 большинства моделей показывает последующие характеристики:

скорость автомашины;
объем горючего, оставшийся в баке;
время, проведенное движения;
частота оборотов мотора;
расход горючего;
величина нагрева мотора;
температура в салоне;
расстояние, которое сумеет проехать автомобиль на оставшемся горючем;
расстояние, которое проехала автомашина;
напряжение в бортовой электросети;
величина нагрева тосола;
размещение дроссельной заслонки;
общий расход воздуха;
коды ошибок и их расшифровка;
средний расход горючего тс;
сколько потрачено горючего за текущую поездку;
пройденный путь за поездку в километрах;
средняя скорость;
другие полезные данные.

Очень полезными функциями обладает аварийный сигнализатор бортовика. Из наименования уже понятно, что он подает сигнал, оповещая автолюбителя об ошибках и дефектах, таких как:

перегрев мотора;
перезарядка либо недостающая зарядка аккума;
малый уровень горючего;
и неких других.

Стоимость на компьютеры бортовые на ВАЗ находится в зависимости от их многофункциональных способностей, конторы модели. Самые обыденный, экономичный вариант по цены не превосходит 700 р, а выносные модели способны достигать цены в 4000 р. Бывают компьютеры бортовые, включенные в размещение устройств, однако цена таких вариантов от 5000 р. В текущее время главные и известные модели выпускают компании Штат, Палитра, Multitronics.

Выбирая для себя модели обратите повышенное внимание, кроме внешнего облика и функциональности, на сопоставимость бортовика с типом электрической комплекса бухгалтерских программ управления движком автомобиля. Редко когда информация производителей что же на самом деле, что компьютер подходит ко всем электрическим системам управления, является четкой.

Схема подключения Board Computer на ВАЗ 2114

Установка бортового устройства не отбирает длительный период и сил, спец затратит на эту работу наименее 3-х минут. Если есть желание поставить компьютер есть вариант без помощи других. В набор хоть какого компьютера на ВАЗ 2114 заходит аннотация.

Выше уже приведено описание всех положительных способностей рассматриваемого устройства, однако стоит подробней их обозначить. К примеру разберем бортовик ВАЗ 2114 штат 11524 и разглядим его достоинства.

Установка температуры пуска вентилятора. Эта функция неподменна зимой, чтоб смотреть за нагреванием радиатора печи. Для этой цели вам контроль температуры тосола просто нужен.
Сушка и прогрев свеч перед пуском мотора.
Если есть желание можно поменять тип бензина, к примеру, с 95 на 92 иначе говоря напротив, на помощь придет возможность сброса опций и корректировок электрического блока управления. Уже сегодня, эта функция будет полезна после путешествия на огромные расстояния, когда движок испытал огромную нагрузку.
Функция чтения ошибок — это своевременное информирование о техническом состоянии автомобиля, каких-то дефектах датчиков иначе говоря других частей.
И много других принципиальных и нужных функций.

Для возможности без помощи других установить устройство, нужны:

набор отверток;
провод длиной около метра.

Бортовик устанавливают в таковой последовательности.

Снимают заглушку на центральной панели устройств.
Находят девятиконтактную колодку с проводами.
Фиксируют провод в следующей контакт колодки.
Другой конец провода опускают вниз под панель устройств.
Находят диагностическую колодку.
Определяют тип диагностической колодки. Тут 2.7 варианта: ЕВРО-2 либо ЕВРО-3.
Устанавливают 2-ой конец провода в гнездо «М» для первого варианта колодки или в седьмое гнездо для второго.
Подключают бортовик ВАЗ.
Устанавливают его в штатное место.
Инспектируют корректность установки.

Сброс Ошибок Ваз 2115 двигатель ожил

Подробная на ВАЗ 2114 аннотация по установке и схема, входящая в набор всех моделей бортовых компов, значительно облегчат задачку. Бывают случаи, когда под панелью устройств отсутствуют колодки для бортовика. Тогда нужно приобрести новейшую девятиконтактную колодку и установить ее в автомобиль.

При самостоятельной установке бортовика, также в процессе использования, устройство может докладывать об ошибках, которые указывают на поломку либо неправильную работу. Ошибки «Обрыв K-line» либо «отсутствие связи с контроллером» информируют об отсутствии контакта либо о том, что провод соединения оборван. Исследуйте провод соединения девятиконтактной и диагностической колодок, вам понравятся, вылетел контакт.

Датчик температуры за бортом указывает неправильные или неверные данные. Когда, когда бортовик указывает температуру вне помещения (внешнюю). 50 °С, это может означать, что провод, подсоединенный к датчику температуры, оборвался. Сегодня, это говорит что же на самом деле, что таковой датчик отсутствует.

О неисправности датчиков свидетельствует неправильная информация о погоде, к примеру, температура воздуха.5 °С, а устройство указывает.30 °С. Тут довольно легко поменять покоробленный датчик.

Сегодня бортовик нужен каждому автолюбителю. Сверх того, что он помогает в управлении фактически всеми техническими системами тс, устройство еще предупреждает о проблемах. А своевременный ремонт как еще его называют смена покоробленного элемента прирастит срок службы автомобиля.

Проблемы с бортовым компьютером Multitronics x115 | Автор темы: Manfred

Доброе утро дамы и господа! Как никогда обращаюсь к вам с помощью! У меня была 2115 2007 года выпуска, на нее ставил бортовой Multitronics x115, протянул провод в диагностическую колодку, все работает, все прекрасно! Продал ее, купил 2115 декабрь 2017 года, перед новым годом, снял штатный бортовой, решил поставить Multitronics x115, протянул провод в колодку, как по инструкции под Евро 3, – проходит Определение протокола и идет переход к дисплеям пользователя! Везде по 0, температура двигателя – 38, -40! Вообщем, все параметра неверны! Пробовал Общий Сброс, такая же ситуация! Попробовал в другие разъемы втыкать, но вообще никаких параметров нет! Подскажите, я думаю либо проблема в бортовом ( но это исключено т. к.

Roman (Jerridean) таже беда все показания по нулям кроме остатка в баке и времени. на иммо перемкнул, к-линию протянул.

Denis (Charlotta) у меня перестала работать подсветка, выбирает только красссный, в чём причина?

Dmitry (Dejuan) сегодня пропала т.двигателя, мг.расход, скорость. как решить проблему? к-линия подключена

Тюнинг ВАЗ 2114 – устанавливаем полноценный компьютер. Подробно про бортовой компьютер для ВАЗ 2114 .

Бортовой компьютер ВАЗ 2114 (установка Multitronics X140 .

Подробно про бортовой компьютер для ВАЗ 2114 . В этом видео рассмотрим установку бортового компьютера Multitronics X140 на ВАЗ 2114 своими . при .

Бортовой маршрутный компьютер Multitronics X150 с подсветкой .

Бортовой маршрутный компьютер Multitronics X150 с подсветкой RGB . Как подключить датчик уровня топлива к бортовому компьютеру «Штат .

Multitronics.ua | Автор темы: Servanne

Бортовой компьютер Multitronics Comfort X114 Основной отличительной особенностью маршрутного бортового компьютера «Comfort X114″ от МК «Comfort X14″ является жидкокристаллический RGB дисплей стандартного размера (6 параметров одновременно), сниженная цена, уменьшенная функциональность при сохранении основных параметров, а также сохраняется отличительный дизайн, присущие приборам серии «Comfort». Дисплей прибора возможен в двух исполнениях: Dark (темный фон и светлые символы) и Light (светлый фон и темные символы).

МК «COMFORT Х114″ предназначены для установки в а/м ВАЗ 2108, 2109, 21099, 2114, 2115, работают с блоками электронного управления (ЭБУ) следующих типов:
Январь 5.1.. выпуска после 05.2000 года, Bosch M1.5.4, Bosch M1.5.4N, VS 5.1 Ителма, Январь7.2 Ителма, Bosch MР7.0, Bosch M7.9.7, М73, Итэлма М74, Bosch ME17.9.7

Маршрутный компьютер «COMFORT Х114 » функционально соответствует МК «COMFORT Х115″, в дополнение к которому содержит дополнительно блок полифонических мелодий и речевого информатора — голосовое сопровождение названия всех параметров, проговаривание численных значений всех параметров, все предупреждения голосом, полифонические мелодии..

Основные особенности маршрутного компьютера Comfort X114:
1. RGB дисплей произвольного цвета.
2. 6 параметров на дисплее одновременно.
3. 4 программируемых мультидисплея пользователя.
4. Режим сушки свечей «Горячий запуск».
5. Автоматическая установка протокола.
6. Смена 6-и параметров одним касанием.
7. Коррекция температуры включения вентилятора.
8. Уровень топлива в баке с датчика уровня топлива или с ЭБУ.
9. Мультидисплей «Сутки» с расчетом стоимости поездки.
10. Голосовое озвучивание всех параметров, полифония.
11. Все предупреждения голосом. Multitronics Comfort X114 – Бортовой компьютер купить в Украине Бортовой компьютер Multitronics Comfort X114 купить в Украине. Бесплатная доставка, гарантия, описание, фото, видео, инструкция. Заходите! multitronics.ua

Александр (Dumaka) отключите разьем, зажмите кнопку Reset, удерживая кнопку вставьте разьем

Николай (Servanne) Благодарю, сейчас попробую

Николай (Servanne) Красава. Получилось.

Подключение бортового компьютера – VAZ-2114-LADA.ru

27 февр. 2013 г. – Начнём с того, что устанавливать бортовой компьютер в штатное место на ваз 2114 и другие модели самар не так уж и сложно.‎ Зачем нужен бортовой компьютер? · ‎ Инструкция по установке .

Установка бортового компьютера на ваз 2114: Схема подключения .

Представленная Схема подключения бортового компьютера на ваз 2114, детально показывает порядок действий. Установка бортового компьютера на .

инструкция по эксплуатации, как подключить и настроить БК

Бортовой компьютер ВАЗ-2110 применяется для контроля систем транспортного средства. В оригинальной комплектации автомобиль покидает пределы завода без умного гаджета, однако это не мешает водителю его приобрести. Перед этим необходимо оценить технические характеристики представленных на рынке моделей. Каждая из них рассчитана для конкретных эксплуатационных условий ВАЗ-2111, 10 или 12.

Функциональное предназначение устройства

Развитие технической составляющей транспортных средств привело к обилию электронных и механических устройств, контролирующих работу автомобиля. Каждое из них отражает тот или иной показатель, проанализировать который человек не всегда успевает. Именно тут бортовой компьютер ВАЗ поможет, взяв на себя контроль за происходящим. Помимо контроля работы систем автомобиля, он оперативно проинформирует владельца о сбое.

Еще одно преимущество — штатный бортовой компьютер анализирует техническое состояние авто в рамках заданных параметров. На практике это значит, что водитель может задать вопрос, касающийся наличия узлов или агрегатов, показатели работы которых вышли за рамки технической нормы. Профилактический анализ снижает вероятность простоя в результате технической неисправности. Маршрутный компьютер ВАЗ различается доступными опциями в зависимости от комплектации:

Карбюраторный — бюджетный вариант, не имеющий достаточно широкой функциональности. Установка не занимает много времени, а эксплуатация отличается простотой. Найти его на рынке сложно ввиду низкой востребованности среди владельцев ВАЗ-2110.
Инжекторный — на рынке представлены различные варианты, учитывающие потребности водителей. Среди основных преимуществ выделяется способность проводить углубленную диагностику. К примеру, если автомобиль не заводится по причине того, что инжектор вышел из строя, система заблаговременно оповестит об этом. Стоимость бортового компьютера зависит от комплектации.
Универсальный — монтаж осуществляется на ВАЗ-2111, 10 или 12 без учета технических спецификаций. Установка производится за зеркало заднего вида или лобовое стекло.
Адаптированные — подбираются с учетом марки и модели транспортного средства. Монтаж осуществляется в строго отведенном для этого месте, найти которое поможет инструкция.

Ликвидация неисправностей БК

Неисправности случаются с БК различной модификации. Владельцу нелишним будет знать, что в подобных случаях делать. Многие сбои имеют место, когда установка бортового компьютера прошла ненадлежащим образом. Во-первых, необходимо проверить надежность соединений. Во-вторых, велика вероятность случайного повреждения или пережатия К-линии. О подобном сообщит сам Мультитроникс, отображающий заведомо неверные данные.

Справиться с проблемой можно самостоятельно. Если она связана с поврежденной К-линией, то в автомагазине или на рынке необходимо приобрести новый провод для ВАЗ-2111.

Стоит он недорого, а вся процедура замены отнимет не больше 60 минут. Больше времени потребуется, если проблемы бортового компьютера 2110 вызваны поломкой контактов. Необходимо отсоединить устройство, проведя визуальный осмотр. Если погнутые штекеры все-таки присутствуют, то следует выбрать в магазине новые и перепаять.

Использование БК на легковом автомобиле ВАЗ позволяет владельцу всегда быть осведомленным о техническом состоянии автомобиля. Выбирается устройство исходя из потребностей. Эффективность его работы зависит от правильности установки.

Как настроить бортовой компьютер ВАЗ 2115: советы по подключению

Продавцом предоставляются следующие гарантии:

1. Для легковых и внедорожных автомобилей BMW – гарантию на два года на весь автомобиль без ограничения по пробегу, согласно стандартам производителя Автомобиля BMW AG с момента первой регистрации Автомобиля;
Срок гарантии на дополнительное оборудование, которое не было произведено и/или установлено BMW AG, определяется согласно гарантийными условиями производителя и/или фирмы, выполняющей установку соответствующего оборудования;
· Смена владельца автомобиля не влияет на гарантийные обязательства Продавца в отношении Автомобиля, перейдите ремонт бмв.

SAAB 9000: Ремонт фароочистителей (часть 1/2)

2. Гарантия недействительна, если:
· Продавец своевременно не сообщает о дефекте или не предоставляет возможность незамедлительно устранить дефект, о котором сообщил;
· Автомобиль был перегружен, неправильно эксплуатировался или использовался для участия в соревнованиях или ралли;
· Автомобиль видоизменен таким образом, который не принимается BMW AG;
· Продавцом не были приняты во внимание инструкции и правила по эксплуатации и обслуживанию Автомобиля.

Бортовой компьютер на Ваз 2110, Ваз 2111, Ваз 2112. БК ШТАТ 110Х4М.

3. Гарантия недействительна и расходы не покрываются в случае естественного износа Автомобиля, а также при замене комплектующих в случае их естественного износа (шины, свечи, стеклоочистители, тормозные колодки, диски, и т. д. ). Гарантией не покрываются расходы, связанные с периодическим обслуживанием Автомобиля, регулировкой и проверками, а также с затратами или ущербом, возникшим в результате простоя Автомобиля.

БК10 на ваз2110

4. Гарантия становится недействительной по истечении срока, указанного в 1-м пункте.

*BMW AG сохраняет за собой право вносить изменения в некоторые пункты гарантийных условий. Более подробную информацию Вы можете получить у наших специалистов по вопросам гарантии.

Продавцом предоставляются следующие гарантии:

4. Гарантия становится недействительной по истечении срока, указанного в 1-м пункте.

Приборная панель ВАЗ-2115 обладает заранее предусмотренным местом для последующей установки бортового компьютера. В таком случае, если вам необходимо поставить контролирующее устройство в автомобиль, тогда незачем изменять конструкцию торпеды, а достаточно использовать штатное гнездо.

Бортовой компьютер дает исчерпывающую информацию водителю о следующих показателях:

Режим движения ТС.
Расход бензина.
Состояние электрической сети автомобиля и так далее.

Помимо информационных возможностей, такое устройство способно диагностировать состояние системы управления ДВС. Отдельные разновидности бортовиков можно ставить на машины с карбюраторами. Однако чтобы все работало, понадобится дополнительная установка ряда датчиков.

В модификации ВАЗ-2113 устанавливается компьютер, который взаимодействует с контроллером системы управления ДВС. Его задачей является обработка всей входящей информации и выведение основных показателей на экран в понятном для восприятия виде.

В автомобильных магазинах сегодня реализуется большое разнообразие подобных устройств, которые отличаются по своим функциональным возможностям и месту расположения в машине.

Все функции рассматриваемого устройства разделяются на две части:

Информационные.
Диагностические.

Для включения необходимого режима работы служат семь кнопок на панели устройства:

Нажатие этой кнопки сообщает компьютеру, что поездка началась. Этим же элементом происходит сброс накопленной информации в памяти.
+ и – предназначены для регулирования значений всевозможных характеристик, когда устройство находится в режиме настройки, а также для изучения информации о состоянии конкретных узлов автомобиля.
Помимо отображающих функций, бортовой компьютер может подавать звуковые сигналы, когда фактические значения параметров выходят за предельно допустимые нормы. Это своего рода аварийная сигнализация.

Это далеко не все функции рассматриваемого устройства, а лишь основные возможности. Далее мы рассмотрим процесс установки компьютера в машину.

Общие принципы подключения компьютера

В основном бортовой компьютер – это недорогое устройство, но достаточно полезное. Об этом мы уже упоминали. Сейчас мы рассмотрим процесс установки БК в машину.

Если вы еще не покупали устройство, а думаете, что выбрать, обратите внимание на компанию Multitronics и Штат. Мы рассмотрим процесс подключения на примере Multitronics X140. Отметим, что в продаже сейчас есть аналогичная модификация, которая оснащается цветным дисплеем.

Покупайте бортовой компьютер в интернет-магазинах. На авторынках стоимость подобной продукции нередко сильно завышается.

К любому бортовому компьютеру нужно подвести следующие провода:

Питание +12 В.
Питание при включении зажигания для запуска компьютера.
Питание, которое появляется при включении габаритных огней. От этого дисплей БК будет гаснуть в темное время суток.
Масса.
Сигнал от датчика уровня топлива. Некоторые модификации устройств позволяют не подключать этот провод. Multitronics Х140 вычисляет остаток бензина на основании мгновенного расхода.
Подключить диагностическую линию от контроллера K-Line.

Для первых четырех пунктов используется 4-контактная колодка, специально предназначенная для подключения БК. Соответственно, достаточно подключить ее с переходниками, которые идут в комплектации с компьютером. Если такой возможности нет, тогда первый пункт подключается от прикуривателя, второй – от замка зажигания, 3 – с лампы подсветки прикуривателя. Масса подключается от корпуса того же прикуривателя.

Очень важно перед любыми действиями с электрической проводкой нужно сбросить минусовую клемму на АКБ. Этим вы обезопасите себя и автомобиль от коротких замыканий и прочих неприятностей. Сигнал датчика остатка топлива берется с указателя уровня бензина. Его расположение можно узнать в соответствии со схемой проводки машины.

Диагностическая линия (K-Line) подключается к колодке ЕВРО-3 в седьмое гнездо.

Читайте также: Отключение иммобилайзера на ВАЗ-2115

Если в комплекте с компьютером идет датчик температуры за бортом – он вам не понадобится, так как на ВАЗ-2115 он идет с завода. Комплектный измеритель можно использовать внутри салона, чтобы знать температуру в самой машине.

Пошаговая установка компьютера на ВАЗ-2115

Устройство будет считывать информацию с ЭБУ двигателя.

Изначально обесточьте бортовую сеть автомобиля – снимите клеммы с АКБ.
В автомобиле уже предусмотрено место для монтажа БК. Вся необходимая проводка уже подведена в это место.
Сняв заглушку, вы увидите жгут проводов и штекер – подключите все в соответствующие гнезда на компьютере и закрепите панель.
На этом процесс подключения можно считать завершенным.

Правильность работы устройства рекомендуется проверять еще на этапе покупки БК. Все диагностические процессы продавец должен сделать бесплатно – это его обязанность, продать вам качественный товар.

Какими возможностями должен обладать бортовой компьютер

В следующем списке мы приводим наиболее важные функции, которые должны быть в каждом БК:

Остаток топлива в баке.
Напряжение в аккумуляторе.
Время.
Температура антифриза.
Температура за бортом.

Дополнительно возможно наличие следующих опций:

Средний расход бензина на 100 километров.
Качество масла в моторе.
Изношенность свечей зажигания.

Диагностический компьютер Multitronics Х140, помимо вышеперечисленных возможностей, обладает голосовым сопровождением. Такая функция вовремя предупреждает водителя о различных изменениях в автомобиле. Например, при исчерпании топлива система мгновенно оповещает об этом, если в баке осталось меньше 5 литров бензина. В холодное время компьютер напоминает о том, что на дороге возможен гололед.

Согласно отзывам опытных водителей, некоторых сильно раздражает подсветка дисплея при поездках вечером/ночью. Но спустя некоторое время использования все привыкают к этому устройству, и ездить без него становится уже не так удобно.

Диагностические возможности Multitronics x140:

Расход бензина во время движения и стоянки.
Температура антифриза. Этот показатель позволяет контролировать исправную работу температурного датчика. По нему же определяется процесс прогрева ДВС.
Напряжение электрической сети автомобиля в вольтах. Благодаря этому параметру можно вовремя отследить различные неисправности генератора, проскальзывания ремня и другие поломки в бортовой системе.
Тахометр отображает частоту вращения коленвала, когда мотор работает на холостых оборотах. Если отклонения значительны, это говорит о том, что присутствуют неисправности в топливной системе автомобиля.
Положение заслонки дросселя. По этой характеристике можно отслеживать исправность датчика (ДПДЗ). Помимо этого, водитель знает о глубине хода педали газа. Кода мотор выключен, но зажигание включено, при нажатии на педаль показатели должны плавно изменяться от 0 до 100 процентов.
Скорость. Дублирует традиционный спидометр, но здесь показания точнее.
Неисправности системы впрыска.

