Фотофизические свойства и образование АФК соединений. ( A ) Спектр излучения люминесценции соединений. ( B ) Сечения двухфотонного поглощения соединений при различных длинах волн возбуждения от 780 до 930 нм. Измерение эффективности производства ¹ O ₂ по изменениям оптической плотности DPBF при 411 нм в зависимости от времени облучения (λ _irr = 450 нм) в присутствии соединений в отрегулированных концентрациях.[Ru (bpy) ₃ ] ²⁺ использовали в качестве стандарта. ( Врезка ) Спектры излучения смеси 5 и DPBF при облучении.

2-фотонные поперечные сечения SCC от 780 до 920 нм были измерены с использованием метода флуоресценции с 2-фотонным возбуждением (64) и сравнивались с 1 (рис. 2 B ). Оба SCC показали наибольшее двухфотонное поглощение на длине волны 820 нм со значениями 1969 GM для металлоцикла 4 и 5468 GM для металлического покрытия 5 , тогда как предшественник 1 показал 2-фотонное поперечное сечение 161 GM ниже. такие же условия.Значительное повышение эффективности поглощения 2-фотонов, наблюдаемое для SCC, объясняется организацией множества комплексов Ru (II) в единой супрамолекулярной системе посредством самосборки и усиленной поляризацией заряда мотива Ru (II), индуцированной жесткая конструкция SCC (22, 65, 66). Спектры излучения соединений 1 , 4 и 5 при возбуждении на длине волны 820 нм ( SI Приложение , рис. S8) аналогичны их линейным спектрам излучения, а их интенсивности излучения показывают квадратичную зависимость от мощности возбуждения. , подтверждая, что соединения являются 2-фотонно-активными.

Синглетный кислород ( ¹ O ₂ ) — основная АФК, генерируемая ФС на основе Ru (II) (7, 55⇓ – 57). Квантовые выходы ¹ O ₂ (Φ _▵ ) 1 , 4 и 5 были непосредственно определены путем оценки люминесценции ¹ O ₂ при 1270 нм при фотовозбуждении соединения ( SI Приложение , рис. S9 B ). Раствор Ru (bpy ₃ ) ²⁺ использовали в качестве эталонного сенсибилизатора (Φ _▵ = 81.0%). Это привело к значениям Φ _▵ , равным 63,3, 75,3 и 85,0% для 1 , 4 и 5 соответственно. Косвенное измерение для Φ _▵ было также выполнено путем мониторинга индуцированного PS разложения 1,3-дифенилизобензофурана (DPBF) с зеленым излучением, что дало сопоставимые значения (Φ _▵ 62,9, 76,7 и 86,2% для 1. , 4 и 5 соответственно, рис.2 C ). Высокое поперечное сечение для 2-фотонов и Φ _▵ для SCC, особенно для металлического покрытия 5 , указывают на их большой потенциал как эффективных сенсибилизаторов для 2-фотонной PDT.

Изготовление, клеточное поглощение и локализация наночастиц, нагруженных SCC.

Metallacycle 4 проявлял благоприятные клеточные свойства и накапливался в митохондриях ( SI Приложение , Рис. S11), тогда как Metallacage 5 показал плохое клеточное поглощение из-за его ограниченной растворимости в водном растворе ( SI Приложение , Рис. S12). Чтобы реализовать его применение в физиологических условиях и повысить его биосовместимость и биодоступность, Metallacage 5 инкапсулировали с использованием DSPE-mPEG2000 в качестве матрицы.Содержание загрузки 5 в наночастицах было определено как 17,6% ( SI Приложение , раздел 4.1). Формирование металлической оболочки 5 загруженных наночастиц ( 5-НЧ ) напрямую подтверждается наблюдением сферических мицеллярных наноструктур диаметром около 230 нм на изображениях просвечивающей электронной микроскопии (ПЭМ) (рис. 3 B ). Измерение динамического светорассеяния (ДРС) на растворе 5-НЧ показало средний размер 260 нм (рис.3 C ), что согласуется с результатами ПЭМ. Стабильность 5-NPs в сыворотке, содержащей среду для культивирования клеток, исследовали путем отслеживания профиля излучения люминесценции смеси ( SI Приложение , фиг. S10). Никакого видимого разложения не наблюдалось через 24 часа, что позволяет предположить, что 5-НЧ обладают хорошей стабильностью для биомедицинских применений.

