Работа в Казани, поиск персонала и публикация вакансий
Работа в Казани — это большой выбор открытых позиций в различных отраслях деятельности: от сотрудников сферы обслуживания до руководящих должностей в крупных компаниях.
Большинство соискателей в Казани можно условно разделить на четыре группы. Первая — вчерашние выпускники учебных заведений без опыта работы; вторая — специалисты, которые хотят переквалифицироваться; третья — сотрудники, оказавшиеся в карьерном тупике; четвертая — соискатели, основной целью которых является материальный заработок.
Показать полностью
Первая категория более свободна в своем выборе: они ориентируются в первую очередь на собственные устремления. Главный враг таких соискателей — завышенная самооценка и амбиции. Однако стоит подойти к выбору работы без юношеского максимализма — и нужная вакансия найдется быстро. Вторая категория — люди, решившие в корне изменить вид деятельности. Часто это связано с тем, что предыдущий опыт работ их не устраивал. Рекрутеры советуют таким соискателям больше ориентироваться на психологическую предрасположенность. Если уж вы начинаете с нуля — делайте это на любимом поприще.
К третьей группе соискателей относятся специалисты, которые многого добились и обнаружили, что на старом месте рост просто невозможен. Нередко они ищут работу, еще не уволившись, и получают выгодные предложения заранее. В четвертой категории — соискатели, основной целью которых является материальный заработок, а профессиональный статус стоит у них на втором месте. Рынок труда изобилует предложениями для данной категории.
Независимо от того, к какой группе соискателей вы относитесь, с помощью сервисов HeadHunter вы без труда отыщете предложение о работе, удовлетворяющее вашим потребностям.
Удобный поиск, система уведомлений и рассылки позволяют сократить время и силы, которые обычно уходят на выбор подходящей вакансии. Первый шаг к карьере — заполните форму резюме и разместите его. Затем просто откликайтесь на вакансии интересных компаний и получайте приглашения от работодателей. Нет времени следить за появлением новых предложений на сайте? Используйте сервис рассылки и уведомлений. Система сама присылает информацию о подходящих вакансиях и работе в Казани на вашу электронную почту, что существенно экономит время.
Большинство услуг для соискателя абсолютно бесплатны. Обновления происходят регулярно, превращая поиск работы в увлекательное времяпровождение.
Google закрыл возможность монетизации видеоконтента с отрицанием изменений климата
Google объявил о запрете на рекламу и монетизацию контента, который отрицает изменения климата в результате деятельности человека и выбросов в атмосферу. Новая политика будет распространяться на рекламодателей, а также издателей и авторов контента на видеохостинге YouTube (сервис принадлежит Google), говорится в анонсе изменений, сделанном командой Google Ads.
В описании обновления отмечается, что оно является продолжением пересмотра политики в области рекламы и монетизации, который призван «обеспечить безопасную среду для рекламных партнеров и лучше защитить пользователей от ненадежных заявлений». Команда Google Ads указывает, что под запрет попадут реклама и монетизация контента, «противоречащего устоявшемуся научному консенсусу относительно существования и причин изменения климата». Это, по словам представителей интернет-компании, контент, в котором изменения климата подаются как мистификация или мошенничество, а также утверждения, отрицающие глобальное потепление и его причины — выбросы парниковых газов и деятельность человека.
Для контроля и обеспечения новой политики Google будет использовать сочетание автоматизированных инструментов и человеческих проверок. «При оценке контента в соответствии с новой политикой мы внимательно рассмотрим контекст, в котором делаются заявления, проводя различие между контентом, который содержит ложное утверждение как факт, и контентом, который сообщает или обсуждает это утверждение», — говорится в заявлении Google. Новая политика не затронет рекламу материалов и событий климатической повестки, в том числе публичных обсуждений климатической политики, исследований и тому подобного.
Реклама на Forbes
В среду, 6 октября поисковый гигант анонсировал набор новых функций, которые, по мнению компании, помогут людям, использующим платформы Google, cделать более устойчивым выбор в пользу сокращения углеродного следа. Новые функции доступны в поиске и других сервисах компании (карты, путешествия и др.). До конца октября Google планирует изменить способ отображения результатов запросов про изменение климата в своей поисковой платформе. По данным Google, пользователи перейдут на специальную страницу результатов с «высококачественной информацией, связанной с климатом». Компания планирует получать материалы от авторитетов по этому вопросу, включая Организацию Объединенных Наций.
В конце сентября YouTube заявил , что он не допустит на своей платформе видео, в которых утверждается, что вакцины, одобренные органами здравоохранения, опасны или не работают. Новая политика площадки блокирует дезинформацию о всех сертифицированных вакцинах, включая прививки от гриппа, вакцину против кори, эпидемического паротита и краснухи (MMR).
Самый большой финансовый супермаркет в России Банки.ру — самый большой финансовый супермаркет в России (на основе исследования ООО «Тибурон», июнь 2021 г. и АО «ИОМ Анкетолог», август 2021 г.). Более 11 млн человек ежемесячно пользуются нашими онлайн-сервисами по подбору и оформлению кредитов, вкладов, ипотеки, полисов ОСАГО и других финансовых продуктов, читают новости и аналитику от экспертов Банки.ру. Более 1 млн реальных отзывов оставили наши пользователи в «Народном рейтинге», который помогает получить обратную связь о работе банка/страховой компании и решить свою проблему. Мы работаем с 2005 года. И среди наших партнеров уже более 400 банков, микрофинансовых, страховых и инвестиционных компаний, все они имеют лицензию ЦБ и проходят дополнительную проверку нашими экспертами. Банки.ру знает, где выгоднее!
Банки.ру — самый большой финансовый супермаркет в России.
Ежемесячно пользователи сервиса оставляют более полумиллиона заявок на банковские, страховые и инвестиционные продукты.
«Мастер подбора кредитов» определит Ваш персональный кредитный рейтинг и найдет подходящие предложения банков с наибольшей вероятностью одобрения. С помощью этого сервиса вы можете оставить заявку на получение микрозайма, кредитной карты или карты рассрочки, ипотеки, автомобильного кредита, а также рефинансировать имеющийся кредит.
Если ваша цель — выгодно вложить деньги, у нас вы можете подобрать вклад или дебетовую карту с выгодными условиями. Для тех, кто ищет более доходные варианты вложения денег, мы создали раздел «Инвестиции», где можно выбрать акции и облигации, а также определиться, через какого брокера провести сделку. В разделе есть продукты и для начинающих инвесторов, которые не готовы разбираться в тонкостях инвестирования и рассматривают варианты доверительного управления.
На Банки.ру можно подобрать и оформить страховку от ведущих страховых компаний на выгодных условиях – ОСАГО, КАСКО, жизнь и здоровье, туризм, для бизнеса и ипотечное страхование..
Ежедневно мы публикуем десятки экономических новостей, которые помогают грамотно управлять личными финансами. У нас можно не только узнать курсы мировых валют, но и понять, что будет влиять на них в ближайшее время. О свежих финансовых лайфхаках вы узнаете из нашего видеопроекта «Финток», а если хотите инвестировать, но не знаете, с чего начать, то послушайте реальную историю сотрудников Банки.ру — ведущих подкаста «Это к деньгам».