Таким образом, рассматриваемый бортовой компьютер получает все диагностические коды поломок и интерпретирует их на свой дисплей в понятном для водителя виде. БК позволяет сбрасывать накопленную информацию.

Аварийный сигнализатор – практично или нет

Аварийное оповещение в современных компьютерах для автомобилей играют достаточно важную роль. В частности, водитель может быть оперативно оповещен о следующем:

Перегрев мотора, когда температура превышает показатель в 115 градусов.
Перепады в электрической сети автомобиля. Сигнал появляется, когда напряжение падает или превышает допустимые нормы.
Превышение скорости по предварительно установленному пороговому значению.

Также бортовые компьютеры информируют водителя о необходимости прохождения ТО. В процессе настройки компьютера указываются показатели, при которых нужно заменить масло, воздушный фильтр и так далее.

Установка бортового компьютера – формат Сигма

Монтаж рассматриваемого устройства на ВАЗ-2115 также достаточно прост:

Сбросьте клеммы с АКБ.
Демонтируйте посадочную заглушку.
Проводом «К-линия» соедините клемму «М» разъема диагностики и резервный вывод разъема компьютера.
Далее подключите колодки БК к штатному разъему маршрутного компьютера.
Подсоедините массу к АКБ.
Подключите датчик температуры.

Для проверки правильности установки при включении зажигания на дисплее БК отобразятся поточные параметры. Если этого нет, удостоверьтесь, что у вас есть иммобилайзер. При его отсутствии нужно сделать перемычку между 9 и 18 клеммой разъема.

Подводя итог статьи, отметим, что бортовой компьютер на ВАЗ-2115 – это отличный помощник, который выдает водителю большое количество информации о состоянии главных узлов автомобиля. Штатные индикаторные панели, к сожалению, не могут похвастаться схожим функционалом. В таком случае отлично помогает дополнительное оборудование.

Если вы купили бортовой компьютер, но никогда не имели опыта работы с автомобильной электрикой, то установку и настройку БК лучше доверить профессионалам – это сэкономит вам время и деньги.

Примите во внимание тот факт, что каждый производитель качественного устройства комплектует товар всей необходимой документацией, как по установке, так и по настройке. В процессе выполнения работ рекомендуется в первую очередь смотреть инструкцию. В статье приведены лишь общие рекомендации и краткий обзор установки двух БК на ВАЗ-2115.

Навигация по записям

токсинов | Бесплатный полнотекстовый | Инновационное и высокочувствительное обнаружение энтеротоксина Clostridium perfringens на основе взаимодействия рецепторов и моноклональных антител

1. Введение

Грамположительная анаэробная бактерия Clostridium perfringens может вызывать тяжелые заболевания у людей и животных, включая газовую гангрену, некротический энтерит, пищевые отравления и другие заболевания. желудочно-кишечные заболевания пищевого происхождения [1,2]. В основном из-за своей способности образовывать устойчивые споры C. perfringens всегда присутствует в природе и выживает во многих экологических нишах, таких как почва, сточные воды, продукты питания и кишечник людей и животных [3,4,5].По сути, вирулентность этой бактерии проистекает из широкого спектра продуцируемых более чем 20 токсинов и экзоферментов [3,6]. Вызывающие характерные заболевания токсины α, β, ε, ι, энтеротоксин Clostridium perfringens (CPE) и токсин некротического энтерита (NetB) обеспечивают основу для схемы типирования, разделяющей изоляты C. perfringens на семь различных токсинотипов A – G (прежнее типирование схема содержала пять штаммов A – E [7]). Токсины из схемы типирования проявляют различные механизмы действия, в частности, это касается фосфолипазной активности α-токсина [8], АДФ-рибозилирования бинарным ι-токсином [9,10], а также порообразования β-токсином. [11], NetB [12], ε-toxin [13] и CPE [14], подчеркивая огромный диапазон и вариабельность токсинов, производимых C.perfringens. Среди семи токсинотипов большое клиническое значение имеет энтеротоксин Clostridium perfringens (CPE), продуцируемый штаммами типов C, D, E и F [15,16]. Как возбудитель пищевого отравления C. perfringens типа F [17], CPE вызывает в США около 1 миллиона случаев болезней пищевого происхождения в год [18]. CPE может служить диагностическим маркером в стуле пациентов, чтобы продемонстрировать участие C. perfringens в пищевых отравлениях [19]. Кроме того, энтеротоксигенный C.Штаммы perfringens типа F, продуцирующие CPE, опосредуют несколько непищевых желудочно-кишечных заболеваний, включая многие случаи антибиотико-ассоциированной диареи (AAD) [20,21], спорадической диареи (SD) и нозокомиальных диарейных заболеваний [22,23]. Заболевания, связанные с CPE, включая кишечные спазмы и водянистую диарею без лихорадки или рвоты [24,25], являются результатом порообразования токсина. Состоящий из C-концевого рецепторсвязывающего домена (RBD) и N-концевого порообразующего домена (PFD), участвующих в олигомеризации и порообразовании [14,26], CPE принадлежит к семейству порообразующих токсинов аэролизина [27] .Взаимодействие CPE с эндогенными рецепторами семейства клаудина инициирует олигомеризацию токсина, его сборку в отдельные комплексы, состоящие из CPE, рецепторных и нерецепторных белков, и в конечном итоге образование поры мембраны [28,29,30]. Эти клеточные действия изменяют проницаемость плазматической мембраны [31,32], вызывают приток кальция и приводят к гибели клеток, вызванной CPE [33,34]. Решающим шагом в способе действия является связывание CPE с семейством клеточных белков клаудинов.Как молекулы межклеточной адгезии, эти белки с четырьмя трансмембранными доменами по существу формируют плотные контакты и вносят вклад в барьерную функцию эпителия [35]. Среди 27 описанных изоформ человеческого клаудина [36], CPE сильно взаимодействует с клаудином-4 и в меньшей степени с клаудином-3 и мышиным клаудином-19 [37,38,39]. Кроме того, сообщается, что клаудин-6, -7, -8, -9 и -14 являются рецепторами с низким сродством к CPE [40]. Для диагностики желудочно-кишечных заболеваний с подозрением на участие CPE используется эталонный метод EN ISO 7937 для перечисление предполагаемых C.perfringens обычно получают из пищи и корма и включают культивирование в определенных средах и подсчет характерных колоний [41]. Другие методы идентифицируют изоляты C. perfringens на основе характерных пептидных отпечатков пальцев с помощью масс-спектрометрии [42,43]. Хотя эти подходы указывают на простое присутствие C. perfringens в образцах пищи или фекалиях пациентов, тесты на токсинотипирование на основе ПЦР [7,44] или тесты на определение генов cpe [45,46] доказывают наличие генов токсинов и, следовательно, потенциальную клиническую возможность значение выделенных штаммов.Однако обнаружение гена cpe не дает однозначных доказательств фактического производства CPE анализируемым штаммом C. perfringens. С одной стороны, описаны молчащие гены cpe, не кодирующие полный CPE, а с другой стороны, экспрессия CPE происходит только во время споруляции C. perfringens и требует внешних триггерных факторов [47]. Таким образом, анализы, направленные на обнаружение токсинов, позволят более надежно оценить патогенный потенциал штамма. В отличие от многих других клостридиальных токсинов, доказательств вариабельности аминокислотной последовательности CPE практически нет [15].Следовательно, для обнаружения CPE могут применяться иммунологические методы с использованием высокоспецифичных моноклональных антител. В этом отношении описано несколько иммуноферментных анализов (ELISA), а также быстрых и мобильных анализов обнаружения, таких как анализ латерального потока (LFA), включая коммерческие тест-системы [21,48,49,50,51]. Наряду с хорошо зарекомендовавшими себя LFA, недавно разработанные платформы быстрого обнаружения на месте, такие как «портативный интегрированный биодетектор» (pBDi, Bruker Optik GmbH, Лейпциг, Германия), используемые в этой работе, предлагают дополнительные преимущества: это полностью автоматизированное устройство обеспечивает возможность множественного обнаружения. нескольких аналитов одновременно с помощью электрохимических биочипов, несущих иммобилизованные реагенты захвата на своих 16 встречно-штыревых золотых электродах [52].Используя антитела в качестве реагентов для захвата, измерения можно проводить в формате сэндвич-ELISA. Вместо оптически считываемого изменения цвета, используемого в обычном стационарном ИФА, выполняемом на микротитровальных планшетах, система pBDi обнаруживает ток, возникающий в результате окисления электроактивного продукта, генерируемого ферментативным преобразованием электроактивного субстрата. Процесс рециркуляции окислительно-восстановительного потенциала между встречно расположенными золотыми электродами перерабатывает электроактивный продукт и приводит к усилению сигнала.

Целью данной работы было (i) использовать оптимизированный эндогенный рецептор клаудина-4, члена суперсемейства тетраспанинов, для функционального обнаружения CPE, (ii) сравнить эффективность рецепторов на основе рецепторов и обычных антител. инструменты и системы обнаружения для CPE, и (iii) перенос традиционных подходов ELISA к автоматизированной мобильной платформе обнаружения pBDi. С этой целью мы разработали традиционный сэндвич-ELISA на основе антител, включающий два моноклональных антитела, и сэндвич-ELISA на основе рецепторов, использующий оптимизированный клаудин-4 в качестве реагента захвата и детектирующего антитела.Как подход, основанный на антителах, так и подход на основе рецепторов, позволил достичь высокочувствительного обнаружения ЦПЭ, выявив пределы обнаружения 0,3 пг / мл и 1,0 пг / мл соответственно. Кроме того, мы продемонстрировали, что оба формата анализа специфически выявляли нативный CPE, полученный из всех 30 cpe-положительных штаммов из 64 супернатантов C. perfringens в слепом тесте. Внедрение анализов обнаружения в систему pBDi позволило быстро обнаружить CPE на месте с пределами обнаружения в диапазоне нг / мл.И анализы на основе антител, и на основе рецепторов явно были способны обнаруживать рекомбинантный CPE из образцов стула с добавками на стационарных и локальных платформах обнаружения.

3. Обсуждение

По оценкам 5 миллионов случаев в год в Европе [59], пищевое отравление C. perfringens типа F является широко распространенным желудочно-кишечным заболеванием. Возбудитель этого типа пищевого отравления, порообразующий токсин CPE, вызывает симптомы от легких до смертельных клинических проявлений [25, 60].Кроме того, CPE вызывает до 15% диареи, связанной с антибиотиками, что часто связано с высокой частотой рецидивов и длительностью лечения [21]. Для успешного лечения этих тяжелых заболеваний, вызванных CPE, надежные системы быстрого обнаружения являются полезными инструментами, помогающими клиницистам идентифицировать CPE как возбудителя болезни и обеспечивать адекватное лечение на ранних стадиях заболевания. С этой целью мы создали классический сэндвич-ИФА, состоящий из новых моноклональных антител с захватом и детектированием и инновационного сэндвич-ИФА, использующего эндогенный рецептор клаудин-4 в качестве захватывающего реагента.После всестороннего исследования и сравнения этих двух подходов к обнаружению в формате планшета для микротитрования мы внедрили их в автоматизированную платформу обнаружения на месте pBDi. Подход на основе как антител, так и рецепторов обеспечивает высокочувствительное обнаружение CPE с пределами обнаружения в диапазоне низких пг / мл (для стационарного обнаружения) и нг / мл (для мобильного обнаружения). В частности, оба подхода позволили обнаружить CPE в образцах фекалий с добавками. Кроме того, анализы на микротитровальных планшетах на основе mAb и рецепторов правильно выявили нативный токсин, полученный из супернатантов 30 cpe-положительных штаммов из панели из 64 C.perfringens, полностью подтверждающие результаты ПЦР. Наши результаты демонстрируют, что даже сложные трансмембранные белки могут быть функционализированы как реагенты захвата в стационарном и мобильном ИФА, что позволяет обнаруживать токсины так же чувствительно и специфично, как классический сэндвич-ИФА, основанный только на моноклональных антителах. Неожиданно клаудин-4 был применим в качестве реагента захвата в формате микропланшета. и в локальной системе pBDi, хотя это 4-трансмембранный белок, обладающий высокой гидрофобностью по природе [61]. Как показали Ling et al.добавление GST-tag значительно увеличивало растворимость аналогичной конструкции claudin-4, состоящей из внеклеточного и четырех трансмембранных доменов [62]. Более того, те же авторы продемонстрировали важность трансмембранных доменов для функциональной конформации белка клаудин-4 [62]. Основываясь на этих результатах, мы наблюдали высокоаффинное взаимодействие изолированного клаудина-4 с CPE с 24-кратным снижением K _D (0,38 нМ) по сравнению с сообщенным взаимодействием CPE с клаудином-4, экспрессируемым в интактных L-клетках (9 нМ; [63]).Высокая аффинность связывания с его токсином-мишенью предполагает нативную конформацию рекомбинантного клаудина-4, использованного в нашем исследовании. При уровне K _D всего 0,38 нМ рекомбинантный клаудин-4 показал превосходные связывающие свойства, соответствующие свойствам вновь созданных высокоаффинных mAb, представленных в этой работе. Что касается благополучия животных, использовали рекомбинантный атоксичный мутант CPE D48A. как иммуноген для поколения гибридом [53]. Поскольку конформация рекомбинантного и нативного токсина может отличаться, решающим шагом в разработке анализа была проверка распознавания нативного токсина mAb.С этой целью наши эксперименты с использованием панели из 64 супернатантов C. perfringens, в основном полученных в результате вспышек пищевых отравлений, продемонстрировали, что анализы на основе как антител, так и клаудина-4 специфически связывают нативный CPE в штаммах, несущих ген cpe. Этот вывод был дополнительно подтвержден тем фактом, что большинство антител предотвращали токсическое действие рекомбинантного CPE на клетки Vero in vitro и, следовательно, проявляли нейтрализующую активность. В этом контексте Miyamoto et al. описали штаммы C. perfringens типа E, продуцирующие вариант CPE, отклоняющийся на 10 аминокислот от классического CPE, хотя последствия этого изменения в отношении токсичности или болезни остаются неизвестными до сих пор [15].Наша панель супернатантов C. perfringens включала четыре штамма C. perfringens типа E, хотя ни один из них не нес ген cpe. Таким образом, в будущих экспериментах еще предстоит увидеть, будет ли этот вариант успешно обнаружен с помощью ELISA на основе рецепторов и антител, разработанного в этой работе. Прогнозы относительно способности наших mAb связывать вариант CPE требуют дальнейшего исследования точного распознавания эпитопа на аминокислотном уровне. Поскольку рецептор-связывающий домен указанного варианта CPE включает только одну замену аминокислоты, а именно S313A, которая не способствует связыванию рецептора [15,38,64], мы предполагаем, что взаимодействие клаудина-4 с этим вариантом является столь же сильным. как и в случае с преобладающим CPE.Основываясь на низком структурном разнообразии CPE, описанном до сих пор, редкой встречаемости штаммов типа E во время вспышек [65,66] и наших результатов, демонстрирующих 100% совпадение при обнаружении CPE у cpe-положительных штаммов C. perfringens, выделенных в основном во время вспышек в Германии. Мы твердо уверены, что наши анализы обеспечивают надежное обнаружение клинически значимых образцов, а также возможность обнаружения ЦПЭ в экстрактах фекалий. CPE, продуцируемые 30 cpe-положительными штаммами типа D или F, исследованными в данной работе.Секвенирование всего генома может быть предметом будущих работ, проливающих свет на наличие варианта, описанного Миямото и его коллегами [15], или на существование других, еще не описанных вариантов. В случае, если существуют дополнительные варианты CPE и, аналогично другим структурно разнообразным токсинам, таким как токсины шига [67], проявляется высокая степень консервативности связывания рецепторов для сохранения эндогенной биологической активности, ожидается, что ELISA на основе рецепторов с использованием клаудина -4 обеспечит высокую степень диагностической надежности.Насколько нам известно, только несколько классических и не основанных на рецепторах сэндвич-ELISA были описаны для обнаружения CPE до сих пор. В то время как некоторые из этих анализов имели пределы обнаружения в диапазоне нг / мл [49,68], ELISA, разработанные в этой работе, достигли превосходных пределов обнаружения от 0,3 до 1 пг / мл в зависимости от используемого реагента для улавливания. Это находится в пределах диапазона, описанного для более трудоемкого ИФА на основе иммуно-ПЦР (предел обнаружения 1 пг / мл; [69]). Примечательно, что предел обнаружения 40 пг / мл, сообщенный для коммерческого набора ELISA [70], оказался выше в 140 и 40 раз по сравнению с нашим ELISA на основе антител и рецепторов, соответственно.В отличие от ранее опубликованных ELISA, мы успешно проверили эффективность нашего ELISA на микротитровальном планшете, используя комплексную панель бактериальных супернатантов, полученных из изолятов пищевых вспышек. Кроме того, было доказано, что обнаружение ЦПЭ из экстрактов фекалий с добавками возможно в диапазоне низких пг / мл с коэффициентом извлечения ЦПЭ около 50%. Были описаны тесты, предназначенные для быстрого мобильного обнаружения CPE [48,51].Насколько сообщалось о чувствительности, эти тесты были по крайней мере в 100 раз менее чувствительны по сравнению с LOD 0,316 нг / мл и 1 нг / мл, определенными для обнаружения CPE на основе антител и рецепторов в pBDi. система соответственно. Зарегистрированные концентрации ЦПЭ в фекалиях больных пациентов во время вспышек болезни часто находились в диапазоне от 10 нг до 100 мкг / г или выше и лишь редко от 1 до 10 нг / г в образцах фекалий [71,72]. Принимая во внимание эти отчеты, можно предположить, что чувствительность pBDi достаточна для успешного обнаружения ЦПЭ в клинических образцах с добавками: концентрации 3.16 нг / мл четко определялись как при подходе, основанном на рецепторах, так и при использовании антител. Для подхода, основанного на антителах, нормализованные интенсивности сигналов для этой концентрации находились в среднем диапазоне pBDi, предполагая потенциальный предел обнаружения до 2–3-значных пг / мл, что значительно ниже указанного диапазона концентраций для реальных образцов.

Достоинством автоматизированной платформы pBDi является ее способность обнаруживать мультиплексирование. Иммобилизация различных токсин-специфических антител или соответствующих эндогенных рецепторов на золотой поверхности электродов позволяет одновременно обнаруживать несколько токсинов в рамках одного измерения.Один из возможных подходов заключается в одновременном определении присутствия CPE и токсинов C. difficile как основной причины AAD в одном образце, что позволяет проводить дифференциальную диагностику AAD. Перед применением методов обнаружения на месте, разработанных для анализа клинических образцов, необходимо рассмотреть влияние различных матриц образцов на эффективность анализа. Благодаря своей высокой специфичности и аффинности моноклональные антитела обычно совместимы с широким спектром различных матриц.В этом исследовании обнаружение ЦПЭ в образцах фекалий с добавками, представляющих наиболее важную и сложную матрицу в диагностике желудочно-кишечных заболеваний, было продемонстрировано не только для классического анализа на основе антител, но и для использования клаудина-4 в качестве инновационный реагент для улавливания как в стационарном формате, так и в формате для анализа на месте.

В то время как стационарный ELISA обеспечивал несколько более высокие, но все же аналогичные скорости восстановления CPE в образцах кала при использовании обнаружения клаудина-4 / mAb по сравнению с обнаружением mAb / mAb в тестируемых концентрациях, быстрое и локальное pBDi платформа дала в целом лучшие результаты в отношении интенсивности сигнала с использованием классического подхода к обнаружению mAb / mAb.Хотя чувствительность классического обнаружения на основе mAb выше в три раза как для стационарного, так и для мобильного обнаружения, подход на основе рецепторов предоставляет дополнительную возможность для применения в качестве функционального анализа связывания CPE с рецептором.

Поскольку сложные матрицы могут вызывать неспецифические сигналы в иммуноанализах, приводящие к потенциальным ложноположительным результатам, необходимо применять соответствующие контроли. Для реальных образцов пустые матрицы, идентичные образцам, то есть без целевого токсина, обычно недоступны.Следовательно, в случае сэндвич-ELISA это следует контролировать путем замены специфического реагента захвата (антитела или рецептора) на нерелевантные реагенты захвата и измерения сложных образцов параллельно в специфическом и контрольном ELISA для идентификации фоновых сигналов. Для образцов фекалий, протестированных в этом исследовании, фоновые сигналы были низкими для анализов на основе клаудина-4 и антител, и их можно было четко дифференцировать от специфических сигналов, возникающих в фекалиях с повышенным содержанием токсина, с использованием вышеупомянутых контролей.