Изготовление 5-НП и их сотовое распределение. ( A ) Схематическая иллюстрация изготовления 5-NP, , клеточного поглощения, накопления в лизосомах и их применения в 2-фотонной ФДТ.( B ) ТЕМ изображение 5-НЧ . ( C ) Результат DLS для решения 5-НЧ . ( D ) Количественная оценка ICP-MS субклеточного распределения Ru и Pt клетками A549. ( E ) Колокализационные изображения 5-НЧ с лизосомным красителем LTG с соответствующими коэффициентами корреляции. (Масштаб: 20 мкм.)

Профиль клеточного поглощения 5-NPs в клеточной линии аденокарциномы легкого A549 контролировали с помощью конфокальной лазерной сканирующей микроскопии (CLSM).Сильная красная внутриклеточная эмиссия наблюдалась в клетках A549, инкубированных с 5-NP , с непрерывным увеличением в первые 24 часа инкубации ( SI Приложение , рис. S13), что указывает на успешную локализацию 5-NP в A549. клетки. Специфическое субклеточное распределение 5-НЧ исследовали с помощью анализа колокализации. Красная эмиссия от 5-NPs продемонстрировала хорошее перекрытие с коммерческим лизосомным красителем LysoTracker Green (LTG) с коэффициентом корреляции (R), равным 0.88 (фиг. 3 E ), что указывает на то, что 5-НЧ могут избирательно накапливаться в лизосомах после попадания в клетки. Напротив, плохое перекрытие наблюдалось для красителя эндоплазматического ретикулума ER-Tracker Green, митохондриального красителя MitoTracker Green и ядерного красителя Hoechst 33342 с низкими значениями R ( SI Приложение , Рис. S14).

Для количественной оценки клеточного поглощения и внутриклеточного распределения 5-НЧ использовали масс-спектрометрический анализ с индуктивно связанной плазмой (ICP-MS) для определения клеточных концентраций платины и рутения.Зависимые от времени исследования ICP-MS подтвердили, что внутриклеточные уровни рутения и платины достигают максимума через 24 часа инкубации с концентрациями 9,0 мг на миллион клеток и 37,1 мг на миллион клеток для рутения и платины, соответственно (рис. 3 ). D и SI Приложение , Таблица S2). При анализе субклеточного распределения было обнаружено, что лизосомы содержат значительно большее количество рутения (74,0%) и платины (75,2%) по сравнению с эндоплазматическим ретикулумом, митохондриями и ядром, в соответствии с анализом колокализации ( SI Приложение , Таблица S3).Анализ результатов ICP-MS с 5-НЧ показал, что внутриклеточное молярное соотношение рутений: платина близко к 1: 2 среди всех клеточных компартментов ( SI Приложение , Таблицы S2 и S3), что указывает на хорошую стабильность Metallacage в сложных физиологических условиях, а также клеточное поглощение и распределение как целостный ансамбль.

(Фото) цитотоксичность по отношению к однослойным опухолевым клеткам.

(фото) цитотоксичность 4 и 5-НЧ была оценена на однослойных клетках A549 с использованием анализа 3- (4 ‘, 5′-диметилтиазол-2’-ил) -2,5-дифенилтетразолийбромида. и результаты суммированы в приложении SI, приложение , таблицы S4 и S5.В отсутствие света было обнаружено, что 5-НЧ являются сильно нетоксичными со значением полумаксимальной ингибирующей концентрации (IC ₅₀ ), превышающим 120 мкМ (на основе концентрации 5 , то же самое для приведенных ниже ), тогда как световое облучение привело к заметному увеличению цитотоксичности 5-НЧ (рис. 4). Также было показано, что жизнеспособность клеток чувствительна к дозировке света. При воздействии очень низкой плотности энергии 6 Дж · см ⁻² было обнаружено, что 5-НЧ обладают высокой цитотоксичностью со значением IC ₅₀ , равным 4.83 мкМ. Низкая цитотоксичность в темноте и высокая (фото) цитотоксичность 5-NPs привели к (фото) индексу цитотоксичности (PI) более 24,8. Значение IC ₅₀ было дополнительно снижено до 1,89 мкМ за счет увеличения световой дозы до 12 Дж · см ^-2 , в результате чего значение PI было больше 63,5. В обоих случаях было обнаружено, что морфология необработанных клеток, подвергшихся воздействию одинаковой дозы света, не изменилась, что указывает на неинвазивность процедуры светового облучения. Напротив, 4 токсичен в темноте (IC ₅₀ = 93.3 мкМ), вероятно, из-за его митохондриальной локализации (32, 33). Более того, (фото) цитотоксичность 4 (IC ₅₀ = 4,93 мкМ) оказалась ниже, чем 5-НЧ , что привело к более низкому ИП для 4 по сравнению с 5-НЧ. ; Было обнаружено, что 5-аминолевулиновая кислота (5-ALA), клинически одобренный PS для PDT, демонстрирует более низкую фототоксичность (IC ₅₀ = 111 мкМ) и более низкий PI, чем 5-NPs в аналогичных условиях. Эти результаты предполагают потенциал 5-NPs в качестве эффективного PS с низкими побочными эффектами из-за их лизосомного накопления и высокой эффективности продукции ROS.