С момента оформления вклада, карты или кредита взаимоотношения с банком только начинаются. Если вам есть что сказать о качестве обслуживания в вашей финансовой организации, оставьте отзыв в «Народном рейтинге», как это сделали уже около миллиона наших пользователей. Ежегодно банку, получившему лучшие оценки клиентов, вручается награда «Банк года» в номинации «Народный рейтинг».
На Банки.ру у вас есть много возможностей для общения. Мы обсуждаем финансовые организации на форуме, задаем вопросы банкам прямо на нашем сайте в разделе «Вопрос-ответ». На вопросы представители кредитных организаций отвечают в течение суток.
Ежемесячная аудитория Банки.ру превышает 11 миллионов уникальных пользователей. Присоединяйтесь к нам!
| Любой язык, любая библиотека, любой двоичный файл | Используйте программирование язык по вашему выбору, любой язык или рабочий системные библиотеки или даже принесите свои двоичные файлы. |
| Используйте рабочие процессы и стандарты контейнеров | Cloud Run принимает любые образы контейнеров и отлично сочетаются с контейнером экосистема: Облачная сборка, Реестр артефактов, Докер. |
| Расширенный опыт разработчика | |
| Полностью управляемый | Нет инфраструктуры для управлять: после развертывания Cloud Run управляет вашим услуги, чтобы вы могли спать спокойно. |
| Быстрое автомасштабирование | Cloud Run автоматически масштабируется вверх или вниз от нуля до N в зависимости от трафика. |
| Резервирование | Сервисы Cloud Run региональный, автоматически реплицируется на несколько зоны. |
| Безопасность | Маунт секреты от Секретный менеджер.Развертывайте только доверенные образы контейнеров с Бинарная авторизация. Принесите свои собственные ключи шифрования. Экземпляры контейнера работать в безопасной песочнице, изолированной от других ресурсы, с выделенными идентификаторами и разрешения. |
| Интегрированное ведение журнала и мониторинг | Готово интеграция с Облачный мониторинг, Облачный журнал, Облачный след, а также Отчет об ошибках для обеспечения работоспособности приложения. |
| Обработка веб-трафика | Разоблачить Cloud Run общедоступные службы для получения веб-запросов |
| Обработка асинхронных событий | Настроить триггеры получать события из более чем 60 источников Google Cloud через Журналы облачного аудита или пользовательские источники через облако Pub / Sub |
| Портативность | Cloud Run принимает стандартные образы контейнеров и построены на Оригинальный проект с открытым исходным кодом, обеспечивающий переносимость ваши рабочие нагрузки на разных платформах. |
| URL-адреса HTTPS | Каждая служба Cloud Run получает готовую стабильную конечную точку HTTPS с Прекращение TLS обработано за вас. |
| Пользовательские домены | Сопоставьте свои услуги с ваши собственные домены. |
| HTTP / 2, WebSockets и gRPC | Вызов и подключение Сервисы Cloud Run с HTTP / 1. *, HTTP / 2, WebSockets, или gRPC (одинарный и потоковый). |
Администрирование и сбор медицинских анкет с помощью документов Google: простая, безопасная и бесплатная система
Цель: Анкеты — бесценный ресурс для клинических испытаний.Они служат для оценки бремени болезни и клинических параметров, связанных с конкретным исследованием. Однако нынешние исследователи борются с бюджетными ограничениями, потерей возможностей финансирования и увеличением платы за исследования. Мы стремились изучить альтернативные возможности использования бесплатного программного обеспечения Google docs для администрирования анкет. Это дает возможность снизить затраты при одновременном повышении эффективности и достоверности данных.
Материал и методы: Документы Google использовались в качестве платформы для создания онлайн-анкет, которые автоматически размещались по уникальному URL-адресу.Защищенный паролем доступ к URL-ссылке и уникальный идентификатор исследования давали пациентам круглосуточный доступ из любой точки мира. Уникальный идентификатор исследования обеспечивал конфиденциальность всех данных, предоставленных самими участниками. Ответы пациентов были защищены с помощью «облачной» базы данных, где данные автоматически сортируются, масштабируются и оцениваются по пользовательским формулам Excel. Исследователи загрузили ответы на анкету в режиме реального времени в нескольких форматах (например, в Excel), которые затем были проанализированы с помощью выбранного статистического программного обеспечения.
Полученные результаты: Этот простой рабочий процесс обеспечивал мгновенные оценки анкеты, что избавляло от необходимости использовать бумажные ответы и последующий ввод данных вручную.Легкость доступа к онлайн-анкетам обеспечила удобство для пациентов, что привело к лучшему количеству ответов и повышению достоверности данных. Система также позволяла в режиме реального времени отслеживать прогресс пациента в заполнении анкет. Онлайн-анкеты заполнялись на 100% по сравнению с бумажными анкетами.
Выводы: Документы Google могут служить эффективной и бесплатной платформой для администрирования анкет для клинической группы без ущерба для качества, безопасности и достоверности данных.
Ключевые слова: Прикладная информатика; Клинические результаты; Гугл документы; Онлайн-анкеты; Научное исследование.
Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie
Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.
Настройка вашего браузера для приема файлов cookie
Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно.Ниже приведены наиболее частые причины:
- В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
- Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
- Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
- Дата на вашем компьютере в прошлом.Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
- Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.
Почему этому сайту требуются файлы cookie?
Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу.Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.
Что сохраняется в файле cookie?
Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.
Как правило, в файлах cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта.Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.
Ru (II) -тиминовый комплекс вызывает повреждение ДНК и апоптотическую гибель клеток в клетках карциномы толстой кишки человека HCT116, опосредованных JNK / p38 / ERK1 / 2, посредством р53-независимой передачи сигналов
Bray, F. et al. . Глобальная статистика рака 2018: оценки GLOBOCAN заболеваемости и смертности во всем мире от 36 видов рака в 185 странах. CA Cancer J. Clin. 68 , 394–424 (2018).
Артикул Google ученый
Ciombor, K.K., Wu, C. & Goldberg, R.M. Последние терапевтические достижения в лечении колоректального рака. Annu. Rev. Med. 66 , 83–95 (2015).
КАС Статья Google ученый
Iveson, T. J. и др. .3 по сравнению с 6 месяцами адъювантной комбинированной терапии оксалиплатином и фторпиримидином при колоректальном раке (SCOT): международное рандомизированное исследование 3 фазы не меньшей эффективности. Ланцет Онкол. 19 , 562–578 (2018).
Артикул Google ученый
Сава, Г., Бергамо, А. и Дайсон, П. Дж. Противоопухолевые препараты на основе металлов в постгеномную эру: что будет дальше? Dalton Trans. 40 , 9069–75 (2011).
КАС Статья Google ученый
Лазаревич, Т., Рилак, А. и Бугарчич,. D. Комплексы платины, палладия, золота и рутения как противораковые агенты: текущее клиническое использование, исследования цитотоксичности и перспективы на будущее. Eur. J. Med. Chem. 142 , 8–31 (2017).
Артикул Google ученый
Leijen, S. et al. .Фаза I / II исследования соединения рутения NAMI-A и гемцитабина у пациентов с немелкоклеточным раком легкого после терапии первой линии. Инвест. Новые лекарства 33 , 201–214 (2015).