Кроме того, присутствие других белков в сложных образцах может мешать анализу из-за неспецифического связывания с антителами или клаудином-4. Для последнего известно, что особенно эндогенные белки плотных контактов связываются с рецептором или могут взаимодействовать с самим CPE из-за своей внутренней функции. Тем не менее, из-за превосходного сродства антител, а также рецептора клаудина-4 к CPE, комбинированной специфичности реагентов захвата и обнаружения и наличия избытка реагентов обнаружения, маловероятно, что другие белки или матрица соединения будут значительно мешать анализу, незаметно для вышеупомянутых контролей.В неизвестном реальном образце добавление определенной концентрации CPE и сравнение той же концентрации, добавленной в буфер, выявило бы вредные маскирующие эффекты. Следует отметить, что ЦПЭ из образцов диарейных собак показал стабильность при хранении в течение десяти дней и количественно определено с помощью ELISA [73], что указывает на то, что ELISA может подтвердить присутствие ЦПЭ даже в образцах, не измеренных сразу. Таким образом, представленные здесь анализы считаются имеющими высокую диагностическую ценность для идентификации CPE в реальных образцах от диарейных заболеваний.Помимо продемонстрированной применимости в диагностических установках, мышиные mAb, полученные в этой работе, показали превосходные нейтрализующие свойства. Поэтому представляется привлекательным изучить их потенциальное использование для лечения ААД после гуманизации с использованием рекомбинантных методов. Учитывая сходный патогенез AAD, запускаемый Clostridium perfringens и Clostridioides difficile, это может быть многообещающим применением, поскольку уже одобренное моноклональное антитело, безлотоксумаб, направленное против C.difficile, токсин B (TcdB) значительно снижал количество рецидивов ААД, вызванных инфекциями, вызванными C. difficile [74].

5. Материалы и методы

5.1. Эксперименты на животных

Обращение с лабораторными животными соответствовало положениям Закона Германии о защите животных и европейского законодательства о защите животных, используемых в научных целях (Директива 2010/63 / EU). Иммунизация мышей для получения моноклональных антител (mAb) CPE1, CPE58, CPE281, CPE384, CPE562, CPE639 и CPE1339 была одобрена Государственным управлением здравоохранения и социальных дел в Берлине (LAGeSo, Берлин, Германия) под регистрационным номером h229 / 19. (дата утверждения 03 июля 2019 г.).Жертвоприношение мышей для удаления тимоцитов было зарегистрировано LAGeSo под номером T0060 / 08. Что касается благополучия животных и получения mAb с использованием гибридомной технологии, мы рассмотрели LD ₅₀ CPE (160 мкг / кг массы тела, системное применение; [75]) и использовали рекомбинантно полученный атоксичный мутант CPE D48A для иммунизация, которая, несмотря на нормальную способность связываться и образовывать небольшие комплексы, не способна образовывать большие комплексы или вызывать цитотоксичность [53].

Для создания mAb CPE9 и CPE18 все эксперименты проводились в соответствии с французскими и европейскими правилами по уходу и защите лабораторных животных (Директива Европейского сообщества (ЕС) 2010/63 / UE, французский закон 2001-486, 6 марта 2018) и с соглашениями Комитета по этике Комиссариата по атомной энергии (CEtEA «Comité d’Ethique en Expérimentation Animale» № 44) № 12-026 и 15-046, доставленных С. Саймону Французские ветеринарные службы и соглашение CEA D-91-272-106 от Департамента ветеринарной инспекции Эссонна (Франция).

5.2. Рекомбинантная экспрессия белков CPE и слитого белка GST-Claudin-4

Подробно описано получение CPE 26–319 дикого типа, атоксичного мутантного CPE D48A, CPE RBD 203–319 и порообразующего домена CPE (PFD) 26–202. в другом месте [55]. Вкратце, CPE 1–319 дикого типа и мутант были получены рекомбинантным способом при соблюдении уровня биобезопасности 2 (номер проекта GAA A / Z 40654/3/123/7) в штаммах Escherichia coli B. Используя C-концевой His6tag, белки очищали аффинной хроматографией с иммобилизованным металлом (IMAC) с использованием матрицы Co ²⁺ -Talon (Takara Bio Europe S.A.S., Saint-Germain-en-Laye, France) и элюировали 50 мМ трис-HCl, pH 8,0, 150 мМ NaCl, 250 мМ имидазолом. Для протеолитической активации на N-конце и удаления метки CPE 1-319 инкубировали в течение 16 часов при комнатной температуре с 0,08 ед. Трипсина (Sigma – Aldrich Chemie GmbH, Steinheim, Germany) на мг CPE, получая количественно свободный от метки CPE 26 –319. Последующую гель-фильтрацию (колонка Superdex-75 16/60, Cytiva, ранее GE Healthcare, Фрайбург, Германия) выполняли в PBS, pH 7,4. Высокоочищенные белки подвергали шоковой заморозке в жидком азоте и хранили при -70 ° C.CPE 1–319 и CPE 26–319 первоначально сравнивали по их связывающим свойствам с антителами и рекомбинантным клаудином-4. Поскольку никаких различий выявлено не было, оба были одинаково применимы в качестве антигенов в иммунологических анализах. Для анализа цитотоксичности был использован трипсин-активированный CPE 26–319. Подробное получение слитого белка GST человеческого клаудина-4 (GST-ShCLDN4H8) описано в другом месте [55]. Вкратце, GST-ShCLDN4H8, экспрессированный в штамме E. coli BL21 DE3, очищали в Трис / NaCl-буфере (20 мМ Трис-HCl, 150 мМ NaCl, pH 7.2) с добавлением 0,5% Triton X-100 (альтернативно PBS, содержащим 0,5% CHAPS) с использованием гранул глутатион-сефарозы и элюирования глутатионом. Фракции, содержащие желаемые белки, объединяли и подвергали диализу для удаления глутатиона. Очищенный GST-ShCLDN4H8 подвергали шоковой заморозке в жидком азоте и хранили при -70 ° C.

5.3. Получение моноклональных антител

Для получения моноклональных антител применяли гибридомную технологию, как описано ранее [57,76]. Для создания моноклональных антител CPE1, CPE58, CPE281, CPE384, CPE562, CPE639 и CPE1339 мышей (BALB / c или NMRI), выведенных в условиях отсутствия специфических патогенов в Чарльз-Ривер (Зульцфельд, Германия), иммунизировали в возрасте около восьми недель.Иммунизации проводили не менее трех раз с интервалом в четыре недели. CPE RBD (5 мкг) или CPE D48A (10 мкг), эмульгированные в полном (первая иммунизация) или неполном адъюванте Фрейнда (последующие иммунизации), использовали в качестве антигенов. После достижения высокого титра антител антигены (2 мкг для CPE RBD и 6 мкг для CPE D48A), разведенные в фосфатно-солевом буфере (PBS), вводили на -3, -2 и -1 дни перед слиянием. Клетки селезенки иммунизированных мышей были слиты с клетками миеломы (P3-X63-Ag8.653, Американская коллекция типовых культур) в соотношении 2: 1 в полиэтиленгликоле 1500 (PEG, Roche Diagnostics, Mannheim, Germany) для получения клонов гибридомы.

Для создания mAb CPE9 и CPE18 мышей Biozzi иммунизировали 4 раза с 3-недельными интервалами 40 мкг детоксифицированного CPE (детоксикация рекомбинантного CPE, предоставленная Michel Popoff, Institut Pasteur, Париж, Франция, путем обширного диализа в 0,4% формалина). Мышей, демонстрирующих лучший иммунный ответ, отбирали для получения моноклональных антител и ежедневно вводили i.v. бустерная инъекция 40 мкг детоксифицированного CPE в течение трех дней. Через два дня после последней иммунизации были получены гибридомы путем слияния клеток селезенки с клетками миеломы NS1.

Начиная с 10 дня клоны гибридомы анализировали на реактивность по отношению к антигенам. С этой целью супернатанты гибридомы тестировали с помощью непрямого ELISA (см. Ниже), сэндвич-ELISA на основе рецепторов (с использованием клаудина-4 в качестве захватывающего реагента вместо захватывающего mAb, как описано ниже) и методов на основе SPR (см. Ниже). Клоны клеток, продуцирующие реактивные супернатанты, субклонировали по крайней мере дважды и тестировали путем внутриклеточного окрашивания с помощью Cy5-меченных антител против IgG мыши (Dianova, Гамбург, Германия) с последующим измерением проточной цитометрии для подтверждения клональности.IgG-антитела из супернатантов гибридомы очищали с помощью аффинной хроматографии с использованием колонки HiTrap MabSelect SuRe на системе Äkta Protein Purification System (Cytiva, ранее GE Healthcare, Фрайбург, Германия). Чистоту mAb оценивали разделением на SDS-PAGE в восстанавливающих условиях. Для определения изотипов очищенных mAb использовали коммерчески доступный набор для изотипирования (Roche Applied Science, Мангейм, Германия). Для использования в качестве реагентов обнаружения в сэндвич-ELISA и платформе pBDi очищенные антитела биотинилировали с использованием сложного эфира N-гидроксисукцинимида биотина (Sigma Aldrich, Мюнхен, Германия) в молярном соотношении 20 в соответствии с инструкциями производителя.Биотинилированные антитела хранили в PBS, содержащем 0,2% (мас. / Об.) Бычьего сывороточного альбумина (BSA; Serva, Heidelberg, Германия) и 0,05% (мас. / Об.) NaN ₃ (Carl Roth, Карлсруэ, Германия).

5.4. Непрямой ELISA

Для идентификации гибридом, продуцирующих антитела, специфически распознающие полноразмерный CPE (aa 1-319), и для дифференциации этих антител путем обнаружения доменов CPE (CPE RBD или CPE PFD) супернатанты гибридомы анализировали с помощью непрямого ELISA. С этой целью полости планшетов для микротитрования MaxiSorp (F96; Nunc, Thermo Fisher Scientific, Langenselbold, Германия) покрывали в течение ночи при 4 ° C антигеном (500 нг / мл, 50 мкл на лунку) в PBS, содержащем 1 мкг / мл. BSA.После четырехкратной промывки планшетов 300 мкл PBS с добавлением 0,1% Tween 20 (PBS-T) блокирование проводили 200 мкл 2% сухого обезжиренного молока (Merck, Дармштадт, Германия) в PBS-T на лунку для 1 ч при комнатной температуре. Планшеты снова промывали, добавляли 50 мкл супернатантов гибридомы и инкубировали в течение 1 часа. После промывания планшетов детектирование достигалось путем инкубации с 50 мкл на лунку меченного пероксидазой хрена (HRP) козьего антитела против IgG мыши (Fcγ) (1: 2500; Dianova, Гамбург, Германия) в течение 30 мин.За последней стадией промывки (8 ×) следовала разработка 100 мкл на лунку 3,3 ‘, 5,5’-тетраметилбензидина (TMB, SeramunBlau slow; Seramun, Heidesee, Германия) в течение 15 мин. Реакцию останавливали добавлением 100 мкл 0,25 М H ₂ SO ₄ на лунку. Поглощение при 420 нм относительно 620 нм измеряли с помощью ридера ELISA (Tecan; Crails-heim, Германия).

5.5. Сэндвич-ELISA на основе антител и рецепторов

Сэндвич-ELISA состояли из захватывающего антитела (на основе антитела) или эндогенного рецептора клаудина-4 (на основе рецептора), оба в сочетании с детектирующим антителом, и были выполнены с небольшими модификациями, как описано перед [77].Вкратце, улавливающие антитела (10 мкг / мл, 50 мкл на лунку) в PBS или клаудин-4 (2,5 мкг / мл, 50 мкл на лунку) в PBS, содержащем 1 мкг / мл BSA, были иммобилизованы на поверхности микротитровальных планшетов MaxiSorp. в течение ночи при 4 ° C. Планшеты промывали (4 ×) 300 мкл PBS-T на лунку. После блокирования 200 мкл казеинового буфера на лунку (Diavita, Гейдельберг, Германия) в течение 1 часа и промывания PBS-T, 50 мкл антигена, разведенного в PBS с добавлением 0,1% BSA, инкубировали в течение 2 часов при комнатной температуре. Планшеты снова промывали и добавляли 50 мкл супернатанта гибридомы (для скрининга гибридом) или биотинилированных очищенных детектирующих антител, разведенных в казеиновом буфере, и инкубировали в течение 1 часа.После повторной промывки 50 мкл меченного HRP козьего антитела против IgG мыши (Fcγ) (скрининг гибридомы) или меченного стрептавидином поли HRP (Senova, Веймар, Германия) инкубировали в течение 30 минут. Окончательную промывку, проявление и измерение проводили, как описано для непрямого ELISA (см. Выше).

5,6. Измерения поверхностного плазмонного резонанса (SPR): кинетика связывания

Все измерения SPR были выполнены на устройстве T200 (Cytiva, ранее GE Healthcare, Фрайбург, Германия) с использованием сенсорных чипов CM5 и HBS-EP + (10 мМ HEPES, pH 7.4, 150 мМ NaCl, 3 мМ ЭДТА, 0,05% Твин 20) в качестве рабочего буфера при 25 ° C, как описано ранее [78]. Для определения кинетики связывания и аффинности GST-меченные клаудин-4 или моноклональные антитела (mAb, очищенные или из супернатантов гибридомы) были иммобилизованы с плотностями от 300 до 500 резонансных единиц (RU) на проточных ячейках сенсорного чипа с использованием набора для захвата GST или набора для захвата антител мыши (Cytiva, ранее GE Healthcare, Фрайбург, Германия), соответственно. . Проточные клетки, иммобилизованные рекомбинантным GST (для клаудина-4) или без лиганда (для mAb), использовали в качестве контрольных образцов.Затем аналит вводили во все проточные кюветы. Для быстрого измерения и, следовательно, высокой проходимости образцов во время скрининга гибридомы были выполнены анализы SPR в формате одного цикла с последовательным введением CPE в концентрациях 30,9 и 309 нМ. Для точных измерений (клаудин-4 и очищенные моноклональные антитела) последовательные разведения СРЕ 1: 3 в диапазоне от 93 до 0,38 нМ вводили последовательно в отдельно выполняемых циклах (многоцикловая кинетика) в течение 120 с при скорости потока 30 мкл / мин. . Диссоциацию лиганда инициировали введением рабочего буфера и наблюдали в течение 300 с (скрининг гибридомы) или 1200 с (все другие измерения).Поверхность сенсорного чипа регенерировали с использованием 10 мМ глицина, pH 2,1 (захват GST) или 10 мМ глицина, pH 1,7 (захват мышиного антитела) в течение 120 с при скорости потока 10 мкл / мин. Воспроизводимость измерений контролировалась путем повторной инъекции самой высокой концентрации аналита в начале и в конце циклов измерения. На все кривые связывания дважды ссылались, как описано [79], и они соответствовали моделям взаимодействия Ленгмюра 1: 1 с использованием программного обеспечения BIAevaluation (3.0).

5,7. Измерения SPR: Объединение эпитопов

Объединение эпитопов выполняли для идентификации моноклональных антител с распознаванием различных эпитопов и, таким образом, подходящих сэндвич-комбинаций двух моноклональных антител.С этой целью первое антитело (10 мкг / мл для очищенных моноклональных антител или неразбавленного супернатанта гибридомы) иммобилизовали с помощью набора для улавливания антител мыши (Cytiva, ранее GE Healthcare, Фрайбург, Германия) в качестве реагента захвата на поверхности проточной кюветы для образцов сенсорный чип с расходом 10 мкл / мин при времени контакта 60 с. После блокирования неспецифического связывания со всеми проточными клетками, включая контрольную проточную клетку, мышиным IgG (Jackson ImmunoResearch Europe, Эли, Великобритания) (100 мкг / мл, скорость потока: 10 мкл / мин, время контакта: 120 с) и инъекции рекомбинантного CPE (а.о. 1–319, дикий тип) в концентрации 61.8 нМ (все проточные кюветы, скорость потока: 10 мкл / мин, время контакта: 60 с), вводили второе mAb (10 мкг / мл для очищенных mAb или неразбавленного супернатанта гибридомы) (все проточные кюветы, скорость потока: 10 мкл / мин, время контакта: 60 с). Все кривые связывания относятся к контрольной проточной кювете без CPE-специфичного захватывающего антитела. Ход кривой показывает, распознают ли два антитела один и тот же эпитоп (нет увеличения сигнала после инъекции 2-го mAb) или разные эпитопы (усиление сигнала обнаруживается после инъекции 2 ^и mAb).

5.8. SDS-PAGE и вестерн-блоттинг.

Вестерн-блот-анализ использовали для оценки специфичности mAb в отношении рекомбинантных CPE (аминокислот 26–319, дикий тип) и доменов CPE PFD (аминокислот 26-202; GST-PFD-t-mCherry) и RBD. (а.о. 203-319). Для SDS-PAGE антигены смешивали с 3 × загрузочным буфером Лэммли (150 мМ трис-HCl, pH 6,8, 6% SDS, 30% (об. / Об.) Глицерин, 7,5% (об. / Об) β-меркаптоэтанол, 0,25%). % (мас. / об.) бромфенолового синего) и нагревали в течение 10 мин при 95 ° C. После охлаждения на льду образцы наносили на 12% полиакриламидные гели и разделяли электрофоретически по стандартным методикам [80].Затем гели переносили на мембраны из PVDF Immobilon® P 0,45 мкм, активированные метанолом (Millipore, Schwalbach, Германия). Мембраны блокировали при 4 ° C в течение ночи в 2% обезжиренном молоке в PBS-T и инкубировали в течение 1 ч при комнатной температуре с 1 мкг / мл CPE-специфических антител, разведенных в блокирующем буфере. После трех стадий промывки детектирование проводили с помощью меченных биотином козьих антимышиных IgG (Dianova, Гамбург, Германия), разведенных 1: 10 000 в блокирующем буфере в течение 30 минут при комнатной температуре. Мембраны были разработаны с использованием стрептавидина, конъюгированного с щелочной фосфатазой (Avidix ™ -AP, Fisher Scientific, Бремен, Германия) и CDP-Star в качестве субстрата (Perkin Elmer, Waltham, MA, США).Разработка была задокументирована на системе визуализации ChemiDoc (Bio Rad Laboratories, Геркулес, Калифорния, США).

5,9. Нейтрализация CPE в клеточном анализе цитотоксичности

Способность mAb блокировать цитотоксичность CPE in vitro исследовали с помощью анализа цитотоксичности в реальном времени с использованием системы xCELLigence на основе импеданса (OMNI Life Science GmbH and Co, Бремен, Германия) как описано [81]. Вкратце, после установки базовой линии объем 75 мкл клеток Vero (ATCC, Манассас, Вирджиния, США) высевали в E-планшет при концентрации 12500 клеток / лунку.Эти только что засеянные клетки (без прикрепления к планшету) немедленно смешивали с 30 мкл рекомбинантного CPE (а.о. 26-319, дикого типа), содержащего следующие конечные стандартные концентрации: 3,16 нМ, 1 нМ, 0,316 нМ, 0,178 нМ, 0,1 нМ, 0,056 нМ, 0,0316 нМ и 0,0178 нМ. Стандарты измеряли в двух экземплярах для определения полумаксимальной ингибирующей концентрации (IC ₅₀). Необработанные клетки с добавлением 30 мкл среды вместо стандарта токсина использовали в качестве эталона для жизнеспособных клеток. Для изучения нейтрализации CPE с помощью mAb, клетки Vero, засеянные, как указано выше, были смешаны на той же планшете с 30 мкл предварительно инкубированной смеси (30 мин при комнатной температуре), содержащей рекомбинантный CPE (а.о. 26-319, дикого типа; конечная концентрация 1 нМ) и соответствующие mAb (конечные концентрации 10 и 100 нМ).Клеточные индексы контролировали в течение 90 часов. Рассчитанные нормализованные индексы клеток основаны на индексах клеток через 40 ч после начала инкубации.