Показатели жизнеспособности клеток в темноте и в свете 5-НЧ при различных концентрациях и различной плотности света.

Внутриклеточное образование ¹ O ₂ посредством 2-фотонного облучения было подтверждено с использованием клеток A549, инкубированных с 5-NP и 2,7-дихлородигидрофлуоресцеина диацетатом (DCFH-DA). При воздействии двухфотонного лазера (820 нм, 6,06 мВт, 40 с) наблюдалась внутриклеточная зеленая эмиссия, возникающая в результате окисления DCFH ¹ O ₂ ( SI Приложение , рис.S15), предполагая генерацию ¹ O ₂ внутри клеток путем активации 5-NPs .

Производство ¹ O ₂ внутри лизосом может привести к неконтролируемой проницаемости лизосом за счет массивного перекисного окисления мембранных липидов (67). Целостность лизосом при ФДТ, опосредованной 5-NPs и , исследовали с использованием окрашивания акридиновым оранжевым (АО). В кислых органеллах АО демонстрирует красную эмиссию, тогда как зеленую эмиссию можно обнаружить в цитозоле и ядрах (68).При воздействии 2-фотонного облучения заметное уменьшение красной флуоресценции АО наблюдалось для клеток A549, обработанных 5-НЧ ( SI Приложение , рис. S16), что указывает на то, что 2-фотонная ФДТ индуцировала разрушение лизосом за счет 5-NPs , тогда как клетки в контрольной группе, которые были облучены одним светом, не были повреждены, поскольку было обнаружено как красное, так и зеленое излучение, что свидетельствует об отсутствии повреждения лизосом, вызванного воздействием света ( SI Приложение , рис. S16). Нарушение целостности лизосом также может привести к высвобождению лизосомных протеаз, таких как катепсин B, из лизосом в цитозоль, что вызывает апоптоз (26).Внутриклеточное распределение катепсина B до и после 2-фотонной PDT с использованием 5-NPs было обнаружено с помощью анализа окрашивания Magic Red (69). После 2-фотонной PDT наблюдалась красная флуоресценция от диффузии Magic Red из лизосом в цитозоль ( SI Приложение , рис. S17), что указывает на высвобождение катепсина B в цитозоль после PDT-опосредованного повреждения лизосом.

Анализ двойного окрашивания аннексином V / йодидом пропидия (70) был использован для подтверждения того, что 2-фотонная ФДТ с использованием 5-НЧ может эффективно индуцировать апоптоз / некроз.Клетки A549, обработанные 5-НЧ и подвергнутые световому облучению, показали как зеленое излучение аннексина V, так и красное излучение иодида пропидия ( SI Приложение , рис. S18), что указывает на повреждение клеток, опосредованное 2-фотонной световой активацией 5-НЧ , которые приводят к апоптозу / некрозу. Эти результаты предполагают, что клетки были в некрозе или позднем апоптозе после 2-фотонной ФДТ.

Двухфотонная ФДТ в направлении трехмерных многоклеточных сфероидов.

Чтобы имитировать патофизиологию солидных опухолей in vivo, такую ​​как специфические гипоксические области в опухолевом центре, градиенты пролиферации и барьеры для проникновения лекарств, 3D A549 MCS были использованы в качестве модели для оценки терапевтической эффективности 5 -NPs -опосредованная 2-фотонная ФДТ.3D MCS инкубировали с 5-NPs в течение 24 часов с последующей 1-фотонной и 2-фотонной микроскопией Z-stack визуализации (Рис. 5 A и SI Приложение , Рис. S19). Двухфотонное возбуждение показало преимущество перед однофотонным возбуждением с большей глубиной проникновения. Однофотонное сканирование Z-стопки показало более слабую люминесценцию на глубине более 120 мм из-за сильного поглощения видимого света тканями. Напротив, сильная красная люминесценция на каждом участке глубины наблюдалась при использовании 2-фотонного возбуждения для сканирования из-за глубокого проникновения длины волны 2-фотонного возбуждения в терапевтическое окно для ткани.