КАС Статья Google ученый
Ленц, Ф. и др. . Фармакокинетика нового противоракового рутениевого комплекса (KP1019, FFC14A) в фазе I исследования повышения дозы. Противораковые препараты 20 , 97–103 (2009).
КАС Статья Google ученый
Алессио, Э. Тридцать лет кандидата в лекарство нами ‐ а и мифы в области противораковых соединений рутения: личная точка зрения. Eur. J. Inorg. Chem. 2017 , 1549–1560 (2017).
КАС Статья Google ученый
Тота, С., Родригес, Д. А., Кранс, Д. К. и Баррейро, Э.J. Соединения Ru (II): противораковые металлотерапевтические средства нового поколения? J. Med. Chem. 61 , 5805–5821 (2018).
КАС Статья Google ученый
Коста, К. О. Д. и др. . Новые пиплартинсодержащие комплексы рутения: синтез, ингибирование роста клеток, индукция апоптоза и продукция АФК на клетках HCT116. Oncotarget 8 , 104367–104392 (2017).
Google ученый
Сильва, В. Р. и др. . Комплекс 5-фторурацила на основе рутения с повышенной цитотоксичностью и действием индукции апоптоза в HCT116. ячеек. Научный отчет 8 , 288 (2018).
ADS Статья Google ученый
Карвалью Н.С. и др. . Новый комплекс рутения с ксантоксилином индуцирует остановку S-фазы и вызывает ERK1 / 2-опосредованный апоптоз в клетках HepG2 через p53-независимый путь. Cell Death Dis. 9 , 79 (2018).
Артикул Google ученый
Xu, L. и др. . Комплекс рутения (II), содержащий п-крезольную группу, индуцирует апоптоз в клетках карциномы шейки матки человека через стресс эндоплазматического ретикулума и продукцию активных форм кислорода. J. Inorg. Biochem. 191 , 126–134 (2019).
КАС Статья Google ученый
Vidimar, V. et al. . Редокс-соединение рутения непосредственно нацелено на PHD2 и ингибирует путь HIF1, снижая ангиогенез опухоли независимо от p53. Cancer Lett. 440-441 , 145–155 (2019).
КАС Статья Google ученый
Рой, С., Сил, А. и Чакраборти, Т. Усиление апоптоза и модуляция p53, Bcl2 и Bax с помощью нового хризин-рутениевого комплекса для эффективной химиотерапевтической эффективности против рака груди. J. Cell Physiol. 234 , 4888–4909 (2019).
КАС Статья Google ученый
Correa, R. S. и др. . Комплексы Ru (II) -тиминат: новые кандидаты в металлопрепараты против опухолевых клеток. New J. Chem. 42 , 6794–6802 (2018).
КАС Статья Google ученый
Oliveira, M. S. et al. .Комплекс Ru (II) -тимин вызывает ингибирование роста клеток и индукцию каспазо-опосредованного апоптоза в клетках промиелоцитарного лейкоза HL-60 человека. Внутр. J. Mol. Sci. 19 , E1609 (2018).
Артикул Google ученый
Wei, F., Xie, Y., Tao, L. & Tang, D. Киназы ERK1 и ERK2 способствуют задержке G2 / M в обработанных этопозидом клетках MCF7, облегчая активацию ATM. Cell Signal. 22 , 1783–1789 (2010).
КАС Статья Google ученый
Ким, Э. К. и Чой, Э. Дж. Нарушение передачи сигналов MAPK при заболеваниях человека: обновленная информация. Arch. Toxicol. 89 , 867–882 (2015).
КАС Статья Google ученый
Corre, I., Paris, F. & Huot, J. Путь p38, основной плейотропный каскад, который трансдуцирует стрессовые и метастатические сигналы в эндотелиальных клетках. Oncotarget 8 , 55684–55714 (2017).
Артикул Google ученый
Дханасекаран, Д. Н. и Редди, Е. П. JNK-сигнализация: узел мультиплексирования в запрограммированной гибели клеток. Гены рака. 8 , 682–694 (2017).
PubMed PubMed Central Google ученый
Чаттерджи, С., Кунду, С., Бхаттачарья, А., Hartinger, C.G. & Dyson, P.J. Соединение RAPTA-C с ареном рутения (II) индуцирует апоптоз в клетках EAC через митохондриальные пути и пути p53-JNK. J. Biol. Неорг. Chem. 13 , 1149–1155 (2008).
КАС Статья Google ученый
Чен, Дж. и др. . Цитотоксичность in vitro , клеточное поглощение, локализация и исследования механизма апоптоза, индуцированные комплексом рутения (II). J. Biol. Неорг. Chem. 23 , 261–275 (2018).
КАС Статья Google ученый
Сингх В., Азад Г. К., Мандал П., Редди М. А. и Томар Р. С. Противораковый препарат KP1019 модулирует эпигенетику и индуцирует ответ на повреждение ДНК в Saccharomyces cerevisiae . FEBS Lett. 588 , 1044–1052 (2014).
КАС Статья Google ученый
Кук, С. Дж., Стюарт, К., Гилли, Р. и Сейл, М. Дж. Контроль гибели клеток и деления митохондрий с помощью передачи сигналов киназы ERK1 / 2 MAP. FEBS J. 284 , 4177–4195 (2017).
КАС Статья Google ученый
Wang, X., Martindale, J. L. & Holbrook, N. J. Необходимость активации ERK при апоптозе, индуцированном цисплатином. J. Biol. Chem. 275 , 39435–3943 (2000).
КАС Статья Google ученый
Yan, Y., Black, C.P. и Cowan, K.H. Реакция контрольной точки G2 / M, индуцированная облучением, требует активации ERK1 / 2. Онкоген 26 , 4689–4698 (2007).
КАС Статья Google ученый
Oliveira, M. S. et al. . Новый комплекс платины, содержащий производное пиплартина, проявляет повышенную цитотоксичность, вызывает окислительный стресс и запускает апоптотическую гибель клеток по пути ERK / p38 в клетках HL-60 острой промиелоцитарной лейкемии человека. Редокс Биол. 20 , 182–194 (2019).
КАС Статья Google ученый
Чоу, М. Дж. и др. . Структурные детерминанты независимости р53 в противораковых комплексах рутений-арен-шифф-основание. Мол. Pharm. 13 , 2543–2554 (2016).
КАС Статья Google ученый
Хинц, К., Мор, А., Бхакта-Гуха, Д. и Эфферт, Т. Роль p53 в лекарственной устойчивости рака и направленной химиотерапии. Oncotarget. 8 , 8921–8946 (2017).
Артикул Google ученый
Deng, Z. et al. . Комплексы рутения с производными фенилтерпиридина нацелены на клеточную мембрану и запускают апоптоз, опосредованный рецепторами смерти, в раковых клетках. Биоматериалы 129 , 111–126 (2017).
КАС Статья Google ученый
Chen, L. et al. . Индукция аутофагии против митохондриально-опосредованного апоптоза в клетках рака легких с помощью имидазольного комплекса рутения (II). Oncotarget 7 , 80716–80734 (2016).