5.10. Обнаружение на месте на основе платформы электрохимического биочипа (pBDi)

Для быстрого обнаружения анализы, обеспечивающие наивысшую чувствительность, были реализованы на платформе обнаружения на месте pBDi (Bruker Optik GmbH, Лейпциг, Германия). Для этого реагенты для улавливания наносили на электрохимические биочипы, как описано [82] Bruker Optik GmbH.Вкратце, mAb, разведенные в буфере PBS, и клаудин-4, разведенные в PBS, содержащем 0,5% CHAPS, иммобилизовали в двух экземплярах на поверхности золотых электродов до конечной концентрации 500 мкг / мл. Для стабилизации иммобилизованного клаудина-4 добавляли 0,4 мг / мл БСА в качестве коиммобилизирующего агента. Биотинилированный кроличий антимышиный IgG (Sigma-Aldrich GmbH, Тауфкирхен, Германия) был отмечен как положительный контроль, а мышиный IgG (Jackson ImmunoResearch Europe, Эли, Великобритания) — как отрицательный контроль. Пятнистые биочипы предоставлены производителем в картриджах из поликарбоната.Перед началом измерения все реагенты и биочипы были доведены до комнатной температуры. После разбавления лиофилизированного фермента стрептавидин-β-D-галактозидазы, субстрата p-APG (оба Bruker Optik GmbH, Лейпциг, Германия) и биотинилированного mAb для обнаружения (10 мкг / мл) в буфере для анализа (PBS, 0,5% (масс. v) БСА, 0,5% (мас. / об.) трегалозы, 1 мМ MgCl ₂, 0,025% (об. / об.) Твин 20), подготовленные реагенты и буфер для анализа загружали в прибор pBDi, 800 мкл стандарта токсина ( CPE), разведенный в буфере для анализа, наносили в отделение для образца и вставляли биочип.Платформа pBDi выполняла измерения полностью автоматически, и ток, генерируемый ферментативным превращением субстрата, регистрировался с помощью программного обеспечения pBDi Control (Bruker Optik GmbH, Лейпциг, Германия). Математическая нормализация абсолютного текущего наклона положения целевого электрода к сигналу положительного контроля (ПК) и отрицательного контроля (NC) позволила оценить воспроизводимость результатов между чипами. Нормализованные сигналы рассчитывали с помощью программного обеспечения pBDi Control с использованием следующего уравнения:

Нормализованный сигнал% = целевой наклон; absolut — Наклон NC Наклон PC − Наклон NC × 100%

(1)

5.11. Приготовление образцов фекалий с добавками

Экстракты фекалий были индивидуально приготовлены из фекалий трех здоровых доноров разведением 1: 5 (мас. / Об.) В PBS pH 7,4 с 0,1% (мас. / Об.) BSA и очищены центрифугированием (10000 × г, 10 мин). Информированное согласие было получено от всех доноров, а сбор образцов проводился неинвазивно самими добровольцами. В экстракты фекалий добавляли рекомбинантный CPE дикого типа (1–319) в различных концентрациях, инкубировали при комнатной температуре в течение 30 минут и измеряли в стационарных планшетах ELISA и анализами, перенесенными в pBDi.

5.12. Приготовление супернатантов из бульонных культур

Для приготовления супернатантов бактериальных клеточных культур изоляты C. perfringens, бактерии из тампонов или 50 мкл исходного раствора глицерина сначала наносили штрихами на чашки с агаром с лактозным и яичным желтком (LEA). Через один день ряд колоний с типичной морфологией C. perfringens переносили в 5 мл среды триптон-пептон-глюкоза-дрожжевой экстракт (TPGY) и культивировали в течение 5-7 дней при 30 ° C в анаэробных условиях (10% H _{). 2}, 10% CO ₂, 80% N ₂) на анаэробной рабочей станции (A35 или A85, Don Whitley Scientific, Шипли, Западный Йоркшир, Великобритания).Супернатанты, полученные после осветления (12000 × г, 5 мин, 4 ° C), хранили при -20 ° C или -80 ° C. Для измерений ELISA супернатанты разбавляли 1:10 (об. / Об.) В PBS с добавлением 0,1% BSA.

5.13. Токсинотипирование генов с помощью qPCR

Изоляты C. perfringens были токсинотипированы на основе недавно обновленной схемы типирования Rood et al., 2018 [7]. Эта типизация основана на обнаружении генов токсинов для α- (cpa), β- (cpb), ε- (etx), ι-токсина (iap), энтеротоксина (cpe) и токсина NetB (netB).ПЦР для netB проводили, как описано [83]. Для обнаружения генов cpa, cpb, etx, iap и cpe были применены две альтернативные количественные ПЦР. Для штаммов из Управления здравоохранения и безопасности пищевых продуктов Баварии (LGL) последовательности праймеров и зондов, а также условия ПЦР были опубликованы ранее [84]. Для всех других штаммов праймер и зонды были заново разработаны с использованием встроенного Primer3 в программном пакете Geneious (Biomatters Ltd., Окленд, Новая Зеландия) и перечислены в дополнительной таблице S1.Конечные концентрации праймера и зонда составляли 250 и 150 нМ соответственно. ПЦР выполняли в течение 45 циклов с денатурацией при 95 ° C в течение 15 с после элонгации в течение 1 мин при 60 ° C (cpa, cpb, iap) или 62 ° C (cpe, etx).

Комбинация неразрушающего контрастного вещества с инструментами фазово-контрастной визуализации на основе распространения

Abstract

Рентгеновская томография — это мощный инструмент, дающий доступ к морфологии биопленок в трехмерной пористой среде на мезоуровне. Из-за высокого содержания воды в биопленках коэффициент ослабления биопленок и воды очень близок, что затрудняет различие между биопленками и водой без использования контрастных веществ.До сих пор использование контрастных веществ, таких как сульфат бария, микрочастицы с серебряным покрытием или 1-хлорнафталин, добавленные в жидкую фазу, позволяло визуализировать трехмерную морфологию биопленки. Однако эти контрастные вещества не являются пассивными и потенциально взаимодействуют с биопленкой при введении в образец. Здесь мы используем природное неорганическое соединение, а именно сульфат железа, в качестве контрастного вещества, постепенно связанного в разбавленной или коллоидной форме с матрицей EPS во время роста биопленки. Комбинируя очень большое расстояние от источника до детектора на рентгеновском лабораторном источнике с лоренцевым фильтром, реализованным до томографической реконструкции, мы существенно увеличиваем контраст между биопленкой и окружающей жидкостью, что позволяет выявить трехмерную морфологию биопленки.Было проведено сравнение этого нового метода с методом, предложенным Davit et al. (Davit et al., 2011), в котором сульфат бария используется в качестве контрастного вещества для маркировки жидкой фазы. Количественные оценки между методами выявили существенные различия в объемных долях, полученных обоими методами. А именно, взаимодействия контрастного вещества и биопленки (например, отслоение биопленки), происходящие во время инъекции сульфата бария, вызвали уменьшение объемной доли биопленки более чем на 50% и смещение участков биопленки в другом месте колонки.Два ключевых преимущества недавно предложенного метода заключаются в том, что пассивное добавление сульфата железа поддерживает целостность биопленки перед визуализацией и что сама биопленка маркируется контрастным веществом, а не жидкой фазой, как в других доступных методах. Представленный метод сульфата железа может быть применен для понимания механизмов развития биопленки и биоблокировки в пористых материалах, а полученная морфология биопленки может стать идеальной основой для трехмерных численных расчетов гидродинамических условий для исследования взаимодействия биопленки и потока.

Образец цитирования: Каррел М., Белтран М.А., Моралес В.Л., Дерлон Н., Моргенрот Э., Кауфманн Р. и др. (2017) Визуализация биопленок в пористых средах с помощью лабораторной рентгеновской томографии: сочетание неразрушающего контрастного вещества с инструментами фазово-контрастной визуализации на основе распространения. PLoS ONE 12 (7): e0180374. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0180374

Редактор: Меган Бирн, Публичная научная библиотека, США

Поступила: 01.11.2016; Принята к печати: 14 июня 2017 г .; Опубликовано: 21 июля 2017 г.

Это статья в открытом доступе, свободная от всех авторских прав, и ее можно свободно воспроизводить, распространять, передавать, изменять, строить или иным образом использовать в любых законных целях.Работа сделана доступной по лицензии Creative Commons CC0 как общественное достояние.

Доступность данных: Данные, использованные в этом исследовании, а также реализация лоренцевского фильтра доступны в репозитории данных Digital Rocks. DOI: 10,17612 / P7Q07W.

Финансирование: Признана финансовая поддержка Швейцарского национального научного фонда (номер гранта SNF 144645) для M.C. и М. Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили, что конкурирующих интересов не существует.

Введение

Биопленки — это вездесущие сидячие микроорганизмы, встроенные в самостоятельно продуцируемый матрикс, состоящий из внеклеточных полимерных веществ (EPS) [1]. Матрица EPS защищает биопленки от окружающей среды, поэтому они постоянно развиваются и выживают в промышленных, природных или биомедицинских условиях [2]. В водонасыщенных почвах большинство микроорганизмов ведут сидячий образ жизни [3].Биопленки представляют большой интерес в этом контексте из-за их естественного вклада в биоремедиацию водоносных горизонтов [4] или в создание реактивных барьеров [5], в повышение нефтеотдачи пластов микробами [6] или в связывание диоксида углерода [7, 8]. . Однако рост биопленок в пористой среде и последующее биоблокирование поровых пространств [9] также может иметь пагубные последствия, поскольку это может привести к засорению скважин подпитки подземных вод [10] или глубоких геотермальных систем [11]. Это также может привести к усиленному нефиковскому распространению растворенных загрязнителей в грунтовых водах [12], существенно усложняя моделирование и масштабирование массопереноса в этих системах [13–18].

Биопленки были описаны как микробные ландшафты [19], охватывающие широкий диапазон пространственных масштабов [20], начиная от микро- (отдельные клетки), до мезо- (масштаб пятен биопленки) или до макромасштаба (масштабы реактора, водоносного горизонта). ). Соответственно, были разработаны различные экспериментальные методы для исследования процессов в различных масштабах, от оптических или конфокальных микроскопов для характеристики микромасштабного развития биопленок в проточных ячейках [21] или микрофлюидных устройствах [22] до исследований с использованием колонок почвы [23, 24] и характеризует влияние биопленок на свойства объемной системы (макромасштаб) (снижение проницаемости, дисперсия, скорость разложения растворенных веществ и т. д.).

Мезоуровень, представляющий интерес в данном исследовании, — это масштаб, в котором структура биопленки формируется в результате взаимодействия гидромеханических процессов и процессов массопереноса. В пористой среде этот масштаб приблизительно соответствует масштабу пор. Многие исследования пористых сред в этом масштабе были выполнены с использованием оптических систем [25–30], но были ограничены двумя измерениями. В последнее время оптическая когерентная томография (ОКТ) [31–33] стала очень мощным методом исследования этих процессов на мезоуровне для многих различных систем.Однако ОКТ использует слабый когерентный свет в видимом диапазоне, а непрозрачность трехмерных образцов ограничивает глубину проникновения. Следовательно, ОКТ нельзя использовать для трехмерных образцов пористой среды. Магнитно-резонансная томография (МРТ) — отличный инструмент для получения структурной информации как о потоке, так и о биопленке, она ограничена по пространственному разрешению (обычно разрешение грубее, чем 50 мкм ), что затрудняет доступ к точным фазам жидкости и биопленки с поперечного времена релаксации (T2) [12, 34–36].

В последние несколько десятилетий рентгеновская микротомография (X-ray μ CT) стала стандартным инструментом для визуализации образцов почвы [37, 38] и для изображения структур биопленок в трехмерных почвенных образцах.Дифференциация биопленки от жидкой фазы является сложной задачей при использовании рентгеновских лучей μ CT из-за высокого содержания воды в биопленках и, как следствие, очень близких коэффициентов ослабления рентгеновских лучей водой и биопленками. В результате часто используются химические вещества для увеличения контраста между биопленкой и жидкой фазой. Суспензии частиц сульфата бария (BaSO ₄) использовали в качестве контрастного вещества для мечения пор, не колонизированных биопленкой, и визуализации биопленки на лабораторном рентгеновском источнике [39].Покрытые серебром 10 микросфер размером мкм, нанесенные на поверхность биопленки, выявили границу раздела биопленка-жидкость с использованием синхротронного излучения [40]. Другой предложенный подход основан на использовании 1-хлорнафталина, жидкости, не смешивающейся с водой, в качестве контрастного вещества [41, 42]. Наконец, численное моделирование роста биопленок в масштабе пор было выполнено на основе структур биопленок, полученных при различных числах Рейнольдса с помощью рентгеновской синхротронной томографии с использованием BaSO ₄ в качестве контрастного вещества [43].

Все описанные методы, основанные на рентгеновском снимке μ CT для изображения биопленок, использовали либо суспензию частиц, либо химическое вещество для маркировки жидкой фазы, которая была введена a posteriori в образец, содержащий биопленку. Обоснование подхода с использованием суспензий BaSO ₄ в виде твердых частиц заключается во-первых, что частицы BaSO ₄ имеют микрометровый размер и ведут себя пассивно. Во-вторых, внутренние каналы биопленки меньше, чем частицы сульфата бария микрометрового размера [44], и поэтому адвекция частиц BaSO ₄ внутри биопленки незначительна.Однако эти доводы в значительной степени напоминают непроверенные до сих пор. Кроме того, учитывая, что BaSO ₄ является относительно тяжелым соединением ( ρ _{BaSO ₄} = 3,62 г / см ³), возникают проблемы седиментации, которые могут усугубляться агрегацией. частиц, а затем приводят к артефактам размытия движения. Использование добавок, таких как ксантановая камедь, стабилизирует эти растворы, но также изменяет реологические свойства, потенциально вызывая отслоение биопленки [39].С другой стороны, подход, основанный на покрытых серебром микросферах [40], страдает неоднородным распределением покрытых серебром микросфер, и возможные взаимодействия между суспензиями плотных микросфер и биопленкой не исследовались. 1-хлорнафталин, используемый как усиливающий контраст [41, 42], также имеет существенные недостатки, так как эта жидкость не смешивается с водой. Следовательно, кривизна несмачивающей фазы и углы смачивания могут не точно очерчивать границу раздела с водной фазой биопленки.Кроме того, не гарантируется выполнение требований капиллярного давления для проникновения во все незаполненные поры. Наконец, 1-хлорнафталин — мощный пестицид, взаимодействие которого с биопленками еще не изучено.

В этом исследовании вместо добавления потенциально разрушающего контрастного вещества к жидкой фазе мы используем сульфат железа (FeSO ₄), нетоксичное неорганическое соединение, естественным образом присутствующее в почвах. FeSO ₄ широко используется в исследованиях биопленок [32, 45, 46].Обоснование этого подхода заключается в том, что некоторые биопленки естественным образом демонстрируют высокое содержание неорганических веществ (например, минеральные осадки [47]). FeSO ₄ представляет собой соединение, естественно присутствующее в некоторых водоносных горизонтах, и его можно даже искусственно вводить для усиления биологической очистки загрязнителей (мышьяк, уран) путем увеличения их осаждения [48, 49]. Здесь биопленка культивируется при непрерывном добавлении раствора, содержащего FeSO ₄, который либо связан в разбавленной форме внутри EPS, либо образует коллоидное вещество, на котором может развиваться биопленка.Концентрации железа и сульфата, использованные в этом исследовании, находятся в диапазоне концентраций, наблюдаемых в окружающей среде и на загрязненных участках [50–52]. Чтобы увеличить контраст и визуализировать биопленку, мы отображаем биопленку на лабораторном источнике рентгеновских лучей, используя относительно большое расстояние от источника до детектора (STD). Большой STD использовался для использования распространения рентгеновских лучей в свободном пространстве для визуализации видимых эффектов преломления, возникающих при прохождении рентгеновских лучей через образец, метод, широко известный как фазовый контраст на основе распространения (PBI) [53, 54 ].Кроме того, надежный фильтр Фурье, который имеет форму функции Лоренца, применяется в качестве инструмента цифровой предварительной обработки к полученным проекциям для увеличения контрастности и улучшения отношения сигнал / шум (SNR) [55, 56] . Представленный метод позволяет получить трехмерное изображение морфологии биопленки в пористой среде на мезоуровне с использованием лабораторного рентгеновского источника и неразрушающего контрастного вещества.

Материалы и методы

Пористые среды и культивирование биопленок

Пористая среда, использованная в этом исследовании, состояла из гранул нафиона (NR50 1100 EW, Ion Power, Мюнхен, Германия) из 2 штук.Диаметр 5 мм, как у крупного песка. Этот материал имеет такие же физические и химические свойства, что и песчинки (например, гранулометрический состав или ионообменная способность), а его оптический показатель преломления в видимой области такой же, как у воды [57, 58]. Для инокуляции среды гранулы Nafion были погружены на 24 часа в аэрированную партию, содержащую 500 мл природной воды, взятой из пруда, расположенного на территории кампуса ETH. Через 24 ч трубчатый реактор для полиметилметакрилата (ПММА) (внутренний диаметр 10 мм, длина 160 мм) был влажно упакован гранулами и присоединен к партии.Биопленку культивировали в течение 7 дней с использованием установки, показанной на рис. 1А. Использовали питательный раствор на 500 мл из водопроводной воды, содержащий 1 г / л глюкозы и 100 мг / л, который меняли каждые 48 часов. Устанавливали объемную скорость потока 5 мл / мин, что соответствует скорости Дарси q 1,06 мм / с. Начальная пористость (объемная доля жидкой фазы) ϕ составляет ок. 40%, что дает среднюю масштабную скорость пор v _p ≈ q / ϕ = 2.65 мм / с и соответствующее число Рейнольдса Re = qd / ν ≈ 2,5 и число Пекле Pe = qd / D _{H ₂ O ≈} при При росте биопленки пористость уменьшилась в два раза, а это означает, что средняя масштабная скорость пор увеличилась вдвое.

Рис. 1.

(A) Схема экспериментальной установки, используемой для культивирования биопленки, а также области трубчатого реактора, используемого для получения изображений биопленки.(B) Схема конфигурации, используемой для рентгеновского сканирования, где расстояния SOD и STD представляют собой расстояние от источника до объекта (SOD) и расстояние от источника до детектора (STD).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0180374.g001

Контрастные вещества

Концентрация 100 мг / л контрастного вещества, используемого в этом исследовании FeSO ₄ x7 (H ₂ O) (соответствует 56 мг / л FeSO ₄ (20,6 мг / л Fe и 35,4 мг / л). SO ₄) или 0.37 ммоль / л FeSO ₄) непрерывно добавляли в питательный раствор во время роста биопленки. Концентрации как железа, так и сульфатных соединений находятся в диапазоне концентраций, наблюдаемых в окружающей среде [50–52] или используемых для других экспериментальных работ [32, 45, 46]. При этой концентрации и при начальном pH, наблюдаемом в этом исследовании (pH ≈ 7), железо должно быть все еще растворимым. Однако окисление до менее растворимого Fe (III), имеющего тенденцию к образованию коллоидов, должно происходить довольно быстро [52].Фактически, железные хлопья образовались через несколько часов после запуска системы. Поэтому впускную трубку осторожно устанавливали близко к уровню воды, чтобы ограничить циркуляцию хлопьев и улучшить их осаждение. Выросшая здесь биопленка имела типичный для оксидов железа коричневатый цвет. Перед рентгеновскими измерениями через проточную ячейку вводили объем воды, в 8 раз превышающий исходный объем пор, чтобы гарантировать, что в жидкой фазе не осталось несвязанного биопленки железа.

Чтобы исследовать влияние коллоидного и флокулированного железа на поток пористой среды и контролировать отложение коллоидов внутри среды, мы провели контрольный эксперимент.В этом эксперименте раствор, содержащий FeSO ₄, рециркулировали через насадочный трубчатый реактор в условиях, идентичных указанным выше, но без инокуляции.

Чтобы сравнить результаты, полученные с помощью этого нового подхода с уже существующим методом, мы следовали подходу, представленному Davit et al. [39], используя суспензию микрочастиц Micropaque ^® (Guerbet, Zurich) BaSO ₄ в качестве контрастного вещества, которое вводили в жидкую фазу после роста биопленки.Суспензии BaSO ₄ используются для изображения биопленок в пористых средах из-за высокого коэффициента ослабления бария. Другое преимущество состоит в том, что частицы BaSO ₄ имеют микрометровый размер и, следовательно, их физический размер следует исключить из матрицы EPS [44]. Суспензии Micropaque ^® имеют гранулометрический состав, близкий к 1 мкм (по данным производителя продукта, 25% ≤ частиц крупнее 2 мкм , 20% ≤ 0,5 мкм средний диаметр 1.25 мкм ). Эти суспензии также содержат дополнительные стабилизирующие агенты (например, ксантановую камедь, полидиметилсилоксан (ПДМС) или цитрат натрия и т. Д.), Которые предотвращают агрегацию и осаждение частиц, но сильно влияют на реологические свойства суспензии. Plouraboué et al. [59] показали, что суспензии сульфата бария Micropaque ^® демонстрируют вязкость, намного превышающую вязкость воды, и поведение разжижения при сдвиге, аналогичное поведению крови (см. Рис. 1.b в Plouraboué et al.[59]). Здесь суспензия Micropaque ^® с концентрацией 0,1 г / л BaSO ₄ была введена в трубчатый реактор при 10% объемной скорости потока, применяемой во время культивирования биопленки, в попытке избежать принудительного отделения из-за инъекции контрастное вещество. Из-за эффектов диспергирования и разбавления распределение BaSO ₄ в реакторе было неоднородным после 1 объема пор. Поэтому для полного насыщения трубчатого реактора суспензией закачивали в 2 раза превышающий начальный объем пор трубопровода.Хотя инъекция была сделана осторожно и со скоростью потока в 10 раз меньше, чем для воды, во время инъекции визуально наблюдалось значительное отделение биопленки.