Двухфотонная ФДТ в направлении трехмерных МКС. ( A ) Одно- и двухфотонно активированные изображения Z-стека MCS A549 после инкубации 5-NP . ( B ) Репрезентативные конфокальные изображения MCS, окрашенных кальцеином-AM после различной обработки. ( C ) Репрезентативные долгосрочные изображения MCS после различных процедур. (Масштаб: 200 мкм.)

Эффективность 2-фотонной PDT с помощью 5-NPs исследовали с использованием анализа жизнеспособности клеток кальцеин-ацетоксиметил (кальцеин-AM).Кальцеин-AM может различать живые клетки, реагируя с универсальной эстеразой в живых клетках с образованием зеленого флуоресцентного продукта (71). Для группы лечения MCS, совпадающие с 5-NP, и кальцеин-AM, подвергались двухфотонному световому облучению, а CLSM использовался для визуализации MCS (рис. 5 B ). Сигнал флуоресценции не наблюдался для групп обработки, тогда как сильная зеленая флуоресценция наблюдалась для контрольной группы, MCS совпадали с 5-NP, и кальцеин-AM, но не подвергались световому облучению, а MCS, обработанные кальцеином-AM, подвергались только воздействию к световому облучению.Эти результаты показывают, что ни 5-NP, , ни 2-фотонное световое облучение не вызывают гибели клеток в MCS, а активация 5-NPs с помощью 2-фотонного светового излучения эффективно вызывает повреждение MCS.

Была исследована способность 5-НЧ ингибировать рост MCS с помощью 2-фотонной PDT. MCS инкубировали с 5-NP в течение 1 дня перед тем, как подвергнуть облучению 2-фотонным светом, затем хранили в темноте, и их объем регистрировали до 6 дня (рис.5 C и SI Приложение , рис. S21). Объемы MCS, обработанные 5-NP , постепенно уменьшались после 2-фотонной PDT, и конечный объем составил 80,4% от исходного объема на 1 день. Напротив, контрольная группа и MCS, обработанные 5-ALA, показали заметный рост. в их объемах с течением времени после той же процедуры (186,8 и 181,2% относительно исходного объема для контрольной группы и группы 5-ALA соответственно). Эти исследования показывают, что 2-фотонная ФДТ с использованием 5-NP может эффективно подавлять рост MCS и достигать большей терапевтической эффективности, чем 5-ALA.

Двухфотонная ФДТ In Vivo.

Эффективность 5-NP в качестве PS для 2-фотонной PDT была дополнительно проиллюстрирована исследованиями in vivo на голых мышах с ксенотрансплантатом опухоли A549. 5-НЧ вводили внутриопухолевым путем мышам в дозе 3 мг / кг, которых облучали лазером с длиной волны 820 нм (50 мВт, 1 кГц, ширина импульса 35 фс, 20 с / мм) через 2 часа после инъекции. (группа 1). В качестве контроля группа 2 получала инъекцию физиологического раствора с лазерным воздействием, группа 3 получала только инъекцию 5-NPs без лазерного воздействия, а группа 4 получала только инъекцию физиологического раствора.Эффект лечения 2-фотонной ФДТ на рост опухоли оценивали путем мониторинга объемов опухоли мышей в течение 15 дней (рис. 6 A –C). В группе 1 рост опухолевых клеток был значительно подавлен, и в конце лечения наблюдалось уменьшение объема опухоли с небольшой массой опухоли под кожей (65,2% от первоначального объема). Напротив, опухолевые клетки в группах 2, 3 и 4 выросли в большие солидные опухоли через 15 дней с более чем 12-кратным увеличением объема опухоли.Масса тела мышей в каждой группе немного увеличилась в процессе лечения (фиг. 6 D ), что указывает на неинвазивность схемы лечения. Эффективность ФДТ дополнительно оценивалась гистологическим исследованием гематоксилина и эозина на срезах тканей из различных групп лечения. Опухолевая ткань в группе 1 показала очевидное деструктивное повреждение после лечения, тогда как морфологические изменения опухолевой ткани в других группах не наблюдались ( SI Приложение , рис.S22). Кроме того, в первичных органах в группе 1 не выявлено патологических изменений по сравнению с другими группами ( SI Приложение , рис. S22). Эти наблюдения демонстрируют, что 5-NPs могут эффективно повреждать опухолевую ткань при облучении 2-фотонным светом с низкой системной токсичностью по отношению к здоровой ткани in vivo.