PubMed PubMed Central Google ученый
Purushothaman, B. et al. .Новый триазиновый комплекс рутения (II) [Ru (bdpta) (tpy)] 2+ , ко-нацеленный на устойчивый к лекарствам GRP78 и субклеточные органеллы в раковых стволовых клетках. Eur. J. Med. Chem. 156 , 747–759 (2018).
КАС Статья Google ученый
Самособирающийся Ru – Pt металлический слой в качестве фотосенсибилизатора, нацеленного на лизосомы для 2-фотонной фотодинамической терапии
Фотодинамическая терапия (PDT) — это метод лечения, который функционирует с помощью комбинации нетоксичного фотосенсибилизатора (PS), света и молекулярный кислород (1⇓ – 3).Облученный светом соответствующей длины волны, PS возбуждается и вызывает межмолекулярный триплет-триплетный перенос энергии к кислороду, который генерирует активные формы кислорода (ROS) (1⇓ – 3). Эти АФК вызывают гибель клеток через пути апоптоза и / или некроза, повреждение сосудистой сети и острые воспалительные реакции, что приводит к прогрессирующей регрессии заболевания (4, 5). Локализуя как PS, так и световое воздействие в злокачественной ткани, PDT может избирательно убивать злокачественные клетки, сводя к минимуму побочные повреждения здоровой ткани.Благодаря своему уникальному механизму ФДТ является эффективной альтернативой традиционным методам лечения различных типов рака, инфекций и кожных заболеваний (1–3). Чтобы повысить эффективность ФДТ, были предприняты большие усилия по оптимизации фотофизических и биологических свойств ФС (6–12).
Длина волны света является определяющим фактором глубины его проникновения. ФС с длинами волн возбуждения в биологическом оптическом окне (600-900 нм), где глубина проникновения света наибольшая, очень желательны для клинического использования (13).Двухфотонная PDT, в которой PS активируется двумя фотонами, а не одним фотоном высокой энергии, была предложена в качестве метода настройки длины волны возбуждения в соответствии с биологическим оптическим окном (14, 15). Кроме того, двухфотонная ФДТ также улучшает пространственную селективность и снижает фотоповреждение здоровых тканей (15, 16). Эффективность 2-фотонного поглощения света, также известная как сечение 2-фотонного поглощения, имеет решающее значение для терапевтической эффективности PS (15, 17–19). Однако использование существующих клинических PS для 2-фотонной ФДТ in vivo затруднено из-за их низких поперечных сечений 2-фотонного поглощения: порядка от 1 до 100 единиц Goeppert Mayer (GM) (1 GM = 10 −50 см 4 с фотон −1 ) (20⇓ – 22).
Терапевтическая эффективность PDT может быть улучшена, если PS демонстрирует избирательное накопление в субклеточных компартментах, которые чувствительны к повреждению, вызванному ROS, из-за малого радиуса действия ROS в биологических системах (23–26). Более того, PSs, которые селективно локализуются в субклеточных компартментах, менее склонны к оттоку по сравнению с PS, которые беспорядочно диффундируют в цитоплазму (26–28). Лизосомы становятся новой мишенью для ФДТ из-за их тесной связи с апоптозом и некрозом (29, 30).Было обнаружено, что фотоповреждение лизосом более эффективно вызывает гибель клеток по сравнению с другими органеллами (31), а локализация в лизосомах может минимизировать взаимодействие между PS и другими клеточными компартментами, предотвращая высокую темновую цитотоксичность (32, 33). Таким образом, локализованные в лизосомах PS очень перспективны для высокоэффективной и точной 2-фотонной PDT.
Самосборка, управляемая координацией, которая основана на спонтанной организации строительных блоков льюисовских металлсодержащих акцепторов и основных органических донорных блоков Льюиса посредством координационных взаимодействий, представляет собой модульный подход к синтезу дискретных супрамолекулярных координационных комплексов ( SCC) с высокой структурной и функциональной сложностью (34⇓⇓ – 37).Путем разумного выбора молекулярных строительных блоков формы, геометрия и биологические свойства SCC могут быть точно изменены для содействия биомедицинским применениям, таким как противораковая активность (38⇓⇓⇓ – 42), доставка лекарств (43⇓⇓ – 46 ), биоимиджинг (47, 48) и биораспознавание (49–51). Самоорганизованные металлоциклы показали потенциал в качестве фотосенсибилизаторов для катализа, а также в качестве ФДТ для лечения рака и бактериальной инактивации (39, 40, 52–54). Мы предполагали, что SCC с высоким уровнем структурной сложности, такие как металлопластики, могут обеспечить благоприятные фотофизические и биологические свойства по сравнению с их двумерными аналогами из-за их трехмерной структуры и большого количества функциональных фрагментов в одном ансамбле.Здесь мы описываем использование управляемой координацией самосборки для приготовления биметаллического металлического покрытия Ru – Pt в качестве PS для 2-фотонной PDT. Комплексы Ru (II) привлекают большое внимание как ФС для ФДТ из-за их богатых фотохимических и фотофизических свойств (7, 55–57). Объединив 6 PS на основе Ru (II) и 4 акцепторных строительных блока на основе Pt (II) в единый супрамолекулярный ансамбль, октаэдрический металлический каркас Ru-Pt был синтезирован с использованием координационно-управляемой самосборки и демонстрирует темно-красное излучение, большое Поперечное сечение двухфотонного поглощения и высокая эффективность генерации АФК при активации двухфотонным световым излучением.Наночастицы, образованные в результате инкапсуляции металлической оболочки амфифильным полимером, избирательно накапливаются в лизосомах. Благодаря этим благоприятным характеристикам высокоэффективная двухфотонная ФДТ, опосредованная металлической оболочкой, была достигнута в однослойных клетках и трехмерных многоклеточных сфероидах. Значительная противоопухолевая эффективность 2-фотонной ФДТ с использованием наночастиц металлического покрытия была дополнительно продемонстрирована исследованиями in vivo на мышах с опухолью A549. Это исследование показывает, что управляемая координацией самосборка обеспечивает универсальную стратегию развития PS с фотофизическими и биологическими свойствами, предназначенных для эффективной PDT.
Результаты и обсуждение
Синтез SCC.