Рентгеновские снимки

В таблице 1 представлен обзор различных условий получения изображений и подходов к анализу изображений для четырех наборов данных, полученных в результате трех различных сканирований, выполненных в рамках данной работы. Первое сканирование было выполнено с образцом, содержащим биопленку, окрашенную только FeSO ₄.Для этого сканирования (использованного для получения наборов данных FeSO ₄ и LFeSO ₄) расстояние от источника до объекта (SOD) составляло 130 мм, а расстояние от источника до детектора (STD) было установлено на максимальное значение. возможное расстояние 2330 мм (см. рис. 1B). Как упоминалось ранее, это довольно большое расстояние STD было выбрано для усиления эффектов рефракции, возникающих при прохождении рентгеновских лучей через образец. Изготовленная на заказ томографическая установка была оснащена микрофокусной рентгеновской трубкой (Viscom XT9160-TDX) и плоскопанельным детектором 40 x 40 см ² (Perkin Elmer XRD 1621) с размером 200 x 200 мкм ² пикселей.Поскольку биопленки слабо поглощают рентгеновские лучи, источник должен был работать при напряжении 50 кВ и токе сфокусированного электронного пучка (FEC) 190 мкА . 1441 проекция с полем зрения (FOV) 1,85 x 1,85 см ² были собраны с шагом 0,25 ° с двумя кадрами на проекцию с разрешением 9 мкм . Для второго сканирования (набор данных BaSO ₄) использовалась та же выборка (см. Таблицу 1). Расстояние SOD не изменилось, а расстояние STD было уменьшено до 1017 мм, что соответствует разумному расстоянию для стандартной визуализации на основе ослабления рентгеновских лучей.Напряжение было установлено на 80 кВ и FEC на 120 мкА . 1441 проекция с полем обзора 4,3 x 4,3 см ² были собраны с шагом 0,25 ° с тремя кадрами на проекцию с разрешением 21 мкм . Разница в разрешении между обоими сканированиями связана с тем, что SOD оставалось постоянным, а STD уменьшалось, уменьшая физическое увеличение. Для последнего сканирования (контрольный набор данных LControl) настройки были такими же, как и для первого.Из-за довольно низкого контраста проекций и вариаций интенсивности источника проекции были нормализованы для достижения разумного контраста в трехмерном объеме. Эта предварительная обработка и реконструкция выполнялись с помощью программных средств собственной разработки на основе фильтрованной обратной проекции [60]. Время сканирования составляло ок. 3 часа.

Анализ изображений

Предварительная обработка изображений с помощью лоренцевского фильтра.

Ключевым этапом получения результатов, полученных с данными FeSO ₄, является применение лоренцевского фильтра обработки изображений в пространстве Фурье к каждой рентгенографической проекции перед томографической реконструкцией.Чтобы оценить полезность фильтра Лоренца, данные первого сканирования были восстановлены с применением этого фильтра и без его применения (LFeSO ₄ соответственно FeSO ₄ наборы данных), а также применены к контрольному набору данных (LControl, см. Таблицу 1) . Представленный здесь фильтр существенно снижает шум и увеличивает контраст. Он основан на оригинальной работе [61], где он был первоначально разработан как метод для получения информации о фазе и амплитуде из рентгеновских голограмм, основанных на прямом распространении, с использованием монохроматических пучков и специально для образцов из одного материала.Здесь отбрасываются предположения о монохроматичности и единственном материале, и алгоритм используется строго в качестве инструмента обработки изображений, который использует его высокую числовую стабильность в присутствии шума. Эта стабильность, как было показано в предыдущих исследованиях, значительно улучшает контраст и качество сигнала как при простой проекционной визуализации, так и при томографии [55, 56, 62–66]. Используемый здесь лоренцевский фильтр имеет следующий вид: (1) Здесь I ^Rad — это полученное рентгенографическое изображение в определенной ориентации.I ^Filt — это отфильтрованное изображение после применения лоренцевского фильтра к I ^Rad. Символы F и F ^-1 являются прямым и обратным преобразованием Фурье. k _⊥ = ( k _x, k _y) — координаты поперечного пространства Фурье, обратные координатам реального пространства r _⊥ = ( x , y ). Другими словами, операция в уравнении (1) выглядит следующим образом: (i) Возьмите преобразование Фурье изображения I ^Rad, которое в данном случае служит входными данными; (ii) умножить результат на функцию Лоренца пространства Фурье и; (iii) выполнить обратное преобразование Фурье, получив таким образом отфильтрованное изображение I ^Filt; (iv) выполнить томографическую реконструкцию, используя метод обратной проекции, упомянутый ранее.Фильтр был реализован как процедура Matlab ^® [67]. Неотрицательная действительная константа α является важным параметром фильтра. Важно отметить, что в исходной форме алгоритма (см. [61]) значение α было известно априори , поскольку оно предназначено специально для работы только с единичными образцами материала. Однако для наших целей мы используем его как параметр настройки , который может быть отрегулирован в соответствии с тем, сколько шума нужно удалить без чрезмерного размытия ключевых особенностей (краев) в реконструкциях.Чтобы получить хорошую оценку α , мы используем стратегию, которая берет необработанное проекционное изображение из набора КТ, которое используется в качестве эталона, а затем графически сравнивает с отфильтрованным изображением. Пример этой стратегии показан на рис. 2. Здесь у нас есть нефильтрованное радиографическое изображение I ^Rad на рис. 2A и отфильтрованная по Лоренцу версия I ^Filt того же изображения на рис. 2B и 2C, полученная со значениями α. с 1,5 ⋅ 10 ⁻⁶ и с 1,5 ⋅ 10 ⁻⁵ соответственно.В данной работе использовалось значение α , равное 1,5 ⋅ 10 ⁻⁶. На рис. 2D показаны профили оттенков серого изображений (A), (B) и (C) на одной и той же горизонтальной линии, что позволяет графическое сравнение. Эти профили показывают, как синяя кривая, соответствующая (B), показывает значительно меньше шума, чем красная кривая, соответствующая (A). В дополнение к снижению шума мы видим, что синий профиль, соответствующий (B), также следует той же тенденции, что и красный. Это более четко показано на вставке, показывающей увеличенную область профилей.Для другого значения α ( α = 1,5 10 ⁻⁵), как (C), так и (D) (черный), эффект чрезмерного размытия очевиден. Баланс снижения шума и соответствия тенденциям дает нам качественный, но четкий визуальный указатель на то, не является ли наше значение, выбранное для α , ни переоцененным, ни недооцененным.

Рис. 2.

(A) исходное изображение проекции (нефильтрованное). (B) Изображение (A) с фильтром Лоренца с использованием α = 1,5 ⋅ 10 ⁻⁷. (C) Изображение A с фильтром Лоренца с использованием α = 1.5 ⋅ 10 ⁻⁸. Тот же динамический диапазон был использован для (A), (B) и (C) для сравнения. (D) отображает горизонтальные нормализованные профили в месте пунктирной линии в (A), (B) и (C), а также для дополнительных значений α . На вставке показан увеличенный профиль значения серого в центре трубчатого реактора. Масштабная линейка в (A) также действительна для (B) и (C).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0180374.g002

Эффективность лоренцевского фильтра с томографической точки зрения показана на рисунке 3.Здесь мы показываем томографические срезы одной и той же области с (A) и без (C) применения лоренцевского фильтра перед реконструкцией. Из этого примера очевидно, что применение лоренцевского фильтра перед реконструкцией значительно улучшает визуализацию границы раздела биопленка / вода при томографической реконструкции. На рис. 3B и 3D показаны профили значений серого, обозначенные P1 и P2, ясно иллюстрирующие уменьшение шума. Границы все еще остаются четко определенными после применения лоренцевского фильтра.

Рис. 3. Срезы из наборов данных FeSO ₄ (A) и LFeSO ₄ (C).

Для сравнения оба изображения были нормализованы с насыщением 0,4% пикселей. Два красных соотв. синие стрелки указывают место и направление, в котором извлекаются профили значений серого. Масштабная линейка соответствует 1 мм. Профиль значения серого для первого (P1, (D) и второго местоположения P2, (B)). Профили помечены различными наблюдаемыми фазами.

https: // doi.org / 10.1371 / journal.pone.0180374.g003

Сегментация.

Поскольку использовались два разных контрастных вещества, было невозможно определить одну процедуру сегментации и применить ее ко всем наборам данных, так что для каждого контрастного вещества был определен единый подход. После реконструкции набора данных LFeSO ₄ контраст изображения был увеличен, так что зерна нафиона были в основном насыщенными. Затем в Avizo ^® был запущен диффузионный фильтр, управляемый кривизной (5 итераций и стандартные параметры: резкость = 0.9, анизотропия = 0,6), уменьшая шум при сохранении краев. На фиг. 4A показан срез (расположенный в середине стека), полученный после фильтрации, а на фиг. 4C (красный) показана 8-битная гистограмма значений серого, полученная для всего стека. На этой гистограмме четко различимы пики, соответствующие жидкой фазе и фазе нафиона. Пик жидкой фазы имеет сильное плечо с правой стороны, что соответствует фазе биопленки. Перекрытие между областями жидкости и биопленки, а также сильный хвост, демонстрируемый плечом биопленки, обусловлены неоднородным распределением значений серого в области биопленки (см. Рис. 4A).Чтобы сегментировать эти две области, мы предположили два перекрывающихся пика для биопленки и жидкой фазы и зафиксировали порог в точке перегиба, расположенной между пиком жидкой фазы и плечом биопленки. Определение этой точки перегиба связано с некоторой неопределенностью (см. Дополнительную информацию). Поэтому мы провели простой анализ чувствительности, определив три разных порога в центре и ниже, соответственно. верхний конец плечевой области. Эти пороги показаны фиолетовым цветом, соответственно.желтый и зеленый на рис. 4С). Значения серого, используемые для анализа чувствительности, соответствуют ок. 10% от центрального значения серого (пурпурный). Для всех пороговых значений было выполнено определение порога в VG Max ^®. Затем была выполнена операция закрытия, чтобы заполнить небольшие пустоты, которые считаются шумом от каждой фазы. Алгоритм выращивания области использовался для выявления отсоединенных сегментов биопленки или жидкости (например, пор в биопленке или плавающих битов биопленки), которые были слиты с окружающей фазой.Поскольку мы наблюдали образование и смещение пузырьков воздуха во время вымывания оставшегося железа или введения BaSO ₄, пузырьки воздуха были сегментированы и слились в жидкую фазу. Результат этой сегментации показан на рис. 4D).