Исследования 2-фотонной ФДТ in vivo. ( A и B ) Репрезентативные фотографии опухолей A549 у мышей при различных обработках.( C ) Кривые ингибирования роста опухоли in vivo для мышей при различных обработках. ( D ) Средняя масса тела мышей с опухолью при 4 различных обработках.

Получить Cloud Mail.Ru — Microsoft Store

С 30 декабря все новые пользователи получают 25 ГБ бесплатного хранилища. Объем бесплатного хранилища, предоставляемого всем пользователям, зарегистрировавшимся на эту дату, остается неизменным — 100 ГБ и 1 ТБ (для участников акции). Облако Mail.Ru для Windows Phone — бесплатный сервис для сохранения фото, видео, музыки, презентаций, документов и других файлов.С Cloud Mail.Ru все ваши файлы всегда будут под рукой. Загрузите файлы на облачный диск, и они автоматически станут доступны на всех ваших устройствах. • Загрузите фотографии со своего мобильного телефона. Настройте автоматическое сохранение на диск в вашем облаке Папка загрузки камеры. В целях экономии трафика рекомендуется выполнять загрузки при подключении к Wi-Fi. • Делитесь файлами и папками с друзьями и коллегами одним щелчком мыши. • Экономия трафика — вы можете отправить ссылку на изображение, видео или документ с помощью SMS, электронной почты, мгновенного обмена сообщениями или через социальную сеть.• Просматривайте документы MS Office: Word, Excel, Power Point, PDF, а также файлы в других форматах. • Загружать в телефон и редактировать документы в приложениях MS Office. • Облако Mail.Ru для Windows Phone позволяет смотреть видео и слушать музыку, а также создавать плейлисты из ваших любимых треков. • Управляйте своими файлами из любого места — переименовывайте, удаляйте, создавайте папки. • Храните важные файлы в надежном месте для хранения. Что бы ни случилось с вашим диском на вашем ПК или телефоне, все файлы, хранящиеся в облаке, останутся нетронутыми.• Приложение Cloud Mail.Ru доступно для смартфонов Android, iOS, Windows Phone. • Не нужны никакие провода, флешки и карты памяти. Все, что вам нужно, это бесплатное приложение Cloud Mail.Ru и подключение к Интернету. Приложение протестировано и адаптировано для устройств на базе Windows Phone 7 и Windows Phone 8. Приложения протестированы на Nokia Lumia, HTC и Samsung.

Как зарегистрироваться в Gmail, Yahoo Mail и Mail.Ru for AMP Emails

Google официально запустил AMP Emails в 2019 году для веб-приложения Gmail, превращая электронные письма со статических страниц в динамические микровайты прямо в вашем почтовом ящике. В настоящее время электронные письма AMP поддерживаются Yahoo Mail и Mail.ru помимо Gmail. Но прежде чем вы сможете отправлять электронные письма AMP этим почтовым клиентам, вам нужно будет зарегистрироваться у них для получения электронных писем AMP. В этом блоге мы узнаем, как зарегистрироваться в этих почтовых клиентах, чтобы начать отправлять интерактивные электронные письма AMP.

Оглавление

Регистрация для получения одобрения AMP от почтовых клиентов

В настоящее время Gmail, Yahoo Mail и Mail.ru поддерживает отправку писем AMP. Эти почтовые клиенты требуют, чтобы отправитель выполнил определенные требования для отправки электронных писем AMP, и этот процесс известен как добавление в белый список. Помимо создания как AMP, так и HTML / текстовой версии почты, вам нужно будет настроить SPF, DMARC и DKIM для подтверждения вашего домена. Кроме того, вам необходимо зарегистрироваться в этих почтовых клиентах, следуя их инструкциям. Здесь мы предоставляем пошаговое руководство о том, как вы можете зарегистрироваться в этих почтовых клиентах, чтобы начать отправлять электронные письма AMP.

Как зарегистрироваться в Gmail для отправки динамических писем

Когда вы все настроены для запуска своих электронных писем AMP для своих пользователей, вы должны зарегистрироваться в Gmail, выполнив следующие действия:

1. Убедитесь, что вы соблюдаете все рекомендации и требования, перечисленные Google.