Ru (bpy) 3 2+ (bpy = 2,2′-бипиридин) и его производные широко используются не только в ФДТ (7, 56, 58⇓ – 60), но и в фотоокислительном катализе (61 ) и фотоэлектрические (62). Дитопный Ru (II) -содержащий донор 1 был получен заменой 1 bpy группы Ru (bpy) 3 2+ на 4,4 ′: 2 ′, 2 ″: 4 ″, 4 ″ ′ -кватерпиридин. Основываясь на принципах самосборки, управляемой координацией, геометрия SCC определяется длиной и углами донорных и акцепторных строительных блоков (63).Комбинация 1 с акцептором ди-Pt (II) 2 или три-Pt (II) акцептором 3 в CH 2 Cl 2 / CH 3 OH ( v : v = 1: 1) приводит к образованию [2 + 2] ромбовидного металлоцикла 4 или [6 + 4] октаэдрического металлопластика 5 (рис. 1 A ). Спектры ЯМР 31 P как 4 , так и 5 показали резкие синглеты с сопутствующими сателлитами 195 Pt (δ = 13.62 и 13,32 частей на миллион для 4 и 5 соответственно) (рис. 1 B и C ), что указывает на образование дискретного, единого продукта с высокой симметрией при самосборке. Образование отдельных видов также подтверждается экспериментами ЯМР с диффузионно-упорядоченной спектроскопией 1 H со значениями коэффициента диффузии 7,7 × 10 −11 м 2 s −1 и 6,9 × 10 −11 m 2 ⋅s −1 для 4 и 5 соответственно ( SI Приложение , рис.S2 и S5). Затем составы 4 и 5 были установлены с использованием времяпролетной масс-спектрометрии с ионизацией электрораспылением (ESI-TOF-MS). В спектре ESI-TOF-MS 4 присутствовали пики с m / z значениями 917,26, 721,59 и 591,15, которые могли быть отнесены к сборке [2 + 2] с +4, +5 и +6 зарядов из-за прогрессирующей потери нитрат-анионов (Рис. 1 D и SI Приложение , Рис. S3). Аналогичным образом, серия пиков, соответствующих сборке [6 + 4] с +7 до +14 зарядов, наблюдалась для спектра ESI-TOF-MS 5 (рис.1 E и SI Приложение , Рис. S6). Распределение изотопов экспериментальных спектров также близко соответствовало моделированным спектрам, что подтверждает предложенную стехиометрию для 4 и 5 .
Рис. 1.Самостоятельная сборка и характеристика SCC. ( A ) Самостоятельная сборка [2 + 2] для получения 4 и [6 + 4] самостоятельная сборка для получения 5 . ( B и C ) 31 P { 1 H} Спектры ЯМР 4 ( B ) и 5 ( C ).( D — E ) ESI-TOF-MS спектры 4 ( D ) и 5 ( E ).
Фотофизические свойства и образование АФК SCC.
Стационарные фотофизические профили SCC обобщены в приложении SI, таблица S1. Донор 1 показал полосу поглощения с переносом заряда металл-лиганд (MLCT) с центром при 468 нм ( SI Приложение , рис. S7). SCC демонстрировали характеристики поглощения, аналогичные характеристикам поглощения 1 , но 4 и 5 имели красные смещенные полосы MLCT при 482 и 481 нм, соответственно ( SI Приложение , рис.S7). При возбуждении перехода MLCT как 4 , так и 5 демонстрируют неструктурированную красную полосу излучения с центрами 672 и 673 нм, соответственно, которая смещена на ∼30 нм относительно 1 (рис. 2 A ). . Длительное время жизни излучения (> 400 нс) и повышенный квантовый выход в атмосфере аргона указывают на то, что излучение может иметь фосфоресцентную природу. Красное смещение поглощения, излучения и большого стоксова сдвига (190 нм) SCC способствовало дальнейшим биологическим исследованиям.
Рис. 2.Фотофизические свойства и образование АФК соединений. ( A ) Спектр излучения люминесценции соединений. ( B ) Сечения двухфотонного поглощения соединений при различных длинах волн возбуждения от 780 до 930 нм. Измерение эффективности производства 1 O 2 по изменениям оптической плотности DPBF при 411 нм в зависимости от времени облучения (λ irr = 450 нм) в присутствии соединений в отрегулированных концентрациях.[Ru (bpy) 3 ] 2+ использовали в качестве стандарта. ( Врезка ) Спектры излучения смеси 5 и DPBF при облучении.
2-фотонные поперечные сечения SCC от 780 до 920 нм были измерены с использованием метода флуоресценции с 2-фотонным возбуждением (64) и сравнивались с 1 (рис. 2 B ). Оба SCC показали наибольшее двухфотонное поглощение на длине волны 820 нм со значениями 1969 GM для металлоцикла 4 и 5468 GM для металлического покрытия 5 , тогда как предшественник 1 показал 2-фотонное поперечное сечение 161 GM ниже. такие же условия.Значительное повышение эффективности поглощения 2-фотонов, наблюдаемое для SCC, объясняется организацией множества комплексов Ru (II) в единой супрамолекулярной системе посредством самосборки и усиленной поляризацией заряда мотива Ru (II), индуцированной жесткая конструкция SCC (22, 65, 66). Спектры излучения соединений 1 , 4 и 5 при возбуждении на длине волны 820 нм ( SI Приложение , рис. S8) аналогичны их линейным спектрам излучения, а их интенсивности излучения показывают квадратичную зависимость от мощности возбуждения. , подтверждая, что соединения являются 2-фотонно-активными.
Синглетный кислород ( 1 O 2 ) — основная АФК, генерируемая ФС на основе Ru (II) (7, 55⇓ – 57). Квантовые выходы 1 O 2 (Φ ▵ ) 1 , 4 и 5 были непосредственно определены путем оценки люминесценции 1 O 2 при 1270 нм при фотовозбуждении соединения ( SI Приложение , рис. S9 B ). Раствор Ru (bpy 3 ) 2+ использовали в качестве эталонного сенсибилизатора (Φ ▵ = 81.0%). Это привело к значениям Φ ▵ , равным 63,3, 75,3 и 85,0% для 1 , 4 и 5 соответственно. Косвенное измерение для Φ ▵ было также выполнено путем мониторинга индуцированного PS разложения 1,3-дифенилизобензофурана (DPBF) с зеленым излучением, что дало сопоставимые значения (Φ ▵ 62,9, 76,7 и 86,2% для 1. , 4 и 5 соответственно, рис.2 C ). Высокое поперечное сечение для 2-фотонов и Φ ▵ для SCC, особенно для металлического покрытия 5 , указывают на их большой потенциал как эффективных сенсибилизаторов для 2-фотонной PDT.
Изготовление, клеточное поглощение и локализация наночастиц, нагруженных SCC.
Metallacycle 4 проявлял благоприятные клеточные свойства и накапливался в митохондриях ( SI Приложение , Рис. S11), тогда как Metallacage 5 показал плохое клеточное поглощение из-за его ограниченной растворимости в водном растворе ( SI Приложение , Рис. S12). Чтобы реализовать его применение в физиологических условиях и повысить его биосовместимость и биодоступность, Metallacage 5 инкапсулировали с использованием DSPE-mPEG2000 в качестве матрицы.Содержание загрузки 5 в наночастицах было определено как 17,6% ( SI Приложение , раздел 4.1). Формирование металлической оболочки 5 загруженных наночастиц ( 5-НЧ ) напрямую подтверждается наблюдением сферических мицеллярных наноструктур диаметром около 230 нм на изображениях просвечивающей электронной микроскопии (ПЭМ) (рис. 3 B ). Измерение динамического светорассеяния (ДРС) на растворе 5-НЧ показало средний размер 260 нм (рис.3 C ), что согласуется с результатами ПЭМ. Стабильность 5-NPs в сыворотке, содержащей среду для культивирования клеток, исследовали путем отслеживания профиля излучения люминесценции смеси ( SI Приложение , фиг. S10). Никакого видимого разложения не наблюдалось через 24 часа, что позволяет предположить, что 5-НЧ обладают хорошей стабильностью для биомедицинских применений.