Рис. 4. Средние срезы (отфильтрованные перед сегментацией в соответствии с информацией в таблице 1) для наборов данных LFeSO ₄ (A) и BaSO ₄ (B).
Соответствующие 8-битные гистограммы значений серого показаны на C) для набора данных BaSO ₄ (синий) и для набора данных LFeSO ₄ (красный) после улучшения контраста и применения фильтр.Для набора данных LFeSO ₄ вертикальные пунктирные линии желтого, пурпурного и зеленого цвета соответствуют значениям изоповерхности 64, 73 и 82, используемым для сегментации и соответствующего анализа чувствительности. Аннотированы пики, соответствующие различным фазам. (D) и (E) показывают сегментированные наборы данных, в которых твердая, жидкая и биопленочная фазы имеют цветную кодировку белого, синего и зеленого цветов соответственно. Масштабная линейка соответствует 1 мм.
https://doi.org/10.1371 / journal.pone.0180374.g004
На рис. 4В показан срез (то же место, что и на рис. 4А, в середине стека) набора данных BaSO ₄, полученный после применения того же фильтра с управляемой трехмерной кривизной. Соответствующая гистограмма набора данных BaSO ₄ (см. Рис. 4C, синего цвета) показывает пик для зерен нафиона (центральный пик) и два дополнительных пика для биопленки и жидкой фазы. Как показано на рис. 4B, из-за высокого затухания BaSO ₄ этот набор данных показал некоторые артефакты упрочнения пучка.Эти артефакты были преодолены при сегментации с помощью реализации ImageJ [68, 69] алгоритма роста засеянной области [70], обеспечивающего удовлетворительную сегментацию твердой фазы (подробности см. В дополнительной информации). Затем жидкую фазу и фазу биопленки получали пороговым значением после использования сегментированной твердой фазы в качестве маски. На рис. 4E показан соответствующий сегментированный результат. Для этого порогового значения был проведен анализ чувствительности, который представлен в разделе «Дополнительная информация».Наконец, контрольный образец был визуализирован и сегментирован в соответствии с тем же подходом, что и для набора данных LFeSO ₄.
Регистрация двух разных наборов данных.
Регистрация (выравнивание объемного изображения в единой системе координат) двух разных томограмм была выполнена для локального сравнения (например, условных вероятностей) объемных долей, полученных из разных наборов данных. Для начала было согласовано разрешение обоих наборов данных.Затем процесс согласования координат был выполнен в Matlab ^® на твердых фазах, потому что это наиболее похожие фазы в обоих наборах данных. Здесь функция imregister с параметрами по умолчанию использовалась для поиска и оптимизации аффинного геометрического преобразования, минимизирующего показатель среднеквадратичной ошибки. Оптимизация регистрации проводилась с использованием метода регулярного ступенчатого градиентного спуска. Все результаты и анализы, представленные ниже, были получены из зарегистрированных наборов данных.
Результаты
На рис. 4 (A) и 4 (B) показаны срезы наборов данных LFeSO ₄ и BaSO ₄, полученных после фильтрации с помощью трехмерного фильтра на основе кривизны. На обоих изображениях видна биопленка (светло-серые зоны на) A) и самые темные на (B), но кажется, что на изображении (A) биопленки значительно больше. Значения серого цвета биопленки на (A) демонстрируют важную неоднородность. На этом изображении можно выделить более темные зоны, принадлежащие жидкой фазе, и более светлые — биопленке.Фиг.4 (D) и 4 (E) показывают соответствующие сегментированные срезы, где сегментированные фазы биопленки, полученные с обоими контрастными веществами, примерно перекрываются. Однако как на предварительно обработанных (лоренцево, когда используется и трехмерная фильтрация на основе кривизны), так и на сегментированных изображениях, некоторые области биопленки локально не совпадают. На рис. 5. показаны трехмерные изображения твердой фазы (зерна нафиона) и сегментированные наборы данных, которые показывают, что объемная доля биопленки (зеленый цвет) намного меньше для набора данных BaSO ₄.Качественно биопленка выглядит более неоднородной для BaSO ₄, чем для набора данных LFeSO ₄. Для последних биопленка имеет сложные гофрированные формы, которые более взаимосвязаны. Похоже, что более подробная информация о морфологии биопленки решается, когда LFeSO ₄ используется в качестве усиливающего контраст агента.
На рис. 6. показаны профили объемной доли в продольном направлении для наборов данных LFeSO ₄ и BaSO ₄.Полученные средние суммарные объемные доли приведены в легенде. Профили, полученные для твердой фазы обоих образцов, показывают очень хорошее перекрытие и имеют относительно близкие объемные доли, составляющие около 60% от всего объема образца. Колебания этих значений представляют собой длину волны ок. 2,5 мм примерно соответствует диаметру зерна, что указывает на определенную степень упорядоченности в упаковке. Несмотря на то, что профили объемных фракций, полученные для обеих твердых фаз, хорошо совпадают, это не относится к остальным фазам.Например, фракция биопленки, полученная для набора данных LFeSO ₄, примерно в три раза больше, чем для набора данных BaSO ₄. Заштрихованная область ограничена нижним и верхним порогами, используемыми для анализа чувствительности. По всей колонке объемная доля биопленки, полученная с помощью FeSO ₄, постоянно больше, чем для набора данных BaSO ₄ (примерно вдвое больше).
Рис. 6. Профили объемных фракций (S: твердое тело, L: жидкость, BF: биопленка), полученные для различных наборов данных (BaSO ₄: мелкие штрихи, FeSO ₄: более длинные штрихи).
Заштрихованная область определяется результатами, полученными для анализа пороговой чувствительности. Для ясности результаты этого анализа чувствительности не добавляются к жидким фазам. Средние объемные доли (в процентах) для различных фаз (твердый V _S, жидкий V _L, Biofilm V _BF), полученные с двумя разными контрастами. усиливающие агенты указаны в легенде.
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0180374.g006
Чтобы изучить, как фазы перекрываются в трехмерном пространстве, мы локально вычислили условные вероятности перекрытия фаз между двумя разными наборами данных, например процентное соотношение первой фазы, соответствующей той же фазе во второй ( P ( A ∣ B ) = P ( B ∩ A ) / P ( B ) ) (см. таблицу 2). При более чем 90% в обоих случаях перекрытие очень хорошее для твердых фаз.Опять же, остальные фазы существенно различаются. Для фазы биопленки пересечение вокселей, идентифицированных как биопленка в наборах данных BaSO ₄ и LFeSO ₄, соответствует только ок. 25% против ок. 70% в противном случае. Это указывает на два разных аспекта: во-первых, объемная доля биопленки, полученная для набора данных LFeSO ₄, существенно выше, чем для набора данных BaSO ₄. Во-вторых, поскольку пятна биопленки отслоились после инъекции BaSO ₄, они могли повторно прикрепиться или отфильтроваться в некоторых других местах в пределах колонки, где в наборе данных LFeSO ₄ биопленка не видна.
Таблица 2. Условные вероятности того, что данная фаза в данных FeSO4 локально принадлежит одной и той же фазе в данных BaSO4, вычисленных для твердой (S), жидкой (L) и биопленочной (BF) фаз для зарегистрированного FeSO _{с фильтром Лоренца 4} и BaSO ₄ наборов данных.
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0180374.t002
Контрольный образец обрабатывали так же, как набор данных FeSO ₄, за исключением того факта, что он не был инокулирован бактериальным посевным материалом. и что среда для выращивания не добавлялась в течение 7 дней.Обработка изображения (фильтры, реконструкция и сегментация) была такой же, как и для набора данных FeSO ₄. Целью этого контроля было оценить концентрацию коллоидного FeSO ₄ в самой биопленке. Для контроля была получена коллоидная объемная фракция около 10%, что указывает на то, что содержание железа составляло ок. 54% от объемной доли биопленки. Это свидетельствует о достаточно высоком содержании неорганических веществ в культивируемой здесь биопленке.
Обсуждение
В этом исследовании комбинация неразрушающего контрастного вещества, длительного STD и лоренцевой фильтрации выявила интактную морфологию трехмерной биопленки в пористой среде. Эта конкретная комбинация контрастного вещества и инструментов визуализации, заимствованных из фазово-контрастной визуализации, позволила существенно снизить шум и улучшить контраст образца, содержащего материалы с небольшими различиями коэффициентов ослабления.
Различная объемная фракция, полученная для контрастных агентов BaSO ₄ и FeSO ₄, может быть объяснена следующими причинами: неопределенность, связанная с сегментацией или регистрацией, эффекты частичного объема из-за разного разрешения изображения и взаимодействия между BaSO ₄ суспензия и биопленка (напр.г. проникновение или инвазия биопленки и отрыв биопленки при введении контрастного вещества). Объемная фракция, полученная для биопленки, чувствительна к рассмотренному пороговому значению, но во всех случаях остается постоянно выше объемной фракции BaSO ₄. Хорошее совпадение профилей средних объемных долей и объемных долей твердой фазы, показанных на рис. 6., позволяет нам исключить неопределенность, связанную с регистрацией или эффектами частичного объема, как основную причину упомянутых существенных различий.Следовательно, проникновение мельчайших частиц BaSO ₄ внутрь биопленки и отрыв биопленки (как схематически показано на рис. 7), по-видимому, являются корнем наблюдаемых различий.
Около 20% используемых частиц BaSO ₄ имеют диаметр меньше 0,5 мкм и меньше, чем ожидаемые самые большие поры биопленки [44]. В данном случае реалистично предположить, что часть мельчайших частиц BaSO ₄ могла попасть в каналы биопленки (см. Рис.) и, следовательно, маркируя части биопленки как жидкие.
Как упоминалось ранее, отрыв биопленки наблюдался во время инъекции BaSO ₄ (см. Дополнительную информацию). Это наблюдение уже отмечалось ранее в другом исследовании [39]. Мы оценили среднее напряжение сдвига стенки, оказываемое суспензией BaSO ₄ на биопленку, принимая поток жидкости по степенному закону в упрощенном представлении средней поры в нашей системе. Хотя скорость потока была в 10 раз меньше во время закачки BaSO ₄, чем скорость роста, мы обнаружили, что ок.Напряжение сдвига стенки в 3 раза выше на стадии нагнетания BaSO4 из-за высокой вязкости и свойств разжижения при сдвиге суспензии BaSO4. Учитывая чрезвычайно широкий диапазон скоростей сдвига, имеющий место в реальной пористой среде [58], локально отношение сдвиговых напряжений стенки может быть значительно выше, вызывая наблюдаемое отделение. В таком случае нельзя пренебрегать реологическими свойствами суспензии BaSO ₄.
Derlon et al. [71] и Rochex et al. [72] показали, что биопленки образуют многослойные структуры и что сопротивление биопленки сдвигу или прочности на сдвиг [73] зависит от нормального положения стенки внутри биопленки.Möhle et al. [46] показали, что за счет увеличения прочности биопленки на сдвиг высокие концентрации железа в биопленках положительно влияют на стабильность биопленок. Здесь области биопленки с более низкой прочностью на сдвиг, вероятно, отделились при инъекции BaSO ₄, а базальные слои с более высокой прочностью на сдвиг остаются прикрепленными. Истирание биопленки частицами — еще один известный механизм отрыва [71]. Не исключено, что взаимодействие частиц BaSO ₄ с биопленкой также способствовало наблюдаемому отслоению.Рис. 7. иллюстрирует различные механизмы, потенциально вызывающие отслоение. Отслоение, вызванное сдвигом и истиранием, объясняет наблюдаемые различия в общих и локальных объемных долях биопленки. В таблице 2 низкая вероятность того, что фаза биопленки, полученная с BaSO ₄, также принадлежит фазе биопленки, полученной с FeSO ₄, также может указывать на отложение или фильтрацию некоторых отслоившихся участков биопленки дальше по потоку в колонке.
Таблица 3 суммирует ключевые моменты, по которым можно оценить метод [39] и метод, представленный здесь.Метод на основе FeSO ₄ позволяет получать изображения биопленок в пористой среде с использованием нетоксичного и неразрушающего контрастного вещества на лабораторном рентгеновском источнике с подвижным детектором. Комбинация длинного STD и лоренцевского фильтра позволяет существенно увеличить отношение сигнал / шум. Как упоминалось ранее, коллоидной фракцией, наблюдаемой для контрольного набора данных (LControl), пренебречь нельзя. Тем не менее, обнаруженная фракция биопленки в эксперименте с LFeSO4 намного выше, что подтверждает, что более высокая объемная фракция, наблюдаемая в последнем случае, обусловлена биологической активностью либо самой биопленкой, либо осаждением, вызванным бактериальной активностью (например,г. окисление железа, образование сульфидных солей, см. [5] и [52]). Метод на основе BaSO ₄ обеспечивает четкий контраст между различными фазами, но взаимодействие суспензии BaSO ₄ с биопленкой вызывает значительное отрывание биопленки. В обоих случаях остается некоторая неопределенность, связанная с сегментацией, которую, однако, можно выразить количественно.
Заключение
В этой статье мы представили инновационный метод изображения биопленок в пористой среде, сочетающий сульфат железа в качестве контрастного агента, длинный STD и лоренцевский фильтр.Нетоксичный и неразрушающий контрастный агент непрерывно добавляли к биопленке во время роста биопленки. Комбинация использования большого STD вместе с применением лоренцевского фильтра Фурье позволила использовать эффекты преломления. Восстановленные данные показали существенное снижение шума и увеличение контраста между материалами, показывающими низкие различия коэффициентов затухания, выявляя морфологию биопленки. Мы обнаружили, что в пористой среде и для настоящих условий роста биопленка имеет сложные гофрированные структуры.Мы сравнили этот метод с существующим методом, используя BaSO ₄ в качестве контрастного вещества для того же самого образца, и наблюдали некоторые различия в морфологии биопленки, полученные из-за взаимодействия между биопленкой и BaSO ₄. А именно, из-за истирания и отслоения при сдвиге более 50% биопленки было вымыто контрастным агентом, что подчеркивает необходимость неразрушающих контрастных агентов для визуализации биопленки в пористой среде. Метод, представленный в этом исследовании, обеспечивает неразрушающие методы трехмерной морфологии биопленок в пористой среде на лабораторном рентгеновском источнике.Возможные применения — это исследования взаимодействия биопленок, их морфологии и локальных гидродинамических и массопереносных процессов в реалистичных моделях пористых сред.
Благодарности
Финансовая поддержка M.C. и М. Авторы благодарят Тони Блански за изготовление трубчатого реактора, Даниэля Брауна и Люсьена Биолли за предоставление некоторого оборудования, необходимого для этого исследования, а также Мишель Гриффа за некоторые интересные обсуждения, связанные с сегментацией.Часть этой работы была выполнена с использованием платформы Empa для анализа изображений (http://empa.ch/web/s499/software-/-imaging-platform) в Центре рентгеновской аналитики Empa. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Ссылки
1. Холл-Стодли Л., Костертон Дж., Стодли П. Бактериальные биопленки: от окружающей среды до инфекционных заболеваний. Обзоры природы микробиологии. 2004; 2: 95–108. pmid: 15040259
2. Костертон Дж, Стюарт П.С., Гринберг Е.П.Бактериальные биопленки: частая причина стойких инфекций. Наука. 1999; 284: 1318–1322. pmid: 10334980
3. Гриблер С., Людерс Т. Микробное биоразнообразие в экосистемах подземных вод. Пресноводная биология. 2009. 54: 649–677.
4. Meckenstock RU, Elsner M, Griebler C., Lueders T., Stumpp C., Aamand J, et al. Биодеградация: обновление концепций контроля микробной очистки загрязненных водоносных горизонтов. Наука об окружающей среде и технологии. 2015; 49: 7073–7081.pmid: 26000605
5. Блоуес Д.В., Птачек С.Дж., Беннер С.Г., МакРэй CWT, Беннетт Т.А., Пульс РВ. Обработка неорганических загрязнений с использованием проницаемых реактивных барьеров. Журнал гидрологии загрязнителей. 2000. 45: 123–137.
6. Лаппин-Скотт Х.М., Кьюсак Ф., Костертон Дж. В.. Реанимация питательными веществами и рост голодных клеток в кернах песчаника: новый подход к увеличению нефтеотдачи. Прикладная и экологическая микробиология. 1988; 54: 1373–1382. pmid: 16347648
7.Эбигбо А., Хельмиг Р., Каннингем А.Б., класс H, Герлах Р. Моделирование роста биопленки в присутствии углекислого газа и потока воды в недрах. Достижения в области водных ресурсов. 2010; 33: 762–781.
8. Митчелл А.С., Филлипс А., Шульц Л., Паркс С., Спанглер Л., Каннингем А.Б. и др. Образование и стабильность микробного минерала CaCO3 в экспериментально смоделированном солевом водоносном горизонте высокого давления со сверхкритическим CO2. Международный журнал по контролю за парниковыми газами. 2013; 15: 86–96.
9. Бавай П., Вандевивер П., Хойл Б.Л., ДеЛео ПК, де Лосада Д.С. Воздействие на окружающую среду и механизмы биологического засорения насыщенных почв и водоносных горизонтов. Критические обзоры в области экологической науки и технологий. 1998. 28: 123–191.
10. Бауэр Х. Искусственное пополнение подземных вод: гидрогеология и инженерия. Гидрогеологический журнал. 2002. 10 (1): 121–142.
11. Песок В. Микробная жизнь в геотермальных водах. Геотермия.2003. 32: 655–667.
12. Сеймур Дж. Д., Гейдж Дж. П., Кодд С. Л., Герлах Р. Аномальный перенос жидкости в пористой среде, вызванный ростом биопленки. Письма с физическим обзором. 2004; 93: 198103. pmid: 15600886
13. Давит Ю., Дебенест Г., Вуд Б. Д., Куинтард М. Моделирование неравновесного массопереноса в биологически реактивных пористых средах. Достижения в области водных ресурсов. 2010; 33: 1075–1093.
14. Гольфье Ф., Вуд Б.Д., Оргогозо Л., Куинтар М., Буэс М. Биопленки в пористой среде: разработка макроскопических уравнений переноса посредством усреднения объема с закрытием для условий локального равновесия масс.Достижения в области водных ресурсов. 2009. 32: 463–485.
15. Капеллос Г.Е., Алексиу Т.С., Пайатакес А.С. Теоретическое моделирование течения жидкости в клеточных биологических средах: обзор. Математические биологические науки. 2010; 225: 83–93. pmid: 20303992
16. Оргогозо Л., Гольфье Ф., Буэс М., Куинтар М. Повышение уровня транспортных процессов в пористых средах с биопленками в неравновесных условиях. Достижения в области водных ресурсов. 2010. 33: 585–600.
17. Pintelon TRR, Graf von der Schulenburg DA, Johns ML.На пути к оптимальному снижению проницаемости в пористой среде с использованием моделирования роста биопленок. Биотехнология и биоинженерия. 2009. 103: 767–779. pmid: 19309753
18. фон дер Шуленбург DAG, Pintelon TRR, Picioreanu C, Van Loosdrecht MCM, Johns ML. Трехмерное моделирование роста биопленок в пористой среде. Журнал Айше. 2009; 55: 494–504.
19. Баттин Т.Дж., Слоан В.Т., Кьеллеберг С., Даймс Х., руководитель И.М., Кертис Т.П. и др. Микробные ландшафты: новые пути к исследованию биопленок.Обзоры природы микробиологии. 2007; 5: 76–81. pmid: 17170748
20. Milferstedt K, Pons MN, Morgenroth E. Анализ характерных масштабов длины в структурах биопленок. Биотехнология и биоинженерия. 2009. 102: 368–379. pmid: 18949757
21. Стодли П., Доддс И., Де Бир Д., Скотт Х. Л., Бойл Д. Д.. Текущие биопленки как механизм транспорта биомассы через пористую среду в ламинарных и турбулентных условиях в лабораторной реакторной системе. Биообрастание. 2005. 21: 161–168.pmid: 16371336
22. Рускони Р., Лекуйер С., Гульельмини Л., Стоун Х.А. Ламинарный поток вокруг углов вызывает образование стримеров из биопленки. Журнал Интерфейса Королевского общества. 2010; 7: 1293–1299.
23. Каннингем А.Б., Чараклис В.Г., Абедин Ф., Кроуфорд Д. Влияние накопления биопленки на гидродинамику пористой среды. Наука об окружающей среде и технологии. 1991; 25: 1305–1311.
24. Тейлор С., Яффе П. Рост биопленок и связанные с этим изменения физических свойств пористой среды: 1.Экспериментальное исследование. Исследование водных ресурсов. 1990; 26: 2153–2159.
25. Dupin HJ, McCarty PL. Влияние морфологии колоний и дезинфекции на биологическое засорение пористой среды. Наука об окружающей среде и технологии. 2000; 34: 1513–1520.
26. Kone T, Golfier F, Orgogozo L, Oltéan C, Lefèvre E, Block JC и др. Влияние неоднородностей, вызванных биопленкой, на транспорт растворенных веществ в пористых средах. Исследование водных ресурсов. 2014; 50: 9103–9119.
27.Паульсен Дж. Э., Оппен Э., Бакке Р. Морфология биопленок в пористой среде, исследование с помощью микроскопических и визуальных методов. Водные науки и технологии. 1997; 36: 1.
28. Шарп Р.Р., Каннингем А.Б., Комлос Дж., Биллмайер Дж. Наблюдение за скоплением и структурой толстой биопленки в пористой среде и соответствующими эффектами гидродинамики и массопереноса. Водные науки и технологии. 1999; 39: 195.
29. Thullner M, Zeyer J, Kinzelbach W. Влияние роста микробов на гидравлические свойства поровых сетей.Транспорт в пористой среде. 2002; 49: 99–122.
30. Вайенас Д.В., Михалопулу Э., Константинидес Г.Н., Павлу С., Паятакес А.С. Визуализация экспериментов по биоразложению в пористой среде и расчет скорости биодеградации. Достижения в области водных ресурсов. 2002; 25: 203–219.
31. Дерлон Н., Питер-Варбанец М., Шайдеггер А., Пронк В., Моргенрот Э. Хищничество влияет на структуру биопленки, образующейся на ультрафильтрационных мембранах. Водные исследования. 2012; 46: 3323–3333.pmid: 22534121
32. Wagner M, Taherzadeh D, Haisch C, Horn H. Исследование мезомасштабной структуры и объемных характеристик биопленок с использованием оптической когерентной томографии. Биотехнология и биоинженерия. 2010; 107: 844–853. pmid: 20717977
33. Xi C, Marks D, Schlachter S, Luo W, Boppart SA. Трехмерное изображение развития биопленки с высоким разрешением с помощью оптической когерентной томографии. Журнал биомедицинской оптики. 2006; 11: 034001–034006.
34. Граф фон дер Шуленбург Д.А., Акпа Б.С., Гладден Л.Ф., Джонс М.Л. Неинвазивные измерения массопереноса в сложных структурах, покрытых биопленкой. Биотехнология и биоинженерия. 2008; 101: 602–608. pmid: 18727130
35. Вагнер М., Манц Б., Фольке Ф., Ной Т. Р., Хорн Х. Онлайн-оценка развития биопленки, шелушения и принудительного отслоения в трубчатом реакторе с помощью магнитно-резонансной микроскопии. Биотехнология и биоинженерия. 2010; 107: 172–181. pmid: 20506514
36.Фогт С.Дж., Сандерлин А.Б., Сеймур Д.Д., Кодд С.Л. Проницаемость растущей биопленки в потоке жидкости в пористой среде проанализирована с помощью корреляций магнитно-резонансного смещения и релаксации. Биотехнология и биоинженерия. 2013; 110: 1366–1375. pmid: 23239390
37. Вильденшильд Д., Ваз CMP, Риверс М.Л., Рикард Д., Кристенсен БСБ. Использование рентгеновской компьютерной томографии в гидрологии: системы, разрешения и ограничения. Журнал гидрологии. 2002; 267: 285–297.
38. Вильденшильд Д., Шеппард А.П.Рентгеновские изображения и методы анализа для количественной оценки структуры и процессов в масштабе пор в подповерхностных системах пористой среды. Достижения в области водных ресурсов. 2013; 51: 217–246.
39. Davit Y, Iltis G, Debenest G, Veran-Tissoires S, Wildenschild D, Gerino M и др. Визуализация биопленки в пористой среде с помощью компьютерной рентгеновской микротомографии. Журнал микроскопии. 2011; 242: 15–25. pmid: 21118226
40. Илтис Г.К., Армстронг Р.Т., Янсик Д.П., Вуд Б.Д., Вильденшильд Д.Визуализация архитектуры биопленки в пористой среде с помощью рентгеновской компьютерной микротомографии на основе синхротрона. Исследование водных ресурсов. 2011; 47: W02601.
41. Rolland du Roscoat S, Martins JMF, Séchet P, Vince E, Latil P, Geindreau C. Применение синхротронной рентгеновской микротомографии для визуализации трехмерной микроструктуры бактериальных биопленок в пористой среде. Биотехнология и биоинженерия. 2014; 111: 1265–1271. pmid: 24293082
42. Иванкович Т., Роллан дю Роско С., Гендро С., Сешет П., Хуанг З., Мартинс Дж.М.Ф.Разработка и оценка экспериментального протокола для трехмерной визуализации и характеристики структуры бактериальных биопленок в пористых средах с использованием лабораторной рентгеновской томографии. Биообрастание. 2016; 32: 1235–1244. pmid: 27827532
43. Пешинска М., Трикозко А., Илтис Г., Шлютер С., Вильденшильд Д. Рост биопленок в пористой среде: эксперименты, компьютерное моделирование в масштабе пор и апскейлинг. Достижения в области водных ресурсов. 2015; 95: 288–301
44. Стодли П., ДеБир Д., Левандовски З.Течение жидкости в биопленочных системах. Прикладная и экологическая микробиология. 1994; 60: 2711–2716. pmid: 16349345
45. Blauert F, Horn H, Wagner M. Измерения деформации биопленок с временным разрешением с использованием оптической когерентной томографии. Биотехнология и биоинженерия. 2015; 112: 1893–1905. pmid: 25786671
46. Möhle RB, Langemann T., Haesner M, Augustin W, Scholl S, Neu TR, et al. Структура и сопротивление сдвигу микробных биопленок, определенные с помощью конфокальной лазерной сканирующей микроскопии и гидродинамического измерения с использованием нового реактора биопленки с вращающимся диском.Биотехнология и биоинженерия. 2007. 98: 747–755. pmid: 17421046
47. Ли Л., Бенсон СН, Лоусон Э.М. Влияние минерального загрязнения на гидравлическое поведение проницаемых реактивных барьеров. Подземные воды. 2005. 43: 582–596.
48. Anderson RT, Vrionis HA, Ortiz-Bernad I., Resch CT, Long PE, Dayvault R, et al. Стимулирование активности видов Geobacter in situ для удаления урана из подземных вод водоносного горизонта, загрязненного ураном. Прикладная и экологическая микробиология.2003; 69: 5884–5891. pmid: 14532040
49. Omoregie EO, Couture RM, Van Cappellen P, Corkhill CL, Charnock JM, Polya DA и др. Биоремедиация мышьяка биогенными оксидами и сульфидами железа. Прикладная и экологическая микробиология. 2013. 79: 4325–4335. pmid: 23666325
50. Беннер С.Г., Блоуес Д.В., Птачек С.Дж., Майер К.Ю. Скорость восстановления сульфата и осаждения сульфида металла в проницаемом реакционном барьере. Прикладная геохимия. 2002; 17: 301–320.
51.Тейшейра С., Виейра М.Н., Маркес Дж. Э., Перейра Р. Биоремедиация богатых железом сточных вод рудников с помощью лемны минор. Международный журнал фиторемедиации. 2014; 16: 1228–1240. pmid: 24933914
52. Weiner ER. В: Применение химии водных организмов окружающей среды. CRC Press; 2013. с. 592.
53. Паганин Д. В кн .: Когерентная рентгеновская оптика. Издательство Оксфордского университета; 2006. с. 411.
54. Wilkins SW, E GT, Gao D, Pogany A, Stevenson AW.Фазово-контрастное изображение с использованием жесткого полихроматического рентгеновского излучения. Природа. 1996. 384: 335–338.
55. Белтран М.А., Паганин Д.М., Уэсуги К., Кухня MJ. Двухмерное и трехмерное восстановление фазы рентгеновских лучей многоматериальных объектов с использованием единого расстояния расфокусировки. Оптика Экспресс. 2010. 18: 6423–6436. pmid: 20389666
56. Белтран М.А., Паганин Д.М., Сиу К.К.В., Фура А., Хупер С.Б., Резер Д.Х., Кухня MJ. Интерфейсно-специфическая рентгенофазовая томография сложных биологических органов. Физика в медицине и биологии.2011; 56: 7353–7369. pmid: 22048612
57. Дауни Х., Холден Н., Оттен В., Спайерс А.Дж., Валентайн Т.А., Дюпюи LX. Прозрачная почва для визуализации ризосферы. PLoS ONE. 2012; 7: e44276. pmid: 22984484
58. Хольцнер М., Моралес В.Л., Уиллманн М., Дентц М. Прерывистые лагранжевые скорости и ускорения в трехмерном потоке пористой среды. Physical Review E. 2015; 92: 013015.
59. Plouraboué F, Cloetens P, Fonta C, Steyer A, Lauwers F, Marc-Vergnes JP.Рентгеновская визуализация сосудистой сети высокого разрешения. Журнал микроскопии. 2004. 215: 139–148. pmid: 15315500
60. Фельдкамп Л.А., Дэвис Л.С., Кресс Дж. В.. Практический алгоритм конической балки. Журнал Оптического общества Америки A. 1984; 1: 612–619.
61. Паганин Д., Майо С.К., Гуреев Т.Е., Миллер П.Р., Уилкинс С.В. Одновременное извлечение фазы и амплитуды из одного расфокусированного изображения однородного объекта. Журнал микроскопии. 2002; 206: 33–40. pmid: 12000561
62.Архатари Б.Д., Гейтс В.П., Эштиаги Н., Пил А.Г. Фазово-восстановительная томография при наличии шума. Журнал прикладной физики. 2010; 107: 034904.
63. Burvall A, Lundström U, Takman PAC, Larsson DH и Hertz, Hans M. Восстановление фазы в рентгеновской фазово-контрастной визуализации, подходящей для томографии. Оптика Экспресс. 2011; 19: 10359–10376. pmid: 21643293
64. Гуреев Т.Е., Паганин Д.М., Майерс Г.Р., Нестерец Ю.И., Уилкинс С.В. Фазово-амплитудная компьютерная томография.Письма по прикладной физике. 2006; 89: 034102.
65. Mayo SC, Davis TJ, Gureyev TE, Miller PR, Paganin D, Pogany A, et al. Рентгеновская фазово-контрастная микроскопия и микротомография. Оптика Экспресс. 2003; 11: 2289–2302. pmid: 19471337
66. Майерс Г.Р., Гуреев Т.Е., Паганин Д.М., Майо С.К. Бинарный диссектор: фазоконтрастная томография двух- и трехматериальных объектов из нескольких проекций. Оптика Экспресс. 2008; 16: 10736–10749. pmid: 18607490
67. Каррел М.Хранилище данных Digital Rocks. http://www.dx.doi.org/10.17612/P7Q07W.
68. Leemann A, Loser R, Münch B. Влияние типа цемента на пористость ITZ и стойкость к хлоридам самоуплотняющегося бетона. Цементно-бетонные композиты. 2010. 32: 116–120.
69. Münch B. Empa Пакет подключаемых модулей ImageJ для анализа изображений (EBIPIA). http://wiki.imagej.net/Xlib.
70. Адамс Р., Бишоф Л. Посевной район. IEEE Transactions по анализу шаблонов и машинному анализу.1994; 16: 641–647.
71. Дерлон Н., Массе А., Эскудье Р., Бернет Н., Поль Э. Стратификация в сплоченности биопленок, выращенных в различных условиях окружающей среды. Водные исследования. 2008. 42: 2102–2110. pmid: 18086485
72. Rochex A, Massé A, Escudié R, Godon JJ, Bernet N. Влияние истирания на отслоение биопленки: свидетельство расслоения биопленки. Журнал промышленной микробиологии и биотехнологии. 2009; 36: 467–470.
73. Стодли П., Карго Р., Рупп Дж. К., Уилсон С., Клэппер И.Свойства материала биопленки в связи с явлениями деформации и отслоения, вызванной сдвигом. Журнал промышленной микробиологии и биотехнологии. 2002; 29: 361–367. pmid: 12483479
Инструкция по эксплуатации бортового компьютера ВАЗ. Бортовой компьютер автомобиля — лучший помощник в управлении важными параметрами. Перечень возможных неисправностей и методы устранения
Бортовой компьютер автомобиля или мозг автомобиля является наиболее важным элементом управления и контроля работы всех основных узлов автомобиля.БК ставится сегодня на все современные автомобили. Подробнее о принципе работы и разновидностях вы можете узнать из этого материала.
[Скрыть]
Описание бортового компьютера
Какой бортовой компьютер в машине и какие задачи он выполняет? Для начала разберемся в некоторых теоретических моментах. БК — электронный узел, позволяющий реагировать и управлять разными процессами в работе разных автосистем. То есть благодаря БК водитель всегда сможет получать данные о работе тех или иных компонентов.Что такое бортовой компьютер, мы разобрались, теперь расскажем о его назначении.
Что показывает бортовой компьютер:
прибор показывает расход бензина на разных режимах движения;
позволяет управлять форсунками, а также системой зажигания автомобиля;
производит управление трансмиссией;
может управлять различными дополнительными системами двусторонней связи, например, камерой заднего вида и т.д .;
позволяет определять уровень давления моторной жидкости, температуры антифриза;
регулирует уровень напряжения в электромобиле, контролирует заряд аккумулятора;
если автомобиль оборудован системой климат-контроля, ею управляет БК;
Одна из основных опций — бортовой компьютер для автомобиля позволяет при необходимости считывать коды ошибок и выводить их на дисплей, чтобы водитель мог их расшифровать и узнать, где искать поломку.
Принцип работы
Принцип работы автомобильного БК для карбюраторных двигателей или вариантов впрыска не особо сложен. Устройство подключается к цепочке контроллеров и регуляторов, считывает необходимые данные, после чего обрабатывает полученную информацию. Для обработки используется специальное программное обеспечение. Например, если БК по схеме получает данные о расходе топлива, то программа позволит рассчитать возможный пробег на оставшемся объеме бензина.
Все данные отображаются на экране, установленном в кабине ТС. Сам дисплей может быть цифровым, монохромным, цветным, четырех- или трехзначным. Как показывает практика, монохромного экрана с диагональю 2 дюйма достаточно, чтобы показать водителю более десяти параметров. Более современные варианты БК оснащены жидкокристаллическим экраном большой точности.
Просмотры
На сегодняшний день различают несколько типов БК:
Универсальная версия Такое устройство совмещает в себе различные возможности, дает автовладельцу возможность не только управлять машиной, но и выходить в Интернет.Основное предназначение такого устройства — повышение комфорта автовладельца во время движения. Обычно универсальный бортовой компьютер имеет экран с диагональю 6-14 дюймов, клавиатуру можно подключить к более новым моделям. Следует отметить, что по своей конструкции такие БК очень похожи на обычные компьютерные ПК, но одной из особенностей устройств является низкая степень воспламенения от бортовой сети автомобиля.
Маршрут. Маршрутный бортовой компьютер позволяет определять параметры движения автомобиля, при этом нет необходимости подключать его по GPS к спутнику.Тем не менее, новые модели в любом случае оснащены GPS-приемниками. С помощью этого устройства водитель сможет определить среднюю скорость машины, расход топлива, оставшееся расстояние до той или иной точки, пройденной километрами и т. Д. Кроме того, в зависимости от модели, которую вы устанавливаете в свой автомобиль, устройство может иметь функцию расчета горения при экстренном торможении или быстром разгоне. Обычно БК этого вида устанавливают в щитке управления.
Менеджер и служба БК.Назначение таких компьютеров — определение поломки основных агрегатов автомобиля и предупреждение автовладельца. Как правило, такой БК является составной частью системы управления станком, но в зависимости от модели может быть самостоятельным устройством с обширным функционалом. При проверке автомобиля все комбинации ошибок сохраняются в памяти устройства и будут там до тех пор, пока ошибка не будет исправлена, а память не сброшена (автор видео — канал АвтоГСМ).
Настройка БК
Сделать бортовой компьютер своими руками — задача сложная для выполнения в домашних условиях.Для изготовления устройства понадобится много разных элементов, в том числе дисплей, микросхема, кнопки и т. Д. Сделать компьютер самостоятельно, не имея опыта сборки таких устройств — это невозможно, поэтому если вы хотите, чтобы устройство работало правильно , лучше заказать эту процедуру или купить новый БК.
Если вы решили поставить на свой автомобиль бортовой компьютер для карбюраторных или инжекторных двигателей Вам необходимо знать, как правильно настроить прибор:
При необходимости всегда можно активировать опцию автоматической настройки — тогда прибор сам примет желаемая конфигурация.
Если этот вариант не подходит, то зайдите в меню Настройки — найдите нужный блок и выберите его. Следует отметить, что в этом случае БК должен быть настроен как основное устройство. Одна из важных ролей в настройке определяет выбор режима, за счет которого будут фиксироваться расходы на топливо.
Выставляя этот параметр, у вас есть несколько вариантов. Один из них — линейная зависимость, в этом случае параметр всегда будет зависеть от блока управления. Если вы решили произвести настройку вручную, то для начала нужно составить таблицу расхода топлива.Учитывая эту информацию, БК произведет расчеты и выведет соответствующие параметры на экран.
Кроме того, потребуется определить параметры, которые начнут демонстрировать экран, в зависимости от модели их количество может быть разным. Отдельно выберите параметр, отвечающий за температуру включения вентилятора охлаждения мотора.
Цена вопроса
Минимальная стоимость БК от компании Мультитроникс будет в районе 130 руб.Более дорогие варианты могут стоить 7500 рублей.
Извините, в настоящее время нет доступных опросов.
Видео «Как сделать БК своими руками»
Подробная схема изготовления инструкции представлена на видео (автор — канал LibRal1973).
Компьютер сегодня является обычным устройством, с которым сталкивается большое количество людей дома и в большом количестве автомобилей. Конкретнее говорится о водителях автомобиля, компьютере или, как вы с ним знакомы, бортовой компьютер стал незаменимым для каждого из них, потому что только с ним вы можете взять под контроль работу большинства агрегатов.
Видео о работе нештатного БК на ВАЗ-2114:
Если говорить об автомобилях российского производства, то первенец в семействе АвтоВАЗов именно ВАЗ-2114 был смонтирован бортовой компьютер прямо с завода, который умел оповещать водителя обо всех происходящих событиях, как по дороге так и в салоне. Ниже в этой статье мы подробно разберем, зачем нужен бортовой компьютер, и разберем краткую инструкцию к нему.
Штатное место в панели приборов для бортового компьютера. На фото стоит вилка.
Бортовой компьютер первой версии, устанавливаемый на ВАЗ-2114, даже имел некоторые функции, однако с легкостью следил за основными параметрами автомобиля:
Контроль топлива И его расчет о количестве пройденных километров — эта функция позволяет водителю заранее принять решение о заправке.
Контроль температуры охлаждающей жидкости — Эта функция исключает перегрев двигателя за счет своевременного информирования пользователя.
Диагностика отдельных узлов автомобиля — позволяет с максимальной точностью, а главное мобильностью обнаруживать и устранять возникшие проблемы.
Подробнее о функциях бортового компьютера
Бортовые компьютеры ВАЗ-2114 способны отображать на своем рабочем экране следующую информацию:
Мгновенная производительность двигателя, его обороты, температура, соответствие действительности и средний расход топлива.
Информация о пробеге автомобиля, времени в пути.
Возможность безошибочно считывать ошибки, возникшие в системе, что позволит сразу определить, стоит ли устранять неисправность в автосервисе или можно все исправить своими руками.
Современные бортовые компьютеры типа Multitronics — C340. И его собратья тоже умеют:
Контроль и информирование водителя о следующем техническом осмотре, страхование автомобиля, тем самым функция организатора.
Самостоятельно изменять параметры вентилятора, изменять уведомления о достаточной механизации температуры прогрева.
Есть возможность подключить парктроник.
Обратите внимание, что для активации обеих других расширенных функций в вашем BC может потребоваться прошивка.
Принцип работы БК на ВАЗ-2114
Нестандартный бортовой компьютер
Принцип работы бортового компьютера на первый взгляд покажется примитивным, однако на самом деле это технически сложное устройство, которое одновременно принимает, обрабатывает и при необходимости уведомляет о наличии неисправностей.Функция оповещения происходит на экране специальной пиктограммы и подачи определенного звукового сигнала.
Краткое руководство пользователя
Для всех бортовых компьютеров, поставляемых на ВАЗ-2114, есть свое руководство пользователя, а если его нет в бумажном варианте, то его можно легко найти в Интернете, просто чтобы узнать марку и модель автомобиля. устройство. Несмотря на то, что вариантов и моделей много, базовый функционал у них в принципе схож.
Показания бортового компьютера.
Если вы собираетесь просто купить БК, то вам необходимо знать, подходит ли конкретная модель ЭБУ вашего автомобиля. Как правило, вся информация уже есть у продавца, и сложностей в этом возникнуть не должно.
Лучше, прежде всего, при ознакомлении с бортовым компьютером обратить внимание на символы аварийных команд и визуальные значки, появляющиеся на дисплее.
Обратите внимание на расположение кнопок и правила работы с ними, чтобы оперативно реагировать на изменение параметров в движении (на некоторых моделях БК клавиши могут блокироваться при определенной скорости автомобиля — прим.).
Коды ошибок ВАЗ-2114
Так как ЭБУ на всех ВАЗ-2114 аналогичен или, по крайней мере, похож, то напишите заранее, а уж тем более запоминать их нет никакого смысла, благо некоторые модели способны не только навести экран, но и озвучить все имеющиеся в машине проблемы.
Мост. Лучшим вариантом Определений и определений неисправностей станет распечатанный вариант кодов ошибок на ВАЗ-2114. Вы можете взять их на официальных сайтах заводов производителей БК для ВАЗ-2114, и ниже мы представим вам самые частые ошибки, которые встречаются на «четырнадцатом»:
Коды Описание
0102, 0103 Неправильный контрольный индикатор сигнала массового расхода воздуха.
0112, 0113 Сигнал индикатора температуры воздуха на впуске необходим для замены элемента.
0115-0118 Неправильный сигнал элемента измерения температуры Co. — Требуется замена датчика.
0122, 0123 Помехи или неправильный сигнал индикатора положения дроссельной заслонки — Желательно заменить элемент.
0300 Бортовой компьютер (БК) выявил случайный или многократный проход зажигание — В этом случае автомобиль не может заводиться сразу.
0201 — 0204 Зарегистрирован обрыв в цепи управления форсунками.
0325 На бортовом компьютере зафиксирован кластер в цепи детонационного устройства.
0327, 0328 Поломка датчика детонации необходима для замены прибора.
0480 Неисправен вентилятор охлаждения — нужно заменить элемент.
0505 — 0507 Имеются сбои в работе регулятора холостого хода, которые влияют на количество оборотов (ниже или выше). Если возникает этот код, необходимо заменить регуляторы.
0615-0617 В процессе диагностики выявлены защелки или замыкания в цепи реле стартера.
230 Данный код ошибки означает поломку реле топливного насоса — прибор необходимо как можно скорее заменить.
1602 Это один из наиболее часто встречающихся кодов при диагностике БК на предмет неисправности. Означает пропадание напряжения бортовой сети на электронном блоке Control.
Что делать, если БК перестал работать
Бывает, что БК перестает работать или информация, которую он должен передать и проанализировать, не передается. В первую очередь необходимо обратить внимание на целостность электрической цепи.А именно предохранитель F3 отвечает за его работоспособность, затем проверяет целостность проводов, идущих к блоку диагностики, и обеспечение его питания. Подключить бортовой компьютер к системе ВАЗ-2114 вы можете в этой статье.
Описывать процесс ремонта текущего компьютера бессмысленно, потому что такие устройства не часто ломаются и мало обслуживаются, поэтому имеют технически сложные механизмы, требующие профессиональных инструментов и навыков.
На пассажирах «Десятой семьи» рядом с блоком индикации всегда установлены часы или компьютер.Теперь такие компьютеры называют «бортовыми компьютерами» (БК). Дисплей компьютера при выключенном зажигании показывает время, но это не единственная его функция! Перечислим все возможности бортового компьютера на ВАЗ-2112, и прилагаемая ВАЗ инструкция нам в этом поможет. В инструкции были скопированы таблицы, важные при настройке.
О каком БК идет речь? Ответ виден на видео.
Внешний вид лицевой панели показан на фото ниже.Вам необходимо запомнить основные клавиши: 1, 2, 3 и 5. Все функции разделены на три группы. Нажав кнопку 1, вы можете просмотреть функции первой группы. То же касается и других ключей.
Конюшня БК для хэтчбека Лада-112
Спрашивает, а зачем тебе кнопка 5? Находясь в любой из трех групп, эту кнопку используют дополнительные функции. Кстати, их два.
В каждой группе дополнительные функции различаются.
Пример с прокруткой
При выключении зажигания мы видим часы на дисплее.Попробуем включить зажигание и нажать 1. Саму кнопку можно нажимать сколько угодно раз — функция переключается циклически. Их три.
Группа функций «Время»
Если нужны дополнительные функции, нажмите на кнопку 5. Мы рассмотрели, как использовать штатный бортовой компьютер на ВАЗ-2112, но инструкция подходит для любых «десятков».
Работа БК в разных режимах
Сказано выше как пользоваться БК в «временном» режиме.Группа «Время» первая, но есть еще две — «топливо», «путь». Даем таблицу для них.
Группа функций «Топливо»
Выше приведена таблица для кнопок 2 и 5.
Группа функций «Путь»
Вот функции, включенные в кнопки 3, 5.
Инструкции по программированию
Будем менять разные настройки. А попробуйте включить будильник, изменить яркость подсветки и т. Д. Так, компьютерное программирование на ВАЗ-2112 упоминается еще и.
Настроить датчик уровня топлива
Резервуар сначала остается пустым. Включите функцию «Уровень топлива» (2-5) и нажмите кнопку 4 более двух секунд. Далее выполнить шаги:
Нажмите кнопку 3 на одну секунду, пока не появится звуковой сигнал;
Залейте в бак три литра топлива. Ждем 10-20 секунд и повторяем шаг 1;
Повторяем шаги 1 и 2 до 39 литров прячем.
Мы используем сигнал превышения скорости
Нажатием кнопки 3 включаем функцию «средняя скорость». Щелкаем на кнопке 4.Далее кнопками 5 и 6 устанавливаются нужные числа. В конце нажмите кнопку 4.
Для отключения опции используйте верхнее пороговое значение: 190 или 200 км / ч.
Изменить яркость подсветки
Используем функцию 1-3 «время с остановками». Нажмите кнопку 4. Клавиши 5 и 6 настроены. Нажмите кнопку 4.
Будильник
Перейдите в опцию «Будильник» (дополнительная функция в списке «Часы»). Нажмите кнопку 4.Далее установите значение часов (клавиши 5 и 6), нажмите кнопку 4, установите значение минут (клавиши 5 и 6). При нажатии кнопки 4 включается будильник.
Будильник в машину — вещь нужная
Осталось понять, как выключить будильник. Проделайте все шаги перед установкой значения часов, а затем нажмите кнопку 1. Будильник должен быть выключен!
Как настроить календарь и часы
Мы дошли до самой сложной главы.Сразу переходим к действию:

Для быстрой настройки выполните шаги 1 и 2. Если затем нажать кнопку 1, показания часов округляются: было 13:57 и будет 14:00. Или иначе: было 14:05, будет 14:00.
Наша редакция 2112 с Gamma GF 212 BC. Мы полностью ими довольны.
Самым популярным нестандартным БК на ВАЗ-2110 является модель GAMMA GF 212.
Его стоимость около 2500 рублей . Установка простая, вам просто нужно подключить к K-line диагностическому разъему и вывести провод питания.
Есть такие полезные функции, как задувание свечей и так далее. Мы можем только рекомендовать его среди большого набора моделей, представленных на рынке.
Очень удачно подвернулся МК 2114-3857010 за 300 руб 😉
Так как давно хотел поставить бортовик, но цены на него мягко говоря кусаются — взял не задумываясь! 😊
Мясорубка обладает всеми необходимыми основными функциями.
Подсветка дисплея и подписи кнопок выполнена в традиционном стиле вазовой шкалы — зелено-желтым.При нажатии на кнопки МК начинает издавать звуки … Бееее … 😥
Так как старый хозяин был не особо разговорчив и толком не объяснял, что это за МК, я стал искать инструкцию к этому чуду техники . Самое смешное, что приюта нет. Есть записи о том, как кто-то покупал и ставил те же МС и ТП, но нет инструкции.
После того как я сбросил МК по старому хозяину, более-менее разобрался с функционалом:
МК сбрасывается парсингом и вытаскиванием батареи
При первом подключении к трапезе МК приветствует проигрывание миди мелодий — а-ля старая Nokia- кирпич.))))
Итак, кнопки слева направо:
1 COINT T.
1.1. Время в пути без остановок. Вставляет бой при включенном МК. Сбросить можно долго, нажав старт,
1.2. Общее время в пути для всех поездок
Если нажать на пуск, можно установить яркость подсветки — клавиши плюс и минус. Выберите значение от 0 до 100%
2. Кнопка KM / H
2.1. Средняя скорость в пути
Нажатие на пуск в этом меню включает отключение предупреждения.(Не понял что за алерт)
2.2. Средняя скорость за все время
Если нажать на пуск в меню 2.2, можно поставить ограничение скорости, например на 120 км МК начинает удалять
3. Кнопка КМ
3.1. Километр
3.2. Сколько километров вы можете проехать до следующей заправки
4. Кнопка L.
4.1. Количество литров в баке — после обнуления еще не активен. Скорее всего будет отображаться, сколько литров было залито за все время
4.2. Израсходовано с последней заправки
5. Кнопка L / 100
5.1. Расход топлива на 100 км
7. Н. кнопка
7.1. Часы. Выставляется нажатием start, потом плюс-минус
7.2. Дата и месяц. Выставляется так же, как часы
7.3. Будильник. Ставлю тот же
В планах сделать пересвет с зелено-желтым на белый или красный с перевернутым экраном.
Обеспечить этот МК — вроде бы проблематично, ведь снимет дисплей это целая история.
Сегодня компьютер представляет собой обычное устройство, с которым сталкивается большое количество людей как дома, так и в большом количестве транспортных средств.Конкретнее говорится о водителях автомобиля, компьютере или, как вы с ним знакомы, бортовой компьютер стал незаменимым для каждого из них, потому что только с ним вы можете взять под контроль работу большинства агрегатов.
Видео о работе ненормального БК на ВАЗ-2114:
Если говорить об автомобилях российского производства, то первенец в семействе АвтоВАЗ, именно ВАЗ-2114 был установлен на бортовой компьютер. прямо с завода, который смог уведомить водителя обо всех происходящих событиях, как за пределами пути, так и в салоне.Ниже в этой статье мы подробно разберем, зачем нужен бортовой компьютер, и разберем краткую инструкцию к нему.
Причины установки БК в автомобиль
Стандартное место в панели приборов для бортового компьютера. На фото стоит вилка.
Бортовой компьютер первой версии, установленный на ВАЗ-2114, даже имел некоторые функции, однако с легкостью следил за основными параметрами автомобиля:
Контроль топлива И его расчет про количество километров прошлое — эта функция позволяет водителю заранее принять решение о заправке.
Контроль температуры охлаждающей жидкости — Эта функция исключает перегрев двигателя из-за своевременного информирования пользователя.
Диагностика индивидуальных жилетов автомобиля — позволяет с максимальной точностью, а главное мобильностью обнаруживать и устранять возникшие проблемы.
Узнать больше о функциях бортового компьютера
Бортовые компьютеры ВАЗ-2114 могут отображать на своем рабочем экране следующую информацию:
Мгновенная производительность двигателя, его обороты, температура, соответствие действительности и средний расход топлива.
Информация о пробеге автомобиля, времени в пути.
Возможность безошибочно считывать ошибки, возникшие в системе, что позволит сразу определить, стоит ли устранять неисправность в автосервисе или можно все исправить своими руками.
Современные бортовые компьютеры типа Multitronics — C340. И его аналоги тоже умеют:
Контроль и информирование водителя о следующем техническом осмотре, страхование автомобиля, тем самым функция организатора.
Самостоятельно изменить параметры вентилятора, изменить уведомления о достаточной механизации температуры прогрева.
Есть возможность подключения парктроника.
Обратите внимание, что для активации обеих других расширенных функций в вашем BC может потребоваться прошивка.
Принцип работы БК на ВАЗ-2114
Нестандартный бортовой компьютер
Принцип работы бортового компьютера на первый взгляд покажется примитивным, однако на самом деле это технически сложное устройство, которое одновременно принимает, обрабатывает и при необходимости уведомляет о наличии неисправностей.Функция оповещения происходит на экране специальной пиктограммы и подачи определенного звукового сигнала.
Краткое руководство пользователя
Для всех бортовых компьютеров, поставляемых на ВАЗ-2114, есть свое руководство пользователя, а если оно В бумажном варианте его нет, его можно легко найти в Интернете, достаточно лишь узнать марку и модель устройства. Несмотря на то, что вариантов и моделей много, базовый функционал у них в принципе схож.
Показания бортового компьютера.
Если вы собираетесь просто купить БК, то вам необходимо знать, подходит ли конкретная модель к ЭБУ вашего автомобиля. Как правило, вся информация уже есть у продавца, и сложностей в этом возникнуть не должно.
Лучше, прежде всего, при ознакомлении с бортовым компьютером обратить внимание на символы аварийных команд и визуальные значки, появляющиеся на дисплее.
Обратите внимание на расположение кнопок и правила работы с ними, чтобы оперативно реагировать на изменение параметров в движении (на некоторых моделях БК клавиши могут блокироваться при определенной скорости автомобиля — прим.).
Коды ошибок ВАЗ-2114
Так как ЭБУ на всех ВАЗ-2114 похож или, по крайней мере, похож, то напишите заранее, а уж тем более запоминать их нет смысла, благо некоторым модели способны не только вывести его на экран, но и озвучить все имеющиеся в автомобиле проблемы.
Лучшим вариантом определения и уточнения неисправностей будет распечатанный вариант кодов ошибок на ВАЗ-2114. Вы можете взять их на официальных сайтах заводов производителей БК для ВАЗ-2114, и ниже мы представим вам самые частые ошибки, которые встречаются на «четырнадцатом»:
Код Описание 0102, 0103 Неправильный уровень сигнала индикатора контроля воздушного потока. 0112, 0113 Сигнал индикатора температуры воздуха на впуске необходим для замены элемента. 0115–0118 Неверный сигнал элемента измерения температуры Co. — Требуется замена датчика. 0122, 0123 Помехи или некорректный сигнал контрольного индикатора положения дроссельной заслонки — элемент желательно заменить. 0300 Бортовой компьютер (БК) выявил случайные или множественные проходы зажигания — в этом случае автомобиль не может заводиться сразу. 0201–0204 Зарегистрирован обрыв в цепи управления форсунками. 0325 На бортовом компьютере зафиксирован кластер в цепи детонационного устройства. 0327, 0328 Поломка датчика детонации необходима для замены прибора. 0480 Неисправен вентилятор охлаждения — нужно заменить элемент. 0505–0507 Имеются сбои в работе регулятора холостого хода, влияющие на количество оборотов (ниже или выше). Если возникает этот код, необходимо заменить регуляторы. 0615–0617 В процессе диагностики выявлены защелки или замыкания в цепи реле стартера. 230 Данный код ошибки означает поломку реле топливного насоса — прибор необходимо как можно скорее заменить. 1602 Это один из наиболее часто встречающихся кодов при диагностике БК на предмет неисправности. Означает исчезновение напряжения бортовой сети на электронном блоке управления.
Что делать, если БК перестал работать
Случается, что БК перестает работать или информация, которую он должен передать и проанализировать, не передается. В первую очередь необходимо обратить внимание на целостность электрической цепи.А именно предохранитель F3 отвечает за его работоспособность, затем проверяет целостность проводов, идущих к блоку диагностики, и обеспечение его питания. Подключить бортовой компьютер к системе ВАЗ-2114 вы можете в этой статье.
Описывать процесс ремонта текущего компьютера бессмысленно, потому что такие устройства не часто ломаются и мало обслуживаются, поэтому имеют технически сложные механизмы, требующие профессиональных инструментов и навыков.
Начнем с того, что установить бортовой компьютер в штатное место на ВАЗ 2114 и другие модели Самар не так уж и сложно.В установке бортового компьютера в принципе нет жгутов с проводами и гайками (если, конечно, к вам в машине никто не пробовал и ничего не менял). Знающий человек настроит вам бортовой компьютер на какие-то 2 минуты, так что не стоит бояться рук на ногах и вперед с песней =).
Зачем вам бортовой компьютер?
В прошлых статьях мы уже говорили, что такое бортовой компьютер, для чего он нужен и какие они бывают.Но позволю себе повторить, чтобы вы четко осознавали все преимущества существования побочного компьютера, и потребителей, наверное, нет, разве что трата денег на покупку и все.
Возьмем, к примеру, бортовой компьютер Staff 115 × 24. Имея эту модель в наличии, вы можете:
установить температуру запуска вентилятора радиатора; Эта функция очень пригодится, например, зимой. В то время, когда можно контролировать температуру охлаждающей жидкости, тем самым следить за температурой радиатора печки.
очень помогает функция сушки и подогрева свечей перед запуском двигателя.
функция сброса настроек и органов управления ЭБУ нужна для перехода на бензин с более высоким или низким октановым числом (от 92 до 95 и наоборот), эта функция нужна для сброса настроек после долгой поездки с повышенная нагрузка на двигатель.
Возможность считывания ошибок позволяет следить за состоянием автомобиля, вовремя менять неработающие датчики, элементы.
Инструкция по установке бортового компьютера
В этой статье мы рассмотрим процесс установки дополнительного компьютера Prestige с функцией диагностики и чтения ошибок.
Для работы нам потребуется:
Отвертки
бортовой компьютер,
провод длиной 1М.
Снимаем заглушку на центральной торпеде и ищем в ней 9-контактную колодку проводов. Эта обувь должна быть на всех автомобилях нашей модели.Осталось только подключить блок к компьютеру и все, а нам нужно провести линию.
Как провести линию?
Берем наш провод и устанавливаем во второй контакт нашей колодки.
Противоположный конец провода закидываем под панель приборов внизу к диагностической площадке (для удобства можно отписать правую боковую панель).
Перерезав провод к диагностической колодке, подключите его к разъему «М», если у вас колодка Евро-2 или в 7 розетку, если у вас колодка Евро-3 (очень часто бывает, что диагностическая колодка на Евро-3 устанавливается на авто ноги вверх, считайте)
Теперь подключите бортовой компьютер, вставьте в штатное место и проверьте.
Для более полного и наглядного представления работы представлена схема.
Что делать, если под панелью приборов нет колодок для бортового компьютера?
В этом случае остается только собрать новый блок: купить 9-контактный блок и отнести к нему по следующей схеме:
Сигнал расхода топлива (зеленый провод)
зажигание (оранжевый провод )
+ 12 вольт (красный / белый провод) красный провод с белой полосой
масса (черный)
датчик скорости (коричневый провод)
6k-line (чаще всего серый или черный провод)
немой (зеленый / красный провод) Зеленый провод с красной полосой
подсветка (белый провод, или можно взять из кнопки габаритов)
датчик уровня топлива (розовый)
Ошибки при подключении / работе бортового компьютера
Ошибка: «Нет связи с контроллером» или «кластер в линию».
Эта ошибка указывает на то, что линейный выход не подключен или произошел контакт. Проверить провод по схеме, описанной выше. Скорее всего слетел контакт с диагностической колодкой.
Ошибка: неверные показания датчика температуры прямоугольной формы.
Если у вас температура за бортом -40, это говорит о том, что обрыв провода произошел на датчике температуры, либо такого датчика нет вообще. Если температура например -25, а на улице только -10, то датчик нужно заменить на добро.
Кстати, часто бывает, что бортовой компьютер подает совершенно необоснованный сигнал опасности. Причиной тому может быть некорректно работающий процессор бортового компьютера или какой-то датчик. Помните, от ошибок электроники никто не застрахован. Тем не менее в подавляющем большинстве случаев бортовой компьютер ВАЗ-2115 работает вполне нормально.
Представляем вашему вниманию наиболее частые коды ошибок с их расшифровкой:
2 — превышено напряжение бортовой сети;
3 — Датчик уровня топлива неисправен;
4 — неисправен датчик, отвечающий за температуру мотора;
5 — Датчик температуры воздуха Наружный передает предупреждающие сигналы;
6 — перегрев мотора;
7 — в системе смазки автомобиля наблюдается очень низкое давление;
8 — обнаружены проблемы в тормозной системе;
9 — Низкий заряд аккумулятора.
Если во время движения на бортовом компьютере автомобиля появились цифры 4, 6 или 8, его следует немедленно остановить, устранив проблему, и только после этого продолжить движение. Но после этого потребуется перезагрузить процессор. Вы можете сбросить ошибку, просто удерживая нажатой кнопку ежедневного пробега в течение нескольких секунд.
Что делать, если на ВАЗ-2115 перестал работать бортовой компьютер