2. Отправьте настоящее готовое к работе электронное письмо AMP со своих производственных серверов (или сервера с аналогичными заголовками SPF / DKIM / DMARC / «From:» / «Return-Path:»), включая часть MIME AMP-сообщения на адрес ( [email protected]). Это необходимо Google, чтобы проверить соответствие всем своим руководствам и требованиям.

3. Когда вы отправляете это электронное письмо, выполните следующие действия:

4. Убедитесь, что динамическая AMP-версия сообщения электронной почты является правильной перед отправкой электронной почты, протестировав ее в Gmail AMP для электронной почты Playground.

5. Вместо того, чтобы пересылать электронное письмо, отправьте его напрямую. При пересылке электронной почты AMP Gmail удаляет части MIME AMP.

6. Заполните регистрационную форму и ждите их ответа.Срок обработки большинства запросов составляет 5 рабочих дней.

Попадание в белый список Gmail

Присоединение к отправителю электронного письма AMP зависит от того, насколько хорошо вы соблюдаете правила массовых отправителей Gmail, которые могут быть изменены без предварительного уведомления. Вы будете нести ответственность за соблюдение настоящих правил.

• Ваша регистрация может быть отозвана в любое время при обнаружении злоупотреблений или нарушений политики или по собственному усмотрению Google.

• Вас могут попросить предоставить дополнительную информацию во время процесса регистрации или даже после завершения регистрации для проверки вашего соответствия.

• Сообщаем, что Google отклонит вашу заявку, если вы отправите тестовое (пустое) электронное письмо, если вы не отправите электронное письмо для проверки, или даже если вы отправите электронное письмо, которое пересылается или не содержит AMP MIME. часть.

Как зарегистрироваться в Yahoo Mail для отправки электронных писем AMP

Yahoo Mail (Verizon Media) требует, чтобы вы зарегистрировались в ampverification @ yahoo.com, прежде чем включать AMP-контент в электронных письмах, отправляемых их пользователям. Чтобы приступить к работе, вы можете выполнить следующие действия:

1. Прочтите правила и требования Yahoo Mail и убедитесь, что вы их соблюдаете

2. Отправьте настоящее готовое к работе электронное письмо с вашего рабочего сервера с действующим SPF / DKIM / DMARC и часть AMP MIME по адресу [email protected]. Не пересылайте электронные письма на этот адрес.

3. Заполните регистрационную форму и дождитесь утверждения

После того, как Yahoo Mail ответит с одобрением, вы все настроены для отправки электронных писем AMP своим пользователям.

Как зарегистрироваться на Mail.ru для отправки электронных писем AMP

Чтобы использовать AMP на Mail.ru, в будущем должны быть удовлетворены и удовлетворены сопутствующие потребности.

1. В домене, который вы используете для отправки электронных писем, есть веб-сайт с логотипом и информацией о компании. Тематика сайта должна соответствовать содержанию рассылки.

2. SPF, DKIM, DMARC устанавливаются для домена. Политика DMARC установлена ​​в режиме «блокировки»: p = карантин или p = отклонить.

3. Вы отправляете электронные письма со значительным DKIM не менее 3 месяцев. Они соответствуют правилам рассылки Mail.ru.

4. Количество писем, отправленных с домена, не менее 5К в месяц (в любом случае за 3 месяца).

5. В заголовках рассылок есть заголовок List-Unsubscribe. Вы выводите клиента из рассылок как после нажатия на символ «Снять» в интерфейсе Mail.ru, так и после перехода по ссылке в письме.

6. Домен зарегистрирован на Postmaster Mail.ru. Вы получаете для этого Feedback Loop (FBL) и сразу обрабатываете отчеты.

7. Вставьте часть AMP в одно из своих электронных писем, которое готово.

8. Отправьте адрес, с которого вы обычно отправляете электронные письма, чтобы мы могли включить его в белый список. В запросе укажите контактный адрес, который мы можем использовать для переписки, если возникнут проблемы с вашими рассылками.

9. Электронное письмо с предложением использовать AMP должно пройти проверку SPF, DKIM, DMARC для вашего домена.

В Mail.ru вы можете отправлять тестовые письма только с утвержденных адресов. Так что лучше сначала получить одобрение, а затем протестировать блоки AMP.

Все еще нужна помощь?

Смущает несколько шагов и рекомендаций по отправке электронных писем AMP.