Рис. 3.Изготовление 5-НП и их сотовое распределение. ( A ) Схематическая иллюстрация изготовления 5-NP, , клеточного поглощения, накопления в лизосомах и их применения в 2-фотонной ФДТ.( B ) ТЕМ изображение 5-НЧ . ( C ) Результат DLS для решения 5-НЧ . ( D ) Количественная оценка ICP-MS субклеточного распределения Ru и Pt клетками A549. ( E ) Колокализационные изображения 5-НЧ с лизосомным красителем LTG с соответствующими коэффициентами корреляции. (Масштаб: 20 мкм.)
Профиль клеточного поглощения 5-NPs в клеточной линии аденокарциномы легкого A549 контролировали с помощью конфокальной лазерной сканирующей микроскопии (CLSM).Сильная красная внутриклеточная эмиссия наблюдалась в клетках A549, инкубированных с 5-NP , с непрерывным увеличением в первые 24 часа инкубации ( SI Приложение , рис. S13), что указывает на успешную локализацию 5-NP в A549. клетки. Специфическое субклеточное распределение 5-НЧ исследовали с помощью анализа колокализации. Красная эмиссия от 5-NPs продемонстрировала хорошее перекрытие с коммерческим лизосомным красителем LysoTracker Green (LTG) с коэффициентом корреляции (R), равным 0.88 (фиг. 3 E ), что указывает на то, что 5-НЧ могут избирательно накапливаться в лизосомах после попадания в клетки. Напротив, плохое перекрытие наблюдалось для красителя эндоплазматического ретикулума ER-Tracker Green, митохондриального красителя MitoTracker Green и ядерного красителя Hoechst 33342 с низкими значениями R ( SI Приложение , Рис. S14).
Для количественной оценки клеточного поглощения и внутриклеточного распределения 5-НЧ использовали масс-спектрометрический анализ с индуктивно связанной плазмой (ICP-MS) для определения клеточных концентраций платины и рутения.Зависимые от времени исследования ICP-MS подтвердили, что внутриклеточные уровни рутения и платины достигают максимума через 24 часа инкубации с концентрациями 9,0 мг на миллион клеток и 37,1 мг на миллион клеток для рутения и платины, соответственно (рис. 3 ). D и SI Приложение , Таблица S2). При анализе субклеточного распределения было обнаружено, что лизосомы содержат значительно большее количество рутения (74,0%) и платины (75,2%) по сравнению с эндоплазматическим ретикулумом, митохондриями и ядром, в соответствии с анализом колокализации ( SI Приложение , Таблица S3).Анализ результатов ICP-MS с 5-НЧ показал, что внутриклеточное молярное соотношение рутений: платина близко к 1: 2 среди всех клеточных компартментов ( SI Приложение , Таблицы S2 и S3), что указывает на хорошую стабильность Metallacage в сложных физиологических условиях, а также клеточное поглощение и распределение как целостный ансамбль.
(Фото) цитотоксичность по отношению к однослойным опухолевым клеткам.
(фото) цитотоксичность 4 и 5-НЧ была оценена на однослойных клетках A549 с использованием анализа 3- (4 ‘, 5′-диметилтиазол-2’-ил) -2,5-дифенилтетразолийбромида. и результаты суммированы в приложении SI, приложение , таблицы S4 и S5.В отсутствие света было обнаружено, что 5-НЧ являются сильно нетоксичными со значением полумаксимальной ингибирующей концентрации (IC 50 ), превышающим 120 мкМ (на основе концентрации 5 , то же самое для приведенных ниже ), тогда как световое облучение привело к заметному увеличению цитотоксичности 5-НЧ (рис. 4). Также было показано, что жизнеспособность клеток чувствительна к дозировке света. При воздействии очень низкой плотности энергии 6 Дж · см −2 было обнаружено, что 5-НЧ обладают высокой цитотоксичностью со значением IC 50 , равным 4.83 мкМ. Низкая цитотоксичность в темноте и высокая (фото) цитотоксичность 5-NPs привели к (фото) индексу цитотоксичности (PI) более 24,8. Значение IC 50 было дополнительно снижено до 1,89 мкМ за счет увеличения световой дозы до 12 Дж · см -2 , в результате чего значение PI было больше 63,5. В обоих случаях было обнаружено, что морфология необработанных клеток, подвергшихся воздействию одинаковой дозы света, не изменилась, что указывает на неинвазивность процедуры светового облучения. Напротив, 4 токсичен в темноте (IC 50 = 93.3 мкМ), вероятно, из-за его митохондриальной локализации (32, 33). Более того, (фото) цитотоксичность 4 (IC 50 = 4,93 мкМ) оказалась ниже, чем 5-НЧ , что привело к более низкому ИП для 4 по сравнению с 5-НЧ. ; Было обнаружено, что 5-аминолевулиновая кислота (5-ALA), клинически одобренный PS для PDT, демонстрирует более низкую фототоксичность (IC 50 = 111 мкМ) и более низкий PI, чем 5-NPs в аналогичных условиях. Эти результаты предполагают потенциал 5-NPs в качестве эффективного PS с низкими побочными эффектами из-за их лизосомного накопления и высокой эффективности продукции ROS.
Рис. 4.Показатели жизнеспособности клеток в темноте и в свете 5-НЧ при различных концентрациях и различной плотности света.
Внутриклеточное образование 1 O 2 посредством 2-фотонного облучения было подтверждено с использованием клеток A549, инкубированных с 5-NP и 2,7-дихлородигидрофлуоресцеина диацетатом (DCFH-DA). При воздействии двухфотонного лазера (820 нм, 6,06 мВт, 40 с) наблюдалась внутриклеточная зеленая эмиссия, возникающая в результате окисления DCFH 1 O 2 ( SI Приложение , рис.S15), предполагая генерацию 1 O 2 внутри клеток путем активации 5-NPs .
Производство 1 O 2 внутри лизосом может привести к неконтролируемой проницаемости лизосом за счет массивного перекисного окисления мембранных липидов (67). Целостность лизосом при ФДТ, опосредованной 5-NPs и , исследовали с использованием окрашивания акридиновым оранжевым (АО). В кислых органеллах АО демонстрирует красную эмиссию, тогда как зеленую эмиссию можно обнаружить в цитозоле и ядрах (68).При воздействии 2-фотонного облучения заметное уменьшение красной флуоресценции АО наблюдалось для клеток A549, обработанных 5-НЧ ( SI Приложение , рис. S16), что указывает на то, что 2-фотонная ФДТ индуцировала разрушение лизосом за счет 5-NPs , тогда как клетки в контрольной группе, которые были облучены одним светом, не были повреждены, поскольку было обнаружено как красное, так и зеленое излучение, что свидетельствует об отсутствии повреждения лизосом, вызванного воздействием света ( SI Приложение , рис. S16). Нарушение целостности лизосом также может привести к высвобождению лизосомных протеаз, таких как катепсин B, из лизосом в цитозоль, что вызывает апоптоз (26).Внутриклеточное распределение катепсина B до и после 2-фотонной PDT с использованием 5-NPs было обнаружено с помощью анализа окрашивания Magic Red (69). После 2-фотонной PDT наблюдалась красная флуоресценция от диффузии Magic Red из лизосом в цитозоль ( SI Приложение , рис. S17), что указывает на высвобождение катепсина B в цитозоль после PDT-опосредованного повреждения лизосом.