Иногда бывает, что при полном состоянии автомобиля бортовой компьютер полностью отказывается работать.Как поступить в этом случае?
Конечно, можно попробовать устранить проблему самостоятельно. Но все же намного лучше, если этот специалист состоится. Именно он может достоверно определить причину неисправности устройства.
Но прежде чем идти в сервисный центр, первое, что нужно сделать, это проверить предохранитель F3, который он мог просто повернуть обратно. Устанавливается в цепочку питания процессора ВАЗ-2115. Если после замены предохранителя бортовой компьютер в дальнейшем не подает признаков жизни, можно также проверить разъемы для его подключения.Повторяю: если вы не электрик и совсем не разбираетесь в электронике, эту задачу стоит поручить профессионалу.
Помните, любую неисправность, которую показывает бортовой компьютер, можно устранить, как и поломку боковой части бортового компьютера. Но, как говорится, лучше проблему предотвратить, чем потом решать. Поэтому каждую машину нужно содержать в исправном состоянии, вовремя проходить техосмотр и заменять вышедшие из строя запчасти.Помимо прочего, лучше вообще не допускать поломки деталей, а заменять их по мере износа. Только в этом случае управление автомобилем будет безопасным с технической точки зрения, и во время поездки не возникнет нештатных ситуаций, связанных с неправильной эксплуатацией автомобиля.
Накорми свой автомобиль — гарантия безопасности как водителя, так и пассажиров.
Бортовых компьютеров на ВАЗ-2110. Подключение бортового компьютера ВАЗ-2110: инструкция
С помощью бортовых компьютеров на ВАЗ-2110 можно получить полное представление о двигателе.С его помощью считываются и отображаются данные с датчиков. Облегчается вождение, водитель в любой момент может узнать о расходе топлива, напряжении в бортовой сети, оборотах двигателя, наличии ошибок. Но у любого, даже самого дорогого и продвинутого бортового компьютера есть свои плюсы и минусы.
Преимущества инжекторных двигателей
Конструкции двигателей аналогичны, существенно отличаются только следующие системы:
Впрыск топливной смеси.
Зажигание.
Управление двигателем.
Основные преимущества двигателей форсунок:
При появлении неисправностей диагностические приборы укажут точный диагноз за считанные минуты. В редких случаях возникает необходимость сдать автомобиль в сервис для ремонта.
Идеально работает на холостом ходу при условии стабильной работы всех датчиков. Зимой запуск двигателя намного проще.
Расход топлива (правда, в зависимости от прошивки) значительно меньше, чем у карбюраторных двигателей.
Системы впрыска практически не требуют вмешательства. Датчики и исполнительные механизмы выходят из строя редко.
Стоимость запчастей намного выше, чем у карбюраторных двигателей. Но и ломаются они реже. Если форсунка новая или только что проходила техобслуживание, то при правильной эксплуатации прослужит без поломок несколько лет. При выходе из строя датчиков их заменяют через несколько минут. А некоторые устройства подлежат ремонту.
Недостатки систем впрыска
Среди отрицательных качеств можно выделить следующие:
Бортовой компьютер «Государственный» ВАЗ-2110 выдает полную информацию, но воспринимать ее неудобно.Дисплей расположен сбоку, под магнитолой. Поэтому для того, чтобы учесть какие-либо данные, необходимо будет остановиться.
Очень дорогой катализатор, находится буквально в 10 см от проезжей части, легко повреждается. Ремонт не всегда возможен, но стоимость очень высока. В случае поломки увеличится не только расход топлива, но и уровень СО в выхлопе.
Изначально на двигатели «десятки» устанавливались только карбюраторы. Позже двигатели заточили под установку систем впрыска.Поэтому демонтировать некоторые датчики и устройства проблематично из-за их неудобного расположения.
Эксплуатация инжекторных автомобилей
Необходимо соблюдать требования, облегчающие эксплуатацию автомобиля. Чтобы бортовой компьютер «Штаб» ВАЗ-2110 как можно реже выдавал ошибки, а для повышения комфорта всегда следует придерживаться следующих рекомендаций:
Выполните звукоизоляцию — это избавит от лишнего шума.Например, топливный насос работает довольно громко. И это может доставить неудобства.
Обязательно обработать все элементы кузова антикоррозийными составами.
Заправку автомобиля следует проводить только рекомендованными марками топлива. Если заливать низкооктановый бензин, работа двигателя будет нарушена.
Своевременное обслуживание решит любые проблемы, касающиеся эксплуатации мотора.
Преимущества использования бортовых компьютеров
На автомобилях бортовой компьютер ВАЗ-2110 (инструкция прилагается к устройству) имеет несколько функций:
Визуальное оповещение о текущем и среднем расходе топлива.
Точный тахометр и вольтметр.
Есть функция, позволяющая напомнить о плановой замене масла.
Бортовые компьютеры могут уведомить водителя о таких проблемах:
Загорается лампа, сигнализирующая о неисправности мотора. Если мотор работает нормально и симптомов нет, то, скорее всего, неисправна цепь питания самой лампы.
Чрезмерный расход бензина. В некоторых случаях значение превышает 12 л / 100 км.Поможет полная диагностика системы впрыска и перепрошивка контроллера электронного блока управления.
Электрические соединения
На этапе подготовки необходимо выполнить следующие действия:
Отсоединить отрицательную клемму от аккумулятора.
Подключение бортового компьютера ВАЗ-2110 производится к блоку сигнализации. Найдите и расставьте как можно удобнее.
Вам нужно сначала найти оранжевый провод (в седьмом контакте).
Подключите его к проводу красно-белого цвета, который находится в жгуте, соединяющем компьютер.
К красно-черному проводу, установленному в десятом контакте, подключить красный из жгута, идущего от бортового компьютера.
А красный на туфле связан с красно-черным, идущим из связки BC.
На пятом контакте найдите черный провод. И подключаешь его к такому же от БК.
На восьмой контакт устанавливается белый провод, который подключается к тому же проводу, что идет к БК.
Окончательная установка
Убедитесь, что все электрические соединения надежно выполнены. Провода желательно зацепить, потом заизолировать. Ремень протягивается через внутреннее пространство консоли к месту крепления КП. После этого можно подключиться к проводке от датчика уровня топлива в баке.
После демонтажа приборной панели вы получите доступ к электрическому подключению. С серой накладки нужно снять розовую проволоку, она в жгуте.Подключаем к бортовому компьютеру. Чтобы проверить прибор, подключите отрицательную клемму и включите зажигание.
Типы бортовых компьютеров
Типов бортовых компьютеров ВАЗ-2110 довольно много. Цена на все устройства разная — от 1200 рублей до 20 тысяч. Все зависит от типа и производителя. Например, устройства, которые устанавливаются на штатные места, имеют невысокую стоимость, ими не очень удобно пользоваться. Но есть бортовые компьютеры, которые ставят вместо штатной приборной панели.Большой выбор приборов, разнообразие цветовых схем, раскладки дисплея и т.д.
К этим приборам относятся бортовые компьютеры ВАЗ-2110 «Гамма», «Мультитроникс». Но и цена у них большая — более 10 000 руб. Установка такого устройства в сервисном центре обойдется еще в половину стоимости. Но всю работу можно проделать самостоятельно, если вы умеете читать схемы и понимать их. Но главное, что для удобства использования необходимо откалибровать датчики.
Как откалибровать ТУ на стандартном БК
Важным параметром является уровень топлива в баке. Чтобы датчик работал правильно, необходимо его откалибровать. Для этого:
Полностью опорожните топливный бак.
Перейти в режим выбора топлива. Для этого нажмите и удерживайте первую верхнюю кнопку в правом ряду. На дисплее отобразится «0».
Для перехода в режим тарирования необходимо нажать и удерживать кнопку, на которой отображается автомобиль.Бортовой компьютер на ВАЗ-2110 подаст короткий сигнал.
Залейте в топливный бак 3 литра бензина.
Через несколько секунд снова нажмите и удерживайте кнопку. На дисплее бортового компьютера должно быть указано, что в баке 3 литра топлива.
Наполняйте бак постепенно и после каждого добавления нажимайте кнопку.
После максимального заполнения бортовой компьютер выключается — на этом тарирование окончено.
Для установки бортового компьютера ВАЗ-2110 он уведомил вас о превышении предельно допустимой скорости, также необходимо провести «тренировку».

Коды	Описание
0102, 0103	Неправильный контрольный индикатор сигнала массового расхода воздуха.
0112, 0113	Сигнал индикатора температуры воздуха на впуске необходим для замены элемента.
0115-0118	Неправильный сигнал элемента измерения температуры Co. — Требуется замена датчика.
0122, 0123	Помехи или неправильный сигнал индикатора положения дроссельной заслонки — Желательно заменить элемент.
0300	Бортовой компьютер (БК) выявил случайный или многократный проход зажигание — В этом случае автомобиль не может заводиться сразу.
0201 — 0204	Зарегистрирован обрыв в цепи управления форсунками.
0325	На бортовом компьютере зафиксирован кластер в цепи детонационного устройства.
0327, 0328	Поломка датчика детонации необходима для замены прибора.
0480	Неисправен вентилятор охлаждения — нужно заменить элемент.
0505 — 0507	Имеются сбои в работе регулятора холостого хода, которые влияют на количество оборотов (ниже или выше). Если возникает этот код, необходимо заменить регуляторы.
0615-0617	В процессе диагностики выявлены защелки или замыкания в цепи реле стартера.
230	Данный код ошибки означает поломку реле топливного насоса — прибор необходимо как можно скорее заменить.
1602	Это один из наиболее часто встречающихся кодов при диагностике БК на предмет неисправности. Означает пропадание напряжения бортовой сети на электронном блоке Control.

Как настроить штатный бортовой компьютер ваз 2114

Настройка бортового компьютера ваз 2114 мультитроникс – АвтоТоп

Предназначение Бортового Компьютера

Отличия БК от панели управления

Подключение Бортового Компьютера

Если нет колодки в бортовом компьютере

Смотрите также

АвтоНовости / Обзоры / Тесты

Как Настроить Бортовой Компьютер На Ваз 2114

Бортовой компьютер ваз 2114

Сброс Ошибок Ваз 2115 двигатель ожил

Проблемы с бортовым компьютером Multitronics x115 | Автор темы: Manfred

Тюнинг ВАЗ 2114 – устанавливаем полноценный компьютер. Подробно про бортовой компьютер для ВАЗ 2114 .

Multitronics.ua | Автор темы: Servanne

инструкция по эксплуатации, как подключить и настроить БК

Функциональное предназначение устройства

Рекомендации по монтажу

Ликвидация неисправностей БК

Как настроить бортовой компьютер ВАЗ 2115: советы по подключению

Общие принципы подключения компьютера

Пошаговая установка компьютера на ВАЗ-2115

Какими возможностями должен обладать бортовой компьютер

Аварийный сигнализатор – практично или нет

Установка бортового компьютера – формат Сигма

Навигация по записям

1. Введение

3. Обсуждение

5. Материалы и методы

5.1. Эксперименты на животных

5.2. Рекомбинантная экспрессия белков CPE и слитого белка GST-Claudin-4

5.3. Получение моноклональных антител

5.4. Непрямой ELISA

5.5. Сэндвич-ELISA на основе антител и рецепторов

5,6. Измерения поверхностного плазмонного резонанса (SPR): кинетика связывания

5,7. Измерения SPR: Объединение эпитопов

5.8. SDS-PAGE и вестерн-блоттинг.

5,9. Нейтрализация CPE в клеточном анализе цитотоксичности

5.10. Обнаружение на месте на основе платформы электрохимического биочипа (pBDi)

5.11. Приготовление образцов фекалий с добавками

5.12. Приготовление супернатантов из бульонных культур

5.13. Токсинотипирование генов с помощью qPCR

Комбинация неразрушающего контрастного вещества с инструментами фазово-контрастной визуализации на основе распространения

Abstract

Введение

Материалы и методы

Пористые среды и культивирование биопленок

Контрастные вещества

Рентгеновские снимки

Анализ изображений

Предварительная обработка изображений с помощью лоренцевского фильтра.

Сегментация.

Регистрация двух разных наборов данных.

Результаты

Обсуждение

Заключение

Благодарности

Ссылки

Описание бортового компьютера

Принцип работы

Просмотры

Настройка БК

Цена вопроса

Видео «Как сделать БК своими руками»

Подробнее о функциях бортового компьютера

Принцип работы БК на ВАЗ-2114

Краткое руководство пользователя

Коды ошибок ВАЗ-2114

Что делать, если БК перестал работать

Пример с прокруткой

Работа БК в разных режимах

Инструкции по программированию

Настроить датчик уровня топлива

Мы используем сигнал превышения скорости

Изменить яркость подсветки

Будильник

Как настроить календарь и часы

Причины установки БК в автомобиль

Узнать больше о функциях бортового компьютера

Принцип работы БК на ВАЗ-2114

Краткое руководство пользователя