Анализ двойного окрашивания аннексином V / йодидом пропидия (70) был использован для подтверждения того, что 2-фотонная ФДТ с использованием 5-НЧ может эффективно индуцировать апоптоз / некроз.Клетки A549, обработанные 5-НЧ и подвергнутые световому облучению, показали как зеленое излучение аннексина V, так и красное излучение иодида пропидия ( SI Приложение , рис. S18), что указывает на повреждение клеток, опосредованное 2-фотонной световой активацией 5-НЧ , которые приводят к апоптозу / некрозу. Эти результаты предполагают, что клетки были в некрозе или позднем апоптозе после 2-фотонной ФДТ.
Двухфотонная ФДТ в направлении трехмерных многоклеточных сфероидов.
Чтобы имитировать патофизиологию солидных опухолей in vivo, такую как специфические гипоксические области в опухолевом центре, градиенты пролиферации и барьеры для проникновения лекарств, 3D A549 MCS были использованы в качестве модели для оценки терапевтической эффективности 5 -NPs -опосредованная 2-фотонная ФДТ.3D MCS инкубировали с 5-NPs в течение 24 часов с последующей 1-фотонной и 2-фотонной микроскопией Z-stack визуализации (Рис. 5 A и SI Приложение , Рис. S19). Двухфотонное возбуждение показало преимущество перед однофотонным возбуждением с большей глубиной проникновения. Однофотонное сканирование Z-стопки показало более слабую люминесценцию на глубине более 120 мм из-за сильного поглощения видимого света тканями. Напротив, сильная красная люминесценция на каждом участке глубины наблюдалась при использовании 2-фотонного возбуждения для сканирования из-за глубокого проникновения длины волны 2-фотонного возбуждения в терапевтическое окно для ткани.
Рис. 5.Двухфотонная ФДТ в направлении трехмерных МКС. ( A ) Одно- и двухфотонно активированные изображения Z-стека MCS A549 после инкубации 5-NP . ( B ) Репрезентативные конфокальные изображения MCS, окрашенных кальцеином-AM после различной обработки. ( C ) Репрезентативные долгосрочные изображения MCS после различных процедур. (Масштаб: 200 мкм.)
Эффективность 2-фотонной PDT с помощью 5-NPs исследовали с использованием анализа жизнеспособности клеток кальцеин-ацетоксиметил (кальцеин-AM).Кальцеин-AM может различать живые клетки, реагируя с универсальной эстеразой в живых клетках с образованием зеленого флуоресцентного продукта (71). Для группы лечения MCS, совпадающие с 5-NP, и кальцеин-AM, подвергались двухфотонному световому облучению, а CLSM использовался для визуализации MCS (рис. 5 B ). Сигнал флуоресценции не наблюдался для групп обработки, тогда как сильная зеленая флуоресценция наблюдалась для контрольной группы, MCS совпадали с 5-NP, и кальцеин-AM, но не подвергались световому облучению, а MCS, обработанные кальцеином-AM, подвергались только воздействию к световому облучению.Эти результаты показывают, что ни 5-NP, , ни 2-фотонное световое облучение не вызывают гибели клеток в MCS, а активация 5-NPs с помощью 2-фотонного светового излучения эффективно вызывает повреждение MCS.
Была исследована способность 5-НЧ ингибировать рост MCS с помощью 2-фотонной PDT. MCS инкубировали с 5-NP в течение 1 дня перед тем, как подвергнуть облучению 2-фотонным светом, затем хранили в темноте, и их объем регистрировали до 6 дня (рис.5 C и SI Приложение , рис. S21). Объемы MCS, обработанные 5-NP , постепенно уменьшались после 2-фотонной PDT, и конечный объем составил 80,4% от исходного объема на 1 день. Напротив, контрольная группа и MCS, обработанные 5-ALA, показали заметный рост. в их объемах с течением времени после той же процедуры (186,8 и 181,2% относительно исходного объема для контрольной группы и группы 5-ALA соответственно). Эти исследования показывают, что 2-фотонная ФДТ с использованием 5-NP может эффективно подавлять рост MCS и достигать большей терапевтической эффективности, чем 5-ALA.
Двухфотонная ФДТ In Vivo.
Эффективность 5-NP в качестве PS для 2-фотонной PDT была дополнительно проиллюстрирована исследованиями in vivo на голых мышах с ксенотрансплантатом опухоли A549. 5-НЧ вводили внутриопухолевым путем мышам в дозе 3 мг / кг, которых облучали лазером с длиной волны 820 нм (50 мВт, 1 кГц, ширина импульса 35 фс, 20 с / мм) через 2 часа после инъекции. (группа 1). В качестве контроля группа 2 получала инъекцию физиологического раствора с лазерным воздействием, группа 3 получала только инъекцию 5-NPs без лазерного воздействия, а группа 4 получала только инъекцию физиологического раствора.Эффект лечения 2-фотонной ФДТ на рост опухоли оценивали путем мониторинга объемов опухоли мышей в течение 15 дней (рис. 6 A –C). В группе 1 рост опухолевых клеток был значительно подавлен, и в конце лечения наблюдалось уменьшение объема опухоли с небольшой массой опухоли под кожей (65,2% от первоначального объема). Напротив, опухолевые клетки в группах 2, 3 и 4 выросли в большие солидные опухоли через 15 дней с более чем 12-кратным увеличением объема опухоли.Масса тела мышей в каждой группе немного увеличилась в процессе лечения (фиг. 6 D ), что указывает на неинвазивность схемы лечения. Эффективность ФДТ дополнительно оценивалась гистологическим исследованием гематоксилина и эозина на срезах тканей из различных групп лечения. Опухолевая ткань в группе 1 показала очевидное деструктивное повреждение после лечения, тогда как морфологические изменения опухолевой ткани в других группах не наблюдались ( SI Приложение , рис.S22). Кроме того, в первичных органах в группе 1 не выявлено патологических изменений по сравнению с другими группами ( SI Приложение , рис. S22). Эти наблюдения демонстрируют, что 5-NPs могут эффективно повреждать опухолевую ткань при облучении 2-фотонным светом с низкой системной токсичностью по отношению к здоровой ткани in vivo.
Рис. 6.Исследования 2-фотонной ФДТ in vivo. ( A и B ) Репрезентативные фотографии опухолей A549 у мышей при различных обработках.( C ) Кривые ингибирования роста опухоли in vivo для мышей при различных обработках. ( D ) Средняя масса тела мышей с опухолью при 4 различных обработках.
Получить Cloud Mail.Ru — Microsoft Store
С 30 декабря все новые пользователи получают 25 ГБ бесплатного хранилища. Объем бесплатного хранилища, предоставляемого всем пользователям, зарегистрировавшимся на эту дату, остается неизменным — 100 ГБ и 1 ТБ (для участников акции). Облако Mail.Ru для Windows Phone — бесплатный сервис для сохранения фото, видео, музыки, презентаций, документов и других файлов.С Cloud Mail.Ru все ваши файлы всегда будут под рукой. Загрузите файлы на облачный диск, и они автоматически станут доступны на всех ваших устройствах. • Загрузите фотографии со своего мобильного телефона. Настройте автоматическое сохранение на диск в вашем облаке Папка загрузки камеры. В целях экономии трафика рекомендуется выполнять загрузки при подключении к Wi-Fi. • Делитесь файлами и папками с друзьями и коллегами одним щелчком мыши. • Экономия трафика — вы можете отправить ссылку на изображение, видео или документ с помощью SMS, электронной почты, мгновенного обмена сообщениями или через социальную сеть.• Просматривайте документы MS Office: Word, Excel, Power Point, PDF, а также файлы в других форматах. • Загружать в телефон и редактировать документы в приложениях MS Office. • Облако Mail.Ru для Windows Phone позволяет смотреть видео и слушать музыку, а также создавать плейлисты из ваших любимых треков. • Управляйте своими файлами из любого места — переименовывайте, удаляйте, создавайте папки. • Храните важные файлы в надежном месте для хранения. Что бы ни случилось с вашим диском на вашем ПК или телефоне, все файлы, хранящиеся в облаке, останутся нетронутыми.• Приложение Cloud Mail.Ru доступно для смартфонов Android, iOS, Windows Phone. • Не нужны никакие провода, флешки и карты памяти. Все, что вам нужно, это бесплатное приложение Cloud Mail.Ru и подключение к Интернету. Приложение протестировано и адаптировано для устройств на базе Windows Phone 7 и Windows Phone 8. Приложения протестированы на Nokia Lumia, HTC и Samsung.
Показать большеКак зарегистрироваться в Gmail, Yahoo Mail и Mail.Ru for AMP Emails
Google официально запустил AMP Emails в 2019 году для веб-приложения Gmail, превращая электронные письма со статических страниц в динамические микровайты прямо в вашем почтовом ящике. В настоящее время электронные письма AMP поддерживаются Yahoo Mail и Mail.ru помимо Gmail. Но прежде чем вы сможете отправлять электронные письма AMP этим почтовым клиентам, вам нужно будет зарегистрироваться у них для получения электронных писем AMP. В этом блоге мы узнаем, как зарегистрироваться в этих почтовых клиентах, чтобы начать отправлять интерактивные электронные письма AMP.
Оглавление
Регистрация для получения одобрения AMP от почтовых клиентов
В настоящее время Gmail, Yahoo Mail и Mail.ru поддерживает отправку писем AMP. Эти почтовые клиенты требуют, чтобы отправитель выполнил определенные требования для отправки электронных писем AMP, и этот процесс известен как добавление в белый список. Помимо создания как AMP, так и HTML / текстовой версии почты, вам нужно будет настроить SPF, DMARC и DKIM для подтверждения вашего домена. Кроме того, вам необходимо зарегистрироваться в этих почтовых клиентах, следуя их инструкциям. Здесь мы предоставляем пошаговое руководство о том, как вы можете зарегистрироваться в этих почтовых клиентах, чтобы начать отправлять электронные письма AMP.
Как зарегистрироваться в Gmail для отправки динамических писем
Когда вы все настроены для запуска своих электронных писем AMP для своих пользователей, вы должны зарегистрироваться в Gmail, выполнив следующие действия:
Убедитесь, что вы соблюдаете все рекомендации и требования, перечисленные Google.
Отправьте настоящее готовое к работе электронное письмо AMP со своих производственных серверов (или сервера с аналогичными заголовками SPF / DKIM / DMARC / «From:» / «Return-Path:»), включая часть MIME AMP-сообщения на адрес ( [email protected]). Это необходимо Google, чтобы проверить соответствие всем своим руководствам и требованиям.
Когда вы отправляете это электронное письмо, выполните следующие действия:
Убедитесь, что динамическая AMP-версия сообщения электронной почты является правильной перед отправкой электронной почты, протестировав ее в Gmail AMP для электронной почты Playground.
Вместо того, чтобы пересылать электронное письмо, отправьте его напрямую. При пересылке электронной почты AMP Gmail удаляет части MIME AMP.
Заполните регистрационную форму и ждите их ответа.Срок обработки большинства запросов составляет 5 рабочих дней.
Попадание в белый список Gmail
Присоединение к отправителю электронного письма AMP зависит от того, насколько хорошо вы соблюдаете правила массовых отправителей Gmail, которые могут быть изменены без предварительного уведомления. Вы будете нести ответственность за соблюдение настоящих правил.
Ваша регистрация может быть отозвана в любое время при обнаружении злоупотреблений или нарушений политики или по собственному усмотрению Google.
Вас могут попросить предоставить дополнительную информацию во время процесса регистрации или даже после завершения регистрации для проверки вашего соответствия.
Сообщаем, что Google отклонит вашу заявку, если вы отправите тестовое (пустое) электронное письмо, если вы не отправите электронное письмо для проверки, или даже если вы отправите электронное письмо, которое пересылается или не содержит AMP MIME. часть.
Как зарегистрироваться в Yahoo Mail для отправки электронных писем AMP
Yahoo Mail (Verizon Media) требует, чтобы вы зарегистрировались в ampverification @ yahoo.com, прежде чем включать AMP-контент в электронных письмах, отправляемых их пользователям. Чтобы приступить к работе, вы можете выполнить следующие действия:
Прочтите правила и требования Yahoo Mail и убедитесь, что вы их соблюдаете
Отправьте настоящее готовое к работе электронное письмо с вашего рабочего сервера с действующим SPF / DKIM / DMARC и часть AMP MIME по адресу [email protected]. Не пересылайте электронные письма на этот адрес.
Заполните регистрационную форму и дождитесь утверждения
После того, как Yahoo Mail ответит с одобрением, вы все настроены для отправки электронных писем AMP своим пользователям.
Как зарегистрироваться на Mail.ru для отправки электронных писем AMP
Чтобы использовать AMP на Mail.ru, в будущем должны быть удовлетворены и удовлетворены сопутствующие потребности.
В домене, который вы используете для отправки электронных писем, есть веб-сайт с логотипом и информацией о компании. Тематика сайта должна соответствовать содержанию рассылки.
SPF, DKIM, DMARC устанавливаются для домена. Политика DMARC установлена в режиме «блокировки»: p = карантин или p = отклонить.
Вы отправляете электронные письма со значительным DKIM не менее 3 месяцев. Они соответствуют правилам рассылки Mail.ru.
Количество писем, отправленных с домена, не менее 5К в месяц (в любом случае за 3 месяца).
В заголовках рассылок есть заголовок List-Unsubscribe. Вы выводите клиента из рассылок как после нажатия на символ «Снять» в интерфейсе Mail.ru, так и после перехода по ссылке в письме.
Домен зарегистрирован на Postmaster Mail.ru. Вы получаете для этого Feedback Loop (FBL) и сразу обрабатываете отчеты.
Вставьте часть AMP в одно из своих электронных писем, которое готово.
Отправьте адрес, с которого вы обычно отправляете электронные письма, чтобы мы могли включить его в белый список. В запросе укажите контактный адрес, который мы можем использовать для переписки, если возникнут проблемы с вашими рассылками.
Электронное письмо с предложением использовать AMP должно пройти проверку SPF, DKIM, DMARC для вашего домена.
В Mail.ru вы можете отправлять тестовые письма только с утвержденных адресов. Так что лучше сначала получить одобрение, а затем протестировать блоки AMP.
Все еще нужна помощь?
Смущает несколько шагов и рекомендаций по отправке электронных писем AMP